抗龋IgY和IgY牙膏对体外培养细胞影响的形态学观察

目的：了解抗龋IgY和IgY牙膏对体外培养细胞的影响。方法：体外培养人成纤维细胞（human skin fibrobasts,HSF）和中国仓鼠卵巢癌细胞（chinese hamster ovary,CHO），分别经不同浓度的抗龋IgY和IgY牙膏处理后常规培养，通过倒置显微镜和电子显微镜观察细胞生长情况和细胞超微结构。结果：经抗龋IgY处理的HSF和CHO细胞生长旺盛，超微结构无变化；经抗龋IgY牙膏处理的HSF和CHO细胞加药后部分细胞出现变圆或脱落、细胞生长缓慢和细胞器变性等变化，第2天恢复良好生长状态。结论：抗龋IgY对体外培养细胞生长、形态无影响；抗龋IgY牙膏中的某些成分可能对培养细胞有短暂的不良影响。     

硝化花粉对哮喘小鼠气道炎症的影响

目的 观察硝化花粉诱导的哮喘小鼠气道的过敏性炎症及肺部的病理变化.方法 60只小鼠按免疫及激发物的不同分为5组,其中A～D组为哮喘模型组,E组为正常对照组.取小鼠的右肺组织,HE染色后观察肺组织病理学变化,计算气管壁厚度(WAt/Pbm)和气道平滑肌厚度(WAm/Pbm);观察支气管肺泡灌洗液(BALF)的细胞学改变;免疫组织化学法检测肺组织内核因子-κB (NF-κB) p65活化和三硝化酪氨酸(3-NT)的表达;TUNEL法检测肺组织内嗜酸性粒细胞(EOS)的凋亡情况.结果 各哮喘模型组小鼠BALF中白细胞总数、EOS和中性粒细胞(NEU)分类计数及其占总细胞数的百分比以及WAt/Pbm和WAm/Pbm、肺组织NF-κB p65核表达阳性率、3-NT阳性信号均显著高于E组,差异有统计学意义(P＜0.01);但各模型组小鼠肺组织的EOS凋亡率显著低于E组,差异有统计学意义(P＜0.01);用尾气硝化花粉免疫和激发的D组较其他模型组的变化更显著(P＜0.05或P＜0.01).Pearson相关分析显示:3-NT表达量与EOS凋亡率呈显著负相关(r=-0.632,P＜0.05);与NF-κB p65核表达阳性率呈显著正相关(r =0.667,P＜0.05).结论 尾气硝化花粉诱发的哮喘小鼠肺组织氧化应激水平升高,使3-NT表达增多,从而激活NF-κB信号通路,使EOS凋亡延迟,产生更严重的气道炎症和病理改变.     

硝化花粉对哮喘小鼠气道反应及炎性细胞因子水平的影响

目的 观察硝化花粉对哮喘小鼠气道反应及炎性细胞因子水平的作用.方法按 免疫物及激发物的不同将60只小鼠分为5组,建立哮喘模型,采用体积描记法检测气道反应性、检查支气管肺泡灌洗液（BALF）细胞学、CBA法测定血清和BALF中IL-17A、IL-10和TNF-α的含量.结果 用硝化花粉免疫和激发哮喘组的气道反应性、BALF中EOS及NEU的数量、血清和BALF中IL-17A、IL-10和TNF-α的含量与其他哮喘模型组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 硝化花粉诱发的哮喘气道高反应更显著,释放更多炎性介质,造成更加严重的气道炎症.     

