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人钠/二羧酸协同转运蛋白3基因调控肾小管上皮细胞线粒体膜电位的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 观察人钠/二羧酸协同转运蛋白3(hNaDC3,)对人肾脏近曲小管上皮细胞(HKC)线粒体膜电位的变化及其对细胞能量代谢的影响。方法 应用亚克隆技术构建正义pcDNA3-hNaDC3和反义pcDNA3-AhNaDC3两个真核表达载体,通过脂质体LipofectAMINE将pcDNA3-hNaDC3及pcDNA3-AhNaDC3转染至HKC细胞。克隆筛选后,用RT—PCR、Northern印迹及Western印迹鉴定外源基因的整合和表达。荧光探针JC-1观察各细胞系线粒体膜电位的变化。结果 外源hNaDC3基因稳定整合到HKC细胞基因组中,并获得高、低表达。转染正义hNaDC3cDNA的HKC细胞线粒体膜电位降低,JC-1在线粒体内形成单体,发出绿色荧光;而转染反义hNaDC3cDNA的HKC细胞线粒体膜电位略微升高,JC-1形成聚合体,发出红色荧光。结论 hNaDC3过表达引起线粒体膜电位降低,反义hNaDC3则使线粒体膜电位略微升高。提示NaDC3可能通过使线粒体膜电位下降,参与了细胞能量代谢。 相似文献
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目的:探讨中国实验用小型猪肾小球足细胞的发育过程。方法:应用过碘酸-希夫氏染色观察中国实验用小型猪胚胎不同时间点(胚胎28d至出生后21d,以周为单位,共17个时间点)肾小球发育过程中的形态学变化。应用免疫荧光技术检测猪胚肾不同阶段(帽状间充质、肾小囊体、逗号形体、"S"形体、毛细血管袢期肾小球、成熟肾小球)足细胞的发育过程。结果:猪在胚胎第28天(E28d)后肾已开始发育,可见典型的帽状间充质、肾小囊体、逗号形体和"S"形体;E35d可见肾小球形成,包括近皮质的不成熟肾小球以及近髓质的成熟肾小球。胚肾组织免疫荧光染色显示:胚肾早期足细胞标志物WT1表达于Six2阳性的后肾帽状间充质细胞,相继表达于肾小囊体、整个逗号形体、逗号形体尾部以及"S"形体下端,最终局限于肾小球足细胞。结论:中国实验用小型猪的足细胞来源于Six2阳性的后肾帽状间充质细胞,经过肾小囊体、逗号形体、"S"形体、毛细血管袢期肾小球阶段,发育成为成熟肾小球的足细胞。 相似文献
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白雪源 《国际生物制品学杂志》1992,(4)
人类免疫缺陷症病毒(HIV)感染者可发生进行性细胞及体液免疫功能障碍,其中体掖免疫缺陷与肺炎球菌的感染有关。艾滋病人对肺炎菌苗的抗体应答不甚理想。研究表明叠氮胸苷(Zidovudine)可增强B细胞和提高HIV感染者的T辅助细胞(T_H)数及皮肤试验应答,作者认为有可能改善HIV患者的抗 相似文献
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白雪源 《国际生物制品学杂志》1990,(3)
用鲎试验及兔热原试验可测定脑膜炎球菌多糖和蛋白菌苗中微量内毒素,该法虽敏感但不能作定量测定.最近作者建立了一种新的测定法,即SDS-PAGE银染法.通过SDS-PAGE电泳将大分子蛋白和多糖与内毒素分开,然后银染.应用这种方法可定量测定内毒素含量. 相似文献
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白雪源 《国际生物制品学杂志》1991,(4)
b型流感杆菌(Hib)荚膜多糖菌苗(PRP)及多糖与白喉类毒素共价结合菌苗(RRP-D)在美国及加拿大已被批准使用。但有关其免疫原性、效力及免疫对象等方面仍有争论。本文作者试图对这些问题作一全面评价,以供有关人员参考。作者阐述了从1966年至1989年间有关Hib菌苗研制的文献,并用计算机进行统计,分析后发现;在阿拉斯加及芬兰进行的现场试验(免疫3剂)中,PRP-D的效力在临床上有所不同(分别为37%及83%),综合两次 相似文献
