军团菌MOMPS基因的克隆并在原核系统中表达

以军团菌DNA为模板，PCR扩增获得军团菌主要外膜蛋白基因（Major outer membrane protein gene，ompS），与原核表达质粒pUC18定向重组，构建重组质粒，转化大肠杆菌BL21，并用限制性酶酶切分析、聚合酶链式反应、核酸序列分析、十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳、Western印迹进行鉴定。实验结果表明我们扩增出了军团菌914bp的ompS基因，成功构建了重组质粒pLPompS，并在原核系统中得到了表达。     

循证护理在乳癌术后放疗皮肤反应中的应用

目的应用循证护理探讨乳癌术后放疗患者皮肤反应的有效干预方法。方法根据76例患者产生皮肤反应的具体情况，提出护理问题，收集相关证据，结合实际制订切实可行的护理计划，采取相应的护理措施。结果76例患者干预后皮肤反应均得以缓解，减轻了患者的痛苦，患者能顺利完成放射治疗，达到有效的照射剂量。结论应用循证护理找出乳癌放疗患者皮肤损伤因素，采用循证护理寻求科学完整的护理方案，有助于提高护理质量。     

mompS-linker-flaA融合基因原核表达载体的构建及诱导表达

目的在嗜肺军团菌主要外膜蛋白S基因(mompS)和鞭毛亚单位蛋白基因(flaA)基因间加入一段柔性链接头(Linker),以构建mompS-Linker-flaA融合表达载体,并使其在大肠杆菌中表达。方法以嗜肺军团菌1型DNA为模板,PCR分别扩增获得嗜肺军团菌mompS基因和flaA基因,与带有硫氧还蛋白(Trx)基因的高效原核表达质粒pET32a( )定向重组,构建含mompS-Linker-flaA基因的重组质粒pET-LpSLF,经限制性核酸内切酶酶切鉴定、PCR和核酸序列分析后,以IPTG诱导表达Trx-MOMPS-Linker-FlaA融合蛋白,用SDS-PAGE及Westernblotting进行鉴定。结果限制性核酸内切酶酶切鉴定、PCR和核酸序列分析表明,我们扩增出了嗜肺军团菌906bp的mompS及1440bp的flaA基因,成功构建了重组质粒pET-LpSLF,SDS-PAGE及Westernblot分析显示重组质粒pET-LpSLF在原核系统中得到了表达。结论嗜肺军团菌mompS-Linker-flaA基因在大肠杆菌中得到了表达,为进一步从分子水平研究其免疫原性、免疫保护性及其在临床诊断上的应用价值提供研究基础。     

促肾上腺皮质激素在类风湿关节炎中的作用

类风湿关节炎是一种慢性自身免疫性疾病,其发病机制目前尚不清楚。近年来,随着神经内分泌学的发展,促肾上腺皮质激素在其发病过程中的作用逐渐受到人们的重视,从而为今后临床的早期诊断及药物的应用提出了新的思路。     

杜氏利什曼原虫无鞭毛体蛋白基因真核表达重组质粒构建

目的 构建杜氏利什曼原虫无鞭毛体蛋白（amastin）编码基因的真核表达重组质粒pcDNA3.1-amastin。方法 提取杜氏利什曼原虫基因组DNA进行PCR扩增,将扩增出的无鞭毛体蛋白基因片段导入质粒载体pcDNA3.1（＋）,构建真核表达重组质粒pcDNA3.1-amastin。结果 扩增出大小约550bp的无鞭毛体蛋白基因;重组质粒pcDNA3.1-amastin经鉴定正确。结论 成功构建杜氏利什曼原虫无鞭毛体蛋白基因真核表达重组质粒pcDNA3.1-amastin。     

