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目的:初步分析人源性多肽pCM-19的抗菌作用机制。方法:利用荧光素掺入破损细胞膜的原理,采用流式荧光激活细胞分析(FACScan)和扫描电子显微镜分析pCM-19对靶菌膜的作用机制。结果:FACS分析法结果显示pCM-19处理后的大肠杆菌PI着染细菌比例明显高于未处理组,并且随作用时间的延长,PI着染BL-21菌比例增大,20min时达最高水平,20min以后反而降低;扫描电子显微镜观察到pCM-19处理后的大肠杆菌有明显的表面形态学的改变,如细菌体积缩小、细菌表面出现皱缩、凹陷似有孔洞形成。结论:人源性多肽pCM-19可能作用于细菌细胞壁和(或)细胞膜,通过改变其通透性而发挥杀菌作用。 相似文献
2.
人格拉利素来源肽段的构效关系研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:研究人格拉利素功能肽段一级结构与活性的关系.方法:依据确定的生物学活性,在人格拉利素功能肽段CM19的基础上,利用抗菌肽的特点及已知的抗菌肽构效关系研究结果对CM19进行氨基酸取代、缺失及随机排列设计合成5条肽段,通过试管法和平板法检测相应肽段的抗菌活性.结果:CM19氨基端第一个半胱氨酸在发挥抗菌作用中是必需的;阳性电荷数的增加或者分布不合适不改善抗菌活性;氨基酸的排列顺序明显降低抗菌活性;CM19羧基端7肽无明显的抗菌作用.CM12具有广谱抗菌作用,不但对非耐药菌而且对耐药菌具有同样的作用.结论:氨基酸的取代、缺失及排列对人格拉利素肽段的抗菌功能具有明显的影响. 相似文献
3.
目的研究高脂饮食诱导的骨性关节炎发生过程中骨关节软骨病变以及自主运动对骨性关节炎软骨的影响机制,探讨自主运动对膝骨关节炎软骨的保护作用,为临床治疗膝骨关节炎提供有效的实验证据。方法将28只C57BL/6 J小鼠随机分为正常饮食组(C-Sed组,n=6)、正常饮食加运动组(C-Ex组,n=6)、高脂饮食组(HF-Sed组,n=8)及高脂饮食加运动组(HF-Ex组,n=8)。C-Sed组和C-Ex组喂养基础饲料(13.5%Kcal),HF-Sed组和HF-Ex组喂养高脂饲料(60%Kcal)。喂养8周后,C-Ex组和HF-Ex组小鼠采用自主转轮运动进行干预,记录运动数据,运动3周后行颈椎脱臼处死;C-Sed组和HF-Sed组小鼠不进行运动干预,继续喂养不同膳食4周后行颈椎脱臼处死,取膝关节软骨组织进行固定、脱钙,制成4μm厚石蜡切片,并进行HE及甲苯胺蓝染色,测量各组小鼠软骨层厚度,探究自主转轮运动对肥胖小鼠膝骨关节炎软骨形态学的影响。结果喂养12周结束后,与C-Sed组小鼠相比,HF-Sed组小鼠体重明显增加,高脂饮食成功诱导了高脂饮食组小鼠发生肥胖,且经HE及甲苯胺蓝染色后,可观察到与C-Sed组小鼠相比,HF-Sed组小鼠软骨表面粗糙、部分缺损,软骨层厚度降低(P0.001);而HF-Ex组较HF-Sed组小鼠关节软骨表面光滑,软骨层厚度增加,Mankin评分分值降低。结论 3周自主转轮运动可增加高脂组小鼠软骨层厚度,降低Mankin评分分值,延缓骨关节炎软骨退变,起到保护关节软骨的作用。 相似文献
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衰老和有氧运动对大鼠肝脏线粒体DNA突变的影响 总被引:6,自引:1,他引:5
当前研究表明机体衰老与线粒体功能下降关系密切.其中线粒体DNA突变可能是线粒体功能下降与活性氧产生增多的关键因素之一.本研究检测到22月龄大鼠肝脏线粒体DNA出现4834bp缺失,3个月的游泳训练明显降低同龄大鼠线粒体DNA 4834bp缺失发生率.研究同时发现老年大鼠肝脏线粒体复合体I和IV活性明显低于年轻大鼠,而有氧运动可显著升高老年运动大鼠线粒体酶活性.结果表明有氧运动能够减少线粒体DNA突变发生,进而改善线粒体功能,这可能是有氧运动提高线粒体功能,延缓衰老的重要机制. 相似文献
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目的:比较耐力运动及力竭运动对大鼠血液及肝脏中铁调素(hepcidin)表达的影响,并测定分析与之相关的铁代谢指标、低氧应答因子、炎性因子、抗菌肽活性相关指标的变化趋势。方法:雌性SD大鼠30只,随机分为对照组(n=10)、耐力运动组(n=10)、力竭运动组(n=10),对照组不运动,耐力运动组和力竭运动组分别采用为期4周的中等运动强度跑台训练和力竭运动强度跑台训练对大鼠进行干预,而后分别采集血样,进行血常规指标及血清中铁转运因子、低氧应答因子、炎性因子及抗菌肽活性相关指标测定;取肝脏标本,固定、包埋、切片后,利用免疫组织化学染色分别测定不同组别动物肝脏中hepcidin、低氧诱导因子(HIF-1α)、核转录因子kappa b(NF-κB)含量。结果:与对照组相比,4周耐力性运动后大鼠血清中hepcidin水平降低(P<0.05),促红细胞生成素(EPO)浓度升高(P<0.05),白细胞介素6(IL-6)浓度下降(P<0.01)。