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白雪源 《国际生物制品学杂志》1992,(4)
将编码霍乱弧菌O抗原的基因克隆入口服伤寒活菌Ty21a制备霍乱菌苗。EX645和EX880是以Ty21a为载体可表达霍乱弧菌O抗原诱导抗霍乱杀菌反应的克隆菌株。本文分析了由这两个菌株诱导所产生的血清杀菌抗体应答与免疫前杀菌抗体水平之间的关系。EX645保留了Ty21a合成伤寒O多糖的能力,而EX880则不能合成。用这两菌株制成的冻干菌苗分别在0、2、5天给健康志愿者口服共3剂,口服前及口服后14天采血,用依赖补体的杀菌试验滴定血清样品,霍乱菌569B为靶菌,同时用已知活性标准血清作 相似文献
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目的:研究奥美沙坦对心力衰竭大鼠肺脏α1A-肾上腺素受体(α1A-AR)和β1、β2肾上腺素受体(β-AR)表达水平及对血浆肾素活性(plasma rennin activity,PRA)和血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)水平的影响。方法:45只Wistar大鼠随机分为正常对照组(A组)、假手术组(B组)、心力衰竭模型对照组(C组)和奥美沙坦组(D组),采用灌胃法给药。超声心动图检测用药前后大鼠心脏功能,灌胃治疗8 w后,腹主动脉取血,采用放射免疫法测定各组大鼠PRA、AngⅡ水平,取大鼠肺组织,采用蛋白质免疫印迹法(Western Blot)测定各组的α1A-AR、β1-AR和β2-AR的蛋白表达水平。超声心动图检测用药前后大鼠心脏功能。治疗8 w后,腹主动脉取血,采用放射免疫法测定各组大鼠PRA、AngⅡ水平,取大鼠肺组织,采用蛋白质免疫印迹法(Western Blot)测定各组的α1A-AR、β1-AR和β2-AR的蛋白表达水平。结果 :用药前A组与B组比较,大鼠左心室射血分数(LVEF)组间差异无统计学意义(P>0.05);与B组比较,C组、D组大鼠LVEF明显降低(均P<0.05)。用药后,与C组比较,D组LVEF显著改善(P<0.05)。用药后,A组与B组大鼠PRA、AngⅡ水平差异无统计学意义(P>0.05);与B组比较,C组大鼠PRA、AngⅡ水平明显升高(P<0.01);与C组比较,D组大鼠血浆PRA、AngⅡ水平明显降低(P<0.05);在蛋白质表达水平,A组与B组用药后比较,各受体水平差异无统计学意义(P>0.05)。与B组比较,C组大鼠α1A-AR、β1-AR表达水平显著下调(P<0.05),β2-AR表达水平明显上调(P<0.01);与C组相比,D组α1A-AR、β1-AR及β2-AR水平均显著升高(均P<0.05)。结论:奥美沙坦能够改善心肌梗死后心力衰竭大鼠的心脏功能,提高LVEF,同时能够降低心力衰竭时血浆中升高的PRA和AngⅡ,并使心力衰竭大鼠肺脏下调的α1A-AR、β1-AR上调,表达增加的β2-AR进一步上调。奥美沙坦对慢性心力衰竭(chronic heart failure,CHF)时交感-肾上腺素系统激活后肾上腺素受体表达的调节作用和对PRA、AngⅡ的抑制作用,有利于维持心力衰竭时肺脏的通气/血流比值,减轻肺水肿,改善心力衰竭时的肺循环淤血,对CHF的肺脏起到了有益的保护作用。 相似文献
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目的:克隆正常人p19ARF基因,探讨其对肿瘤细胞增殖、细胞周期与凋亡的影响。方法:用流式细胞术、MTT测定及末端标记观察p19ARF基因对白血病细胞HEL和K562的作用。结果:将p19ARF导入HEL细胞后可明显抑制细胞繁殖,细胞周期被阻滞在G1期并可导致部分细胞凋亡。但是p19ARF对于p53基因突变的K562细胞的增殖和细胞周期没有明显的影响,也不能诱导其凋亡。结论:p19ARF可显著抑制人白血病细胞的增殖,其抑制作用依赖于p53基因的存在。 相似文献
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