人TPO成熟肽N端196个氨基酸的表达、纯化及生物学活性研究

人ＴＰＯ成熟肽Ｎ端１９６个氨基酸的表达、纯化及生物学活性研究刘丽田生礼赵建增谢宝树冷爱军血小板生成素（Ｔｈｒｏｍｂｏｐｏｉｅｔｉｎ，ＴＰＯ），ＴＰＯ基因工程方面的工作目前开展的较多，但因对其结构与功能，如糖基化与生物学活性及半衰期的关系了解不够，在设...     

人精子和淋巴细胞染色体脆性部位的表达

根据Sutherland 1979年提出的脆性部位的定义,至少有104种普通脆性部位(c-fra)、罕见脆性部位(r-fra)或有争议脆性部位(c-r-fra)被描述。并且认为染色体脆性部位是对受害者子代影响的一个危险因素。因为在一些病例中,带有染色体脆性部位个体的子代中发现有非整倍体和原发性结构重排的改变。但这些重排中的断裂点与其父母表达的脆性部位并不一致。所以对这些个体来说,分析精子染色体脆性部位是     

血小板生成素突变体的克隆和扩增及其融合蛋白在大肠杆菌中…

目的：通过获得编码血小板生成素成熟肽Ｎ端１￣１９６个氨基酸的突变体ｃＤＮＡ在大肠杆菌ＪＭ１０９中的表达，为Ｔｐｏ进一步的结构和功能研究提供材料来源。方法：用多聚酶链反应及ＤＮＡ重组技术，将ＰＣＲ产物克隆到ｐＵＣ１９载体并测序，然后克隆到表达载体ｐＭＡｌ－ｃ２上。     

Hoechst33342/PI双染法和TUNEL染色技术检测神经细胞凋亡的对比研究

目的： 利用Hoechst33342/PI双染法和原位末端标记法(TUNEL)染色检测纳米二氧化硅(nm-SiO2)对神经细胞凋亡的影响,比较两种检测方法的优缺点。方法：以体外培养的人神经母细胞瘤SK-N-SH为研究对象,15和30 nm粒径的nm-SiO2(剂量为2.5、5、10 μg/mL)分别处理细胞24 h,另设1~5 μm SiO2组和溶剂对照组,采用Hoechst33342/PI双染法和TUNEL染色检测各处理组对SK-N-SH细胞凋亡的影响。结果：与对照组相比,两种检测方法分析均显示了nm-SiO2处理组SK-N-SH细胞凋亡率显著增加(P<0.05),且具有尺寸、剂量依赖性,而微米级SiO2对凋亡的影响不显著(P>0.05)。结论：nm-SiO2能诱导SK-N-SH细胞凋亡。Hoechst33342/PI双染法特异性高,简单易行;TUNEL法灵敏度高,能检测少量的细胞凋亡,但成本较高,两种方法可结合使用以便更加准确的检测神经细胞的凋亡。     

X射线照射小鼠体内自由基及过氧化脂质含量的变化

本文用电子自旋共振（ＥＳＲ）方法测定了Ｘ射线照射后小鼠脾脏自由基含量及用硫代巴比妥酸法测定了肝脏过氧化脂质（ＬＰＯ）的变化。结果表明，在照射后１、３Ｇｙ，自由基含量升高，分别为对照组的１．２１和２．６２倍，３Ｇｙ照射后，随时间延长自由基含时亦逐渐增加，而ＬＰＯ在不同剂量照射后随剂量的增加而增加。３Ｇｙ照射后至４８ｈ，ＬＰＯ逐渐升高，至７２ｈ开始下降。其变化与自由基的变化基本一致。     

一种简便快速微核测定方法

本文采用人离体血淋巴细胞培养“低渗膨胀法”对不同辐射剂量诱发的淋巴细胞微核进行不同培养时间的观察。结果表明，在所观察的剂量范围内，培养４０ｈ与培养７２ｈ的淋巴细胞微核率均良好的线性关系，其直线方程分别为：Ｙ４０＝１２．１９３２＋０．２３０９Ｄ（ｒ＝０．９６６９，Ｐ〈０．０５），Ｙ７２＝１１．１６９４＋０．２３２０Ｄ（ｒ＝０．９６１９，Ｐ〈０．０５）。培养４０ｈ与培养７２ｈ的微核率，经回归分析其方程     

人血小板生成素在CHO细胞中的稳定表达及其产物鉴定

目前，血小板生成素（ＴＰＯ）的基因工程研究是继促红细胞生成素（ＥＰＯ）之后的又一个热点。由于对ＴＰＯ结构与功能的关系了解不够，其基因工程方面的研究在表达系统的选择和分子结构的设计上均存在很大的盲目性。针对这一问题，作者欲对ＴＰＯ的糖基化程度与其生物学...     

血小板生成素突变体融合蛋白表达及纯化研究

目的：用大肠杆菌融合蛋白表达载体ｐＭＡＬ－ｃ２构建人血小板生成素突变体融合蛋白表达质粒ｐＭＡＬ－ＴＯＰＭ，方法：采用基因重组和表达，ＳＤＳ－聚丙烯酰胺胶电泳和蛋白纯化技术。结果：ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析表明，ＩＰＴＧ诱导５ｈ后大肠杆菌ＪＭ１０９表达到最高水平，约占大肠杆菌菌体总体蛋白的３６．６％，除了大肠杆菌ＲＲ１不表达以外，大肠杆菌ＤＨ５αＨ１０１均有较高水平的表达，表达产物血小板生成素突变体融合蛋     

一种高活性人新型TNF的研制

肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）除抗肿瘤活性外，还具有其它广泛的生物学活性，但因其严重的毒副作用极大地限制了它的临床应用。在ＴＮＰ结构与功能关系研究的基础上，该文作者利用ＰＣＲ技术构建了一种新型人ＴＮＦ的编码基因，并使其在大肠杆菌中进行了高效表达。活性测定结果表明，新型ＴＮＦ对Ｌ９２９细胞的细胞毒活性较天然型人ＴＮＰ增高了约７１４倍。     

电离辐射对免疫活性细胞及白细胞介素产生的影响

介绍了电离辐射对免疫活性细胞及白细胞介素产生的影响,认为参与机体免疫反应的细胞及白细胞介素产生细胞对辐射的敏感性不同。探讨辐射对它们的影响,对于了解辐射免疫调节有一定意义。