阻断B7／CD28途径诱导异种免疫耐受的体外研究

目的 探讨H7单抗阻断B7／CD28通路在体外异种细胞免疫反应中的作用。方法 分离豚鼠，大鼠外周血单个核细胞(PBMC)，豚鼠细胞经丝裂霉素处理作为刺激细胞，大鼠细胞作为反应细胞，通过畀种单向混合淋巴细胞培养(Xeno-MLC)，^3H—TdR掺入，酶联免疫吸附分析方法(ELISA)，流式细胞仪(FCM)检测对照组，反应组，B7单抗组的淋巴细胞增殖效应(cpm)，以及IFN-γ，IL-4和CD3^ ，CD3^ CD25^ ，CD4^ ，CD8^ ，CD4^ ／CD8^ 的动态变化。结果 B7单抗组的淋巴细胞增殖效应(cpm)，以及IFN-γ，IL-4和CD3^ ，CD3^ CD25^ ，CD4^ ，CD8^ 的变化均显著低于反应组，但其对CD4^ ／CD8^ 比值无影响。结论 B7单抗可以部分抑制异种细胞问免疫反应，但仍存在其他机制有待阐明。     

北京6～19岁学生全身骨密度的研究

目的　了解 6～ 19岁男女学生全身骨密度 (BMD)的变化规律。方法　利用双能X线骨密度仪对 1139例健康男女学生行全身扫描 ,按性别不同 ,每 1岁分 1个组进行数据统计学分析。结果　 6～ 10岁男女之间身高、体重、BMD、骨矿含量 (BMC)等方面差异无显著性意义。 6～ 14岁女孩和6～ 16男孩其身高、BMD和BMC年增长较明显 ,其后男女孩的身高、BMD和BMC年增长均不明显。在BMD的增长过程中有 2次突增期 :女孩出现在 11和 14岁时 ,男孩出现在 12和 15岁时。 12岁以前的女孩和 14岁以前的男孩其身高与全身总的BMD呈明显正相关 (P <0 0 1,r=0 40 2～ 0 814) ,之后男女孩的身高与全身总的BMD无相关性。男女孩的体重与BMD始终呈显著性正相关 (P <0 0 0 1,r =0 6 5 4～ 0 86 4)。结论　男女孩的身高和BMD生长发育各有特点和规律 ,其生长发育的重要时期为 ,女孩在 14岁以前 ,男孩在 16岁以前。     

异种胸腺修饰对大鼠抗豚鼠天然抗体产生的影响

为观察异种胸腺修饰对大鼠抗豚鼠天然抗体产生的影响 ,将供体豚鼠和受体SD大鼠随机分成对照组 (a组 )、全身照射组 (b组 )、照射 +胸腺注射组 (c组 ) ,a组大鼠腹腔内注射经处理的豚鼠脾淋巴细胞 (5× 10 6个 ) ,7d后流式细胞仪法检测抗豚鼠IgM及IgG类天然抗体水平的变化 ,b、c组在腹腔注射异种抗原前 17d接受全身照射 ,c组大鼠另在全身照射后 3d接受胸腺内豚鼠脾淋巴细胞注射。结果表明 :a组和b组中 ,腹腔注射后两类天然抗体的水平均明显上升 (P <0 0 1) ,c组中 ,腹腔注射后IgM类的水平亦明显上升 (P <0 0 1) ,而IgG类上升受抑。提示异种胸腺修饰能抑制IgG类天然抗体的生成 ,但对IgM类天然抗体的产生无明显影响。     

核素三维显像诊断肝血管瘤

核素肝血池平面显像及断层显像诊断肝血管瘤的价值已早有报道 ,本文对比分析了肝血池平面图像、断层图像、透视三维立体图像诊断肝血管瘤的各项效能 ,旨在观察透视三维立体显像在诊断肝血管瘤中的应用价值。1　资料与方法1 1　临床资料　核素肝血池显像共 12 4例 ,男 78例 ,女 46例 ,年龄 18～ 79岁 ,平均 45岁。全部病例均在肝血池显像前后 1周内行Ｂ超检查 ,同时接受ＣＴ检查有 6 0例。经手术或随访并结合临床各项检查确诊为肝血管瘤 88例 ,原发性肝癌 2 3例 ,转移性肝癌 5例 ,其它肝占位病变 8例。1 2　方法　常规体内标记红细胞后 30ｍ…     