杜氏利什曼原虫四川分离株无鞭毛体蛋白基因的克隆及真核表达

目的克隆、真核表达杜氏利什曼原虫四川株的无鞭毛体蛋白(amastin)编码基因。方法PCR扩增杜氏利什曼原虫四川汶川人株L．d．SC10H2与四川南坪犬株L．d．SC7的无鞭毛体蛋白基因,将该基因导入pcDNA3．1( ),构建真核表达重组质牲,转染NIH3T3细胞,采用免疫荧光法鉴定重组质粒的瞬时表达;RT-PCR和Western blotting鉴定稳定表达,结果2株杜氏利什曼原虫均扩增出552 bp的无鞭毛体蛋白基因。同源性为86％。转染后在NIH3T3细胞膜和细胞内观察到较强的绿色荧光,表明无鞭毛体蛋白基因在NIH3T3细胞中获得短暂表达。细胞裂解产物经Western blotting,在相对分子质量(Mr)约20000处检测到阳性杂交信号,表明无鞭毛体蛋白基因在NIH3T3细胞内获得了稳定表达。结论获得了我国杜氏利什曼原虫四川分离株L．d．SC10H2和L．d．SC7的无鞭毛体蛋白基因序列,并在NIH3T3细胞中稳定表达。     

多瑞吉在头颈部肿瘤放化疗中应用价值的临床观察

目的:评价多瑞吉治疗头颈部肿瘤放化疗相关口腔粘膜炎的疗效和毒副反应.方法:将60例头颈部肿瘤放化疗患者随机分成两组,各30例,使用多瑞吉组为治疗组,未使用多瑞吉组为对照组.观察两组放化疗相关急牲口腔粘膜炎引起的疼痛缓解情况,生活质量评价和多瑞吉的毒副反应.结果:治疗组疼痛缓解率为83％,对照组疼痛缓解率为40％,两组差异有统计学意义.治疗组生活质量明显优于对照组,差异有统计学意义.毒副反应主要有便秘、头晕、恶心,均能耐受.结论:多瑞吉在治疗头颈部肿瘤放化疗相关急性口腔粘膜炎引起的疼痛有明显的缓解作用,并能改善患者的生活质量,毒副反应小,使用方便,值得在临床上推广使用.     

多发伤患者的急救与护理

现代社会中。随着工农业机械化程度的飞速发展。交通事业的发达，多发伤发生率日益增加。又因其生理紊乱严重，创伤复杂持久。不同系统损伤的症状体征相互影响，容易漏诊；病情变化迅速、并发症多、致残率高。因此，它已成为现代急救医学的重要课题。我院2003年至2005年救治多发伤病人148例。现将具体急救措施与护理报告如下。     

剖宫产术后子宫瘢痕处妊娠误诊致大出血3例分析

现对我院近年收治剖宫产术后子宫瘢痕处妊娠大出血3例进行分析如下。1病历摘要例1:28岁。2 a前曾行剖宫产1次,此次因不规则阴道流血1个月余,大出血3 h由乡卫生院转入我院。3 d前在乡卫生院诊断为过期流产予口服息隐配伍米索前列醇,因未见组织物排     

脑脉通对骨髓干细胞动员保护大鼠脑缺血损伤的影响

目的 研究脑脉通对脑缺血大鼠骨髓干细胞动员 (BMSCs) 在血液和脑组织的变化及脑保护作用的影响.方法 大鼠随机分为假手术组、模型组、脑脉通组、动员组、脑脉通+动员组,线栓法制备MCAO动物模型.皮下注射人重组粒细胞集落刺激因子(rG-CSF);脑脉通灌胃用药.检测大鼠外周血WBC及CD34+、脑组织CD34+变化;观察神经功能和脑组织病理改变;测定脑组织含水量和脑梗死面积.结果 模型组大鼠外周血WBC(8.07±1.27)×109/L和CD34+细胞(3.17±0.75)个/μl增加,3 d达到峰值,各治疗组增加更为明显;联合组2和3 d外周血WBC、各时间点CD34+细胞均较动员组增加.各模型组大鼠脑组织CD34+表达增强,7 d达到峰值(33.04±2.62)个/μl;各联合组较动员组增强明显.各模型组大鼠神经评分降低、脑含水量增加、脑梗死面积增大、脑组织病理损伤明显,以7 d显著;动员组大鼠7和14 d的上述指标改善;各联合组较动员组的改善明显.结论 血液WBC数CD34+计数,脑组织、CD34+表达均显著显示,脑缺血可引起BMSCs进入外周血并向脑组织归巢,峰值时间存在差异;G-CSF可使BMSCs分布增加;脑脉通使动员后血液和脑组织BMSCs增多、脑组织峰值时间延长,且使其脑保护作用增强.