自体静脉血胸腔注射治疗自发性气胸30例观察

对30例自发性气胸患者在胸腔排气后,抽自体静脉全血40ml患侧胸腔注射,CT或X线诊断自发性气胸,据X线片估测肺压缩体积。结果自体静脉血胸腔注射后能成功地封闭破口,使30例病人均获满意疗效,随诊无复发,特别是针对特发性闭合性气胸1～2次可治愈。提示自体静脉全血胸腔注射是治疗自发性气胸科学、安全、廉价、方便的方法。     

电子顺磁共振在体测量指甲剂量方法的可行性研究

目的 针对核应急医学救援剂量评估的需求,为解决指甲电子顺磁共振（EPR）剂量评估方法中机械诱发信号难以分离的问题,探讨指甲EPR在体测量的可行性。方法 利用自研的指甲在体EPR测量装置,对未剪碎指甲进行整体测量,在无机械诱发信号干扰的条件下研究指甲的本底信号及辐射诱发信号特性,探索通过水处理恢复本底信号的方法;开展指甲实际在体EPR测量实验,评价在体测量条件对EPR波谱的影响。结果 未剪碎指甲的本底信号分布服从正态分布,不同性别志愿者的指甲本底信号差异无统计学意义（P>0.05）;在2~10 Gy范围内建立了剂量响应关系,指甲辐射诱发信号半衰期约为5 d;建立了变温结合水处理的本底信号恢复方法,处理后指甲EPR信号与本底信号差异无统计学意义（P>0.05）;获得了实际在体测量条件下的指甲EPR波谱。结论 利用本方法可以获得不含有机械诱发信号的EPR波谱,初步验证了指甲在体EPR测量用于剂量评估的可行性。     

电镜样品制备中四氧化锇配制方法探讨

目的:进一步优化透射电镜(TEM)样本固定液的条件,为选择更有效、更理想的固定液条件提供可靠的实验依据.探索出一种既节约四氧化锇(osmium tetroxide,OsO4)又能获得良好的固定效果的浓度.方法:对照组:常规磷酸缓冲液配制1%OsO4,实验组:生理盐水配制0.5%,0.6%,0.75%,0.9%和1%OsO4,通过TEM观察不同浓度四氧化锇对肾组织的固定效果.结果:实验组五种浓度的OsO4固定的肾维织与对照缎常规磷酸缓冲液配制的1%OsO4固定的肾组织细胞在电镜下观察均具有良好的反差和高质量的超微结构图像.结论:(1)0.5%,0.6%,0.75%,0.69%和1%OsO4同样其有良好的固定效果,可应用于日常电镜样本制备工作中.(2)生理盐水配制OsO4方法简单,效果良好,可减少常规方法中磷酸缓冲液不容易冲洗干净的弊端.(3)低浓度的OsO4用量,大大节约了OsO4消耗.     

汽车尾气处理花粉对哮喘小鼠辅助性T细胞17/调节性T细胞的影响

目的探讨汽车尾气污染艾蒿花粉,对哮喘小鼠辅助性T细胞(Th)17/调节性T细胞(Treg)比例失衡的影响。方法选择60只6~8周龄的雄性BALB/c小鼠为研究对象。采用随机数字表方法,将60只受试小鼠随机分为A~D与对照组,共计5组,每组均为12只。A组变应原和激发物均为艾蒿花粉提取液;B组变应原为艾蒿花粉提取液,激发物为汽车尾气污染艾蒿花粉提取液;C组变应原为汽车尾气污染艾蒿花粉提取液,激发物为艾蒿花粉提取液;D组变应原和激发物均为汽车尾气污染艾蒿花粉提取液;对照组变应原和激发物均为磷酸缓冲液(PBS)。收集这5组受试小鼠肺组织、支气管肺泡灌洗液(BALF)和脾脏标本分别进行:1HE染色、高倍镜下观察各组小鼠肺组织病理学改变;2统计学比较各组小鼠BALF中IL-17A、-10含量及细胞计数、分类的差异;3统计学比较各组小鼠脾脏单个核细胞中Th17及Treg占CD4+T细胞比例,以及Th17/Treg比值的差异。实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准。结果 1A~D组哮喘小鼠均存在不同程度小支气管管腔收缩及周围组织炎性细胞浸润,以D组程度最严重。2A~D组哮喘小鼠BALF中,IL-17A含量均分别较对照组高,而IL-10含量均分别较对照组低,且差异均有统计学意义(P0.01)。A~C组哮喘小鼠BALF中,IL-17A含量均分别较D组低,而IL-10含量均分别较D组高,且差异均有统计学意义(P0.05)。A~D组小鼠BALF中,细胞总数及嗜酸性粒细胞(EOS)、中性粒细胞(NEU)分类计数,均分别较对照组高;A~C组BALF中EOS及NEU分类计数均分别较D组低,且差异均有统计学意义(P0.05)。3A~D组小鼠脾脏单个核细胞中,Th17细胞占CD4+T细胞比例及Th17/Treg均分别较对照组高,而Treg细胞占CD4+T细胞比例均分别较对照组低,且差异均有统计学意义(P0.01);其中D组小鼠脾脏单个核细胞中Th17/Treg较A组高,且差异有统计学意义(P0.05)。结论汽车尾气污染花粉诱发的哮喘,其细胞免疫失衡更明显,释放更多炎性介质,导致更严重的气道炎症反应。     