采用改良Ono方法作大鼠腹腔异位心脏移植研究

目的探讨改良ono方法提高大鼠腹腔心脏异位移植存活率。方法55只wistar大鼠作为供体,采用改良的Ono方法吻合至SD大鼠腹腔。结果55只大鼠移植模型,死亡5只（3只死于术后心脏衰竭,2只死于术后肺部感染）,其余均存活超过2个月,无一只死于术后出血。结论改良后的Ono方法可减少模型死亡率,成功率高,结果可靠,为进一步研究心脏移植奠定了基础。     

siRNA对小鼠血管内皮细胞NF-κB p65表达的抑制作用

探索RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术在抑制血管内皮细胞激活中的应用前景.利用阳离子脂质体LipofectamineTM000作为转染试剂将化学合成的小鼠NF-κB p65的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)转染人小鼠EOMA细胞,RT-PCR测定细胞内NF-κB p65 mRNA表达,Westem blot检测细胞内NF-κB p65蛋白水平.同时观察siRNA对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的NF-κB激活的抑制作用.结果显示在转染siRNA后的第24小时,细胞内NF-κB p65mRNA水平降低,蛋白表达量明显减少,而在第48小时、72小时细胞内NF-κB p65蛋白已经无法测出;在TNF-α刺激后,转染siRNA的细胞组内NF-κB p65的表达也明显受到抑制.说明RNAi技术可以抑制NF-κB p65的表达,为进一步研究血管内皮细胞的保护提供了有效的方法.     

笼养恒河猴血清天然抗体IgM的检测

采用流式细胞术连续监测 8只幼年猴自出生后 1月～ 5月天然抗体的演变 ,并检测 9只成年猴天然抗体IgM水平。幼年猴 1月龄前天然抗体IgM阳性细胞比例较低 (9 9%± 6 3% ) ,到 3月龄时可达成年猴的 4 0 % ,5月龄时接近成年水平。 9只成年猴天然抗体IgM阳性细胞比例变化幅度很大 ,从 94 9%到 2 6 3% (均数 77 3%± 2 1 5 % )。提示 3月龄前幼年猴可用作避免超急性排斥反应的受体模型。不管是成年猴还是幼年猴 ,被选择为实验受体进行移植研究时 ,应事先对其体内的天然抗体水平进行检测 ,以确保实验的可比性。     

siRNA对小鼠血管内皮细胞NF-κBp65表达的抑制作用

探索RNA干扰(RNAinterference,RNAi)技术在抑制血管内皮细胞激活中的应用前景。利用阳离子脂质体LipofectamineTM2000作为转染试剂将化学合成的小鼠NF-κBp65的小干扰RNA(smallinterferingRNA,siRNA)转染入小鼠EOMA细胞,RT-PCR测定细胞内NF-κBp65mRNA表达,Westernblot检测细胞内NF-κBp65蛋白水平。同时观察siRNA对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的NF-κB激活的抑制作用。结果显示:在转染siRNA后的第24小时,细胞内NF-κBp65mRNA水平降低,蛋白表达量明显减少,而在第48小时、72小时细胞内NF-κBp65蛋白已经无法测出;在TNF-α刺激后,转染siRNA的细胞组内NF-κBp65的表达也明显受到抑制。说明RNAi技术可以抑制NF-κBp65的表达,为进一步研究血管内皮细胞的保护提供了有效的方法。     

PNMA5基因在肝癌组织中的表达及功能研究

目的:研究功能未知基因PNMA5在肝癌组织中的表达及其与肝癌细胞生长的关系;方法:利用肝癌基因表达谱数据研究发现PNMA5基因在肝癌组织中高表达.采用RT-PCR及实时荧光定量-PCR(real-time fluorescemt quantitative PCR,RFQ-PCR)方法检测PNMA5在人类正常组织以及肝癌组织和癌旁组织中的表达水平;利用RNA干扰技术沉默肝癌细胞株(Focus和PLC)内PNMA5基因的表达;CCK-8实验定量分析内源性PNMA5基因被沉默前后的Focus和PLC细胞生长曲线的变化.结果:在14种人正常组织中,PNMA5只在睾丸、卵巢和脑组织中高表达,PNMA5基因在42%(5/12)的肝癌组织中有明显的上调(与癌旁组织比大干2倍以上,P＜0.05).沉默肝癌细胞株Focus和PLC中内源性PNMA5基因表达后.2种肝癌细胞的生长均受到明显的抑制(P＜0.01),同时,从G1期进入S期细胞明显减少(P＜0.01).结论:PNMA5在维持肝癌细胞恶性表型过程中可能起到重要的作用,可能是一个新的肿瘤一睾丸相关基因.进一步研究其功能有可能发现肝癌发病的新机制,成为肝癌治疗的新靶点.