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目的 探讨miR-148a-DNMT1 对汽油添加剂甲基叔丁基醚(MTBE)所致人支气管上皮细胞(16HBE)DNA损伤的影响。方法 运用Lipofectamine 2000脂质体将miR-148a mimics转染至16HBE细胞;qRT-PCR分析miR-148a及DNMT1 mRNA的表达;Western Blot分析DNMT1蛋白的表达改变;以终浓度为8 µmol/L的MTBE对正常16HBE,16HBE-mimics及16HBE-NC空载体组细胞分别染毒培养48 h;运用单细胞凝胶电泳(SCGE)实验分析各组细胞的DNA损伤程度。结果 转染miR-148a mimics的16HBE细胞中miR-148a表达增强(P < 0.05),DNMT1 mRNA及蛋白表达降低(均P < 0.05),MTBE对各组细胞DNA有损伤,损伤程度无明显差异(P > 0.05)。结论 尚未发现miR-148a-DNMT1的表达变化对汽油添加剂MTBE所致DNA损伤的明显影响。 相似文献
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目的构建抑制人聚ADP核糖聚合酶1(hPARP1)活性的短发夹RNA(shorthairpinRNA,shRNA)表达载体。方法化学合成2对编码短发夹RNA序列的、靶向hPARP1基因的寡核苷酸,各69对碱基,退火,然后利用BamHⅡ及EcoRⅠ与pSIRENRetroQ载体连接。用EcoRⅠ及BglⅡ切取其中U6启动子及下游的shRNA部分,与pEGFPC1载体重组构建pEGFPC1shRNA载体。结果重组构建的pEGFPC1P1、pEGFPC1P2、pEGFPC1N载体经双酶切电泳分析及插入基因片段序列分析,结果表明330个碱基成功插入到预计位点。结论载体的成功构建,为进一步研究聚ADP核糖聚合酶在DNA修复过程中的功能打下基础。 相似文献
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目的 运用载体介导的RNA干扰技术靶向抑制人X线修复交叉互补基因1(XRCC1)在支气管上皮细胞中的表达,为研究人XRCC1蛋白在环境化学污染物所致DNA损伤修复中的功能和机制作准备.方法 利用分子克隆技术构建含pU6启动子的XRCC1 RNA干扰特异性绿色荧光蛋白C1载体重组子"pEGFP-C1-U6-dsRNA";以脂质体法将载体重组子转染人支气管上皮细胞,同时以空白细胞和空载体转染细胞作对照;在经G418筛选后,以荧光显微成像技术观察细胞的转染效果,以蛋白印迹法分析转染后细胞中的XRCC1蛋白表达情况.结果 在转染重组子的细胞中,XRCC1蛋白的表达明显下调,仅相当于正常细胞的38.2%.结论 人支气管上皮细胞人X线修复交叉互补基因1的靶向抑制成功. 相似文献
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微核试验在接触有害重金属人群监测中的应用 总被引:1,自引:0,他引:1
目的探讨应用微核试验在接触有害重金属作业人群中的使用价值。方法观察组:29名观察者为镉作业人群,对照组:35名性别年龄与观察组一致的健康人群。抽取观察组与对照组的肝素抗凝静脉血进行微核试验,并通过淋巴细胞浆分裂阻断微核法(cytokine-sis block micronucleus mthods.简称CB微核法^[1]).与普通微核法的比较,确定微核试验的有效性和准确性。结果观察组中镉作业人群微核率,CB微核法为(10.46±7.92)‰,普通微核法为(3.66±3.19)‰;对照组分别为(4.29±2.66)‰、(1.19±1.10)‰。CB微核法的测定结果明显高于普通微核法(P〈0.01)。结论进一步验证了微核试验在接触有害重金属作业人群中的有效性和实用性。 相似文献
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目的监测电池厂高频感应加热机电磁辐射水平,评估干预措施的效果。方法用PMM8053B电场强度测量系统对4个电池厂高频加热机岗位进行检测。结果在无屏蔽状况下,所有岗位的电场强度均超过国家职业卫生标准(25 V/m)。屏蔽后分别在干预后3 d、干预后3个月、干预后6个月对相关岗位进行电场强度检测。干预后所有岗位的电场强度均未超过国家职业卫生标准。结论电池厂高频感应加热机作业员工的电场辐射暴露不容忽视,有效防护措施对于控制高频感应加热机的高频污染十分关键。 相似文献
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目的建立乙醇现场固定口腔脱落细胞进行微核试验的方法。方法利用无水乙醇现场固定口腔脱落细胞,保存0~30h后进行微核试验与常规口腔脱落细胞微核试验、外周血淋巴细胞微核试验进行比较。结果乙醇现场固定法的口腔脱落细胞在4、8、24h后的微核率与常规口腔脱落细胞微核率和外周淋巴细胞法微核率(Oh)差异无统计学意义(P〉0.05),而常规法口腔脱落细胞在保存4h后则出现微核率下降,与外周血培养法的微核率差异有统计学意义(P〈0.05)。结论无水乙醇现场固定口腔脱落细胞能够有效延长保存时间,微核试验结果稳定,适合用于现场采样。 相似文献