Cullin蛋白在生殖系统中的研究进展

Cullin蛋白是Cullin-Ring E3类泛素连接酶(CRLs家族)的组成部分,可通过参与多种蛋白的泛素化修饰来调节蛋白活性,在多种生物学过程中发挥重要作用,目前在生殖系统中的研究日渐增多,本文总结了Culling家族各成员在配子发生与成熟、胚胎发育、生殖内分泌疾病及妇科肿瘤等生殖系统相关疾病中的作用。     

流感嗜血杆菌下气道定植对哮喘小鼠肺组织TH17细胞表达及气道重塑的影响

目的 检测下呼吸道流感嗜血杆菌定植对哮喘小鼠TH17细胞的表达、气道炎症及对气道重塑的影响。方法 用卵清蛋白（ovalbumin,OVA）致敏和激发制备慢性哮喘小鼠模型,同时制作流感嗜血杆菌琼脂糖菌珠,在气道注菌之后的第1、7、21天处理小鼠,观察肺组织病理变化,流式细胞仪检测肺组织TH17细胞表达、测定CD4⁺T细胞TLR4的表达,并进行气道细菌培养和肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid,BALF）细胞计数。结果 与正常组和哮喘非注菌组相比,哮喘注菌组有明显的哮喘症状和感染症状;病理学结果显示哮喘组气道黏膜水肿,管壁增厚,大量的炎性细胞浸润,注菌后炎症加重。哮喘小鼠气道注菌之后,随着时间的延长,气管壁厚度（WAt/Pbm）和平滑肌厚度（WAm/Pbm）均显著高于哮喘非注菌组。细菌学培养结果显示正常组第1、7天气管流感嗜血杆菌培养阳性,第21天阴性;哮喘组注菌后1、7、21天气管流感嗜血杆菌检测均阳性。流式细胞仪检测小鼠肺组织TLR4和TH17在CD4⁺T细胞的表达,哮喘组的TLR4和TH17表达均显著高于正常组,注菌之后二者表达显著增加,观察指标在哮喘注菌组变化更明显,差异有统计学意义（P<0.05）。BALF细胞计数结果显示,哮喘组BALF中细胞数明显高于正常组,注菌后细胞数进一步增多。相关性分析发现,哮喘组小鼠肺组织中CD4⁺T细胞TLR4的表达与BALF细胞总数呈正相关（r=0.746,P<0.05）,TH17表达与CD4⁺T细胞TLR4的表达、气道WAt/Pbm、WAm/Pbm和BALF细胞总数呈正相关（分别r=0.612、0.611、0.537、0.752,P<0.05）。结论 流感嗜血杆菌下呼吸道定植可以通过激活TLR4,增加哮喘小鼠肺组织TH17细胞表达,加重哮喘气道炎症和气道重塑,可能是难治性哮喘预后的重要机制之一。