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人心肌肌钙蛋白I第2和第4个密码子同义突变对其在大肠埃希菌中表达的影响 总被引:1,自引:1,他引:0
目的 对人心肌肌钙蛋白I(cTnI)基因实行定点突变并进行原核表达,观察此突变对cTnI表达量的影响。方法 利用RT-PCR方法从人心肌细胞的总RNA中克隆出编码人心肌肌钙蛋白I的cDNA片段,设计引物将其第2和第4个密码子突变后插入原核表达载体形成重组体,并导人宿主菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达,Ni-NTA树脂纯化后行Western blot鉴定,观察突变对cTnI表达的影响。结果 突变后的cTnI基因与对照组相比在大肠埃希菌中得到高效表达,经纯化可获得电泳单点纯的cTnI蛋白。结论 成功克隆了cTnI基因,所设计的同义突变可促进cTnI在大肠埃希菌中的高效表达。 相似文献
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鸡贫血病毒VP 3基因的克隆及其体外凋亡诱导效应的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
用PCR方法扩增了鸡贫血病毒标准株的vp3基因,并将其克隆于真核表达载体pcDNA3上,构建了重组体pcDNA-vp3.经酶切鉴定及测序分析表明,该片段和预期相符.在体外利用LipofectAMINETM介导的基因转染,将pc-DNA-vp3、pcDNA3分别转入肝癌细胞系HepG2和二倍体肝细胞系L-02中,转染后的RT-PCR结果证实vp3基因在细胞中得到了表达.同时利用筛选稳定表达细胞株的技术和原位细胞凋亡检测法,证明了鸡贫血病毒是以凋亡的方式诱导细胞死亡,并且只诱导癌细胞的凋亡,而不诱导正常或二倍体细胞死亡.表明鸡贫血病毒vp3基因很可能成为一种极具潜力的抗肿瘤生物制剂. 相似文献
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TwosignaltheoryforTcelactivationprovidedanewapproachfortumorgenetherapy[1-2].Expressionofcostimulatorymoleculegeneintransfect... 相似文献
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鸡盆血病毒vp3基因的克隆及其体外凋亡诱导效应的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
用PCR方法扩增了鸡盆血病毒标准株的vp3基因,并将其克隆于真核表达载体pcDNA3上,构建了重组体pcDNA-vp3。经酶切鉴定及测序分析表明,该片段和预测相符。在体外利用LipofectAMINE^TM介导的基因转染,将pcDNA-vp3,pcDNA3分别转入肝癌细胞系HepG2倍体肝细胞系L-02中,转染后的RT-PCR结果证实vp3基因在细胞中得到了表达。同时利用筛选稳定表达细胞株的技术和原位细胞凋亡检测法,证明了鸡盆血病毒是以凋亡的方式诱导细胞死亡,并且只诱导癌细胞的凋亡。而不诱导正常或二倍体细胞死亡。表明鸡贫血病毒vp3基因很可能成为一种极具潜力的抗肿瘤生物制剂。 相似文献
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p53是一种抑癌基因,其编码产物野生型p53蛋白在维持细胞正常生长及抑制恶性增殖过程中起重要作用。p53蛋白功能的丧失和多种肿瘤有关。参与调控p53蛋白功能的因素很多,本文着重从基因组水平、转录后水平、翻译后调节及p53蛋白和其它基因产物的相互作用等几个方面加以综述,以期进一步揭示调控p53蛋白功能的分子机制 相似文献
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调控P53蛋白功能的分子机理 总被引:1,自引:0,他引:1
王宇哲 《国外医学:遗传学分册》1998,21(4):206-208
P53是一种抑癌基因,其编码产物野生型P53蛋白在维持细胞正常生长及抑制生增殖过程中起重要作用,P53蛋白功能的丧失和多种肿瘤有关。参与调控P53蛋白功能的因素很多,本着重从基因组水平、转录后水平、翻译后调节及P53蛋白和其它基因产物的相互作用等几个方面加以综述,以期进一步揭示调控P53蛋白功能的分子机制。 相似文献
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利用基因免疫技术以验证HPV16(湖北株)E7基因在体内的表达状况及抗原性,为进一步发展有效的疫苗或治疗性制剂提供理论依据。取BALB/c小鼠23只,随机分为3组,15只注射含E7基因编码框的重组质粒pL(E7-HB)SN100μg/100μl,4只... 相似文献
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