与对照组相比,4周力竭性运动后大鼠血清及肝脏中hepcidin水平升高(P<0.01),EPO浓度降低(P<0.01),同时伴有血清及肝脏中HIF-1α表达增加(P<0.01),血清转铁蛋白(TF)、可溶性转铁蛋白受体(s TFR)水平降低(P<0.01),血清中白细胞介素1(IL-1)、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、C反应蛋白(CRP)水平显著升高(P<0.01,P<0.001,P<0.001,P<0.001);同时血清中与hepcidin抗菌肽活性相关的toll样受体4(TLR4)、NF-κB水平均显著升高(P<0.001)。结论:4周耐力性运动可下调大鼠血清中hepcidin水平;而4周力竭性运动可使大鼠血清及肝脏中hepcidin水平显著上调,提示不同运动方式对hepcidin的影响存在明显差异。 相似文献
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目的:抗菌肽中存在的“固有基序”或“保守结构域”可决定其生物学活性,该研究拟验证包含人源性抗菌肽hGlyrichin中保守结构域肽段的生物学活性。方法在前期研究基础上,分别设计合成了hGlyrichin来源且包含其保守结构域的多肽1与多肽2,分别利用菌落计数法及细菌生长曲线对其抗菌活性进行评价。结果上述包含保守结构域的多肽均具备较好抗菌活性,且在保持保守结构域完整的前提下,所合成多肽长度越短,其抗菌活性越强。除可有效抑杀细菌之外,所合成多肽对人红细胞未产生溶血作用。结论 hGlyrichin中同样存在保守结构域,含有此保守结构域的多肽具备良好杀菌活性,且对正常人体细胞无害。 相似文献
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目的:继发现人源性新抗菌肽基因并进行功能验证后,进一步发现高度同源蛋白质家系并进行功能验证.方法:利用生物信息学分析手段对该蛋白家系各成员进行系统分析,人工合成具有代表性的不同肽段,采用比浊法和菌落计数法测定人工合成肽段的抗菌活性.结果及结论:发现了富含甘氨酸并且序列高度同源的抗菌肽家系,命名为格拉利素(Glyrichin),目前含有来自不同生物的29个成员,所有成员均无相关功能研究报道;根据多序列比对结果所合成的、代表家系中9个成员的4条多肽均有不同程度的抗菌作用.上述生物信息学分析和实验研究结果强烈提示了新抗菌肽家系的存在,其中跨越哺乳动物的抗菌肽家系的存在已得到充分证实. 相似文献
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人源新基因hGlyrichin的克隆及其功能的初步研究 总被引:3,自引:3,他引:0
目的:克隆获得与mL52新基因(GenBank:AY028425)同源人类新基因hGlyrichin,并研究其功能。方法:采用PCR法从人胎肝cDNA文库中扩增出该新基因,因富含甘氨酸而命名为hGlyrichin,以RT—PCR和Northem杂交分析在多种细胞株中的表达及转录本大小,并对该基因进行生物信息学分析,利用pE他2b表达载体构建重组质粒pET22b-hGlyrichin,转化大肠杆菌BL-21(DE3)中进行IPTG诱导表达。结果与结论:电子PCR证实该基因定位于人染色体20q11.22,包含3个外显子和2个内含子。Northern杂交结果显示为单一转录本,大小约600bp,与mL52全长cDNA长度相符。所编码的蛋白为含有疏水区的小分子阳离子蛋白,相对分子质量和等电点分别为8182.83和9.58,二级结构(Garnier-Robson模型)预测是以B折叠型为主,这些特点与目前已知的大多数阳离子抗菌肽的结构及部分理化特性极为类似,该基因转化后的大肠杆菌在IPTG诱导表达时的生长受到明显抑制,初步证实了hGlyrichin具有明显的抗菌活性。 相似文献
10.
目的:研究利用氢棒制备富氢水的影响因素。方法①取7根未拆封的氢棒,置于装满蒸馏水的塑料瓶中,浸泡6 h,测量其所制备的富氢水中的含氢量,重复10次;②去除制氢能力最强和最弱的两根氢棒,将其余5根氢棒放入5瓶装满350 ml蒸馏水的塑料瓶中,分别置于20、40、60℃水浴锅中,并分别将其连续浸泡于水中2、4、6、8、10 h制备富氢水,在相应时间点测定含氢量、氧化还原电位和含氧量;③将制备好的富氢水分成两组,分别是氢棒连续制氢开盖组(不取出组)与氢棒制氢后取出开盖组(取出组),前者在打开塑料瓶瓶盖后不把氢棒取出从而连续制氢,后者则在开盖后将氢棒取出停止制氢,分别在开盖后0、10、30 min,以及1、2、5、12、24、30、48、72 h测定含氢量。结果①本研究所使用的氢棒具有良好的重复性和稳定性,可满足实验要求;②在温度保持不变的情况下,富氢水中含氢量随氢棒浸泡于水中制氢时间延长而升高、氧化还原电位随浸泡制氢时间延长而降低、含氧量随温度升高而降低;③在使用瓶口直径为25 mm的塑料瓶为容器制备富氢水时,不取出组的富氢水在含氢量下降到0.50 ppm左右开始保持恒定,而取出组在72 h时,含氢量已降低至0 ppm。结论系统研究了氢棒产氢过程中含氢量、氧化还原电位和含氧量的变化及氢从瓶中逸出的速度,证明通过氢棒制备富氢水具有良好的稳定性和可靠性,为氢棒制备的富氢水在日常生活和慢病防控中的应用提供了参考依据。 相似文献