Western blot 检测蛋白表达方法的改进

Western blot为常用的检测蛋白质的方法．其操作步骤较多，在抗体反应这一步骤中．常规方珐首先用靶蛋白特异性的非标记抗体与靶蛋白的抗原决定簇相结合．然后用Ⅰ-蛋白A或与辣根过氧化物酶耦联的抗免疫球蛋白抗体检测已结合上去的抗体，此法虽好，但有如下缺点：（1)信号放大有限．在蛋白质量少的隋况下无法得到满意结果，     

靶向CXCR1基因的shRNA真核表达质粒的构建及鉴定

目的：构建靶向化学趋化因子受体1（CXCR1）的短发夹小干扰RNA（shRNA）质粒表达载体。方法：针对人CXCR1基因的mRNA序列,按RNA干扰靶位点的设计原则,设计并构建靶向CXCR1基因的3个shRNA质粒表达载体和1个阴性对照质粒表达载体,经酶切和测序确认构建成功后,转染胃癌细胞MKN45,RT-PCR和Western blot检测CXCR1 mRNA和蛋白的表达。结果：经酶切和测序证实,3个靶向CXCR1基因的shRNA真核表达质粒均构建成功;与未转染和转染阴性对照质粒的MKN45细胞比较,转染3种shRNA质粒的MKN45细胞,CXCR1 mRNA和蛋白水平均明显下调（均P<0.05）。结论：靶向CXCR1基因的shRNA真核表达质粒的成功构建,为进一步研究CXCR1在胃癌中的功能和实验性靶向治疗提供了初步的基础。

     

山区卡介苗接种效果探讨

为评价山区BCG接种效果,我们在5年时间里对接种对象进行接种后12周阳转率及卡痕检查,观察结果如下: 一、方法阳转测定系应用旧结核菌素常规方     

甲状腺癌中CD44V6和基质金属蛋白酶-2的表达

目的研究黏附分子CD44V6、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）在甲状腺癌中的表达、相互关系及其与甲状腺癌侵袭转移的相关性。方法应用S—P免疫组化染色法检测82例甲状腺乳头状癌（PTC）中CD44V6和MMP-2表达。结果82例甲状腺乳头状癌（PTC）中CD44V6和MMP-2阳性表达率为67．1％和68．3％，均高于甲袱腺腺瘤周围正常甲状腺组织，P〈0．01。CD44V6和MMP-2阳性表达与淋巴结转移呈正相关，P〈0．05，且随侵袭程度增加而升高。结论CD44V6、MMP-2在促进甲状腺癌的浸润与转移中呈协同效应。CD44V6和MMP-2表达的综合检测对甲状腺癌转移趋势和预后评估具有重要的参考价值，可能是甲状腺癌侵袭转移、预后判断的分子标志。     

T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1在甲状腺癌中的表达

目的探讨T淋巴瘤侵袭转移诱导因子l（Tlymphoma invasion and metastasis inducing factorl，Tiam 1）表达与甲状腺癌侵袭转移的关系。方法采用免疫组织化学S—P法检测Tiam 1在甲状腺癌及其淋巴结转移癌石蜡组织标本中表达。结果淋巴结转移癌组织中Tiam 1表达显著高于甲状腺癌原发灶中的表达（P〈0．05）；伴发转移的甲状腺癌组织比未发生转移的甲状腺癌组织Tiam 1表达明显增强（P〈0，05）；甲状腺髓样癌、未分化癌组织中Tiam1表达显著高于在乳头状癌、滤泡癌中的表达（P〈0．05）；高临床分期（ⅡI、IV期）甲状腺癌组织中Tiam 1表达明显高于其在低临床分期（I、Ⅱ期）中的表达（P〈0，05）。结论Tiam 1表达与甲状腺癌侵袭转移密切相关，提示Tiam 1在甲状腺癌侵袭转移中起重要作用。     

巨细胞动脉炎患者颞动脉组织中转化生长因子β1及其受体和Smad 4蛋白的表达

巨细胞动脉炎是一种最常见的炎性血管病。转化生长因子(TGF)β在巨细胞动脉炎发生发展中有重要作用。TGFβ1是一细胞外的信号分子，作用于细胞相应受体后，通过复杂的信号途径而发挥作用，其中，TGFβⅠ型受体(TβRⅠ)、Ⅱ型受体(TβRⅡ)及Smad4蛋白是TGFβ信号通路必需的^[1]。若能阐明巨细胞动脉炎TGFβ与受体结合后的下     

TGFβ对胃癌细胞浸润、转移的影响及其作用机制研究

目的:探讨TGFβ与胃癌浸润、转移之间的关系及其作用机制。方法:以胃癌细胞株SGC7901和BGC823为对象，应用transwell迁移浸润、matrigel fibronectin基质黏附、内皮细胞黏附、明胶酶谱及裸鼠成瘤等实验分别检测0 ng/mL或10 ng/mL TGFβ1处理前后胃癌细胞株生物学行为的变化。结果:经TGFβ1处理成瘤裸鼠4周后肝转移数量远高于未处理组（P<0.05）; SGC7901和BGC823细胞经TGFβ1处理后，瘤细胞浸润基质胶的能力增强; 瘤细胞的迁移、黏附能力亦明显增加。结论:TGFβ1促进胃癌浸润、转移，其机制可能与其促进瘤细胞运动、黏附以及基质金属蛋白酶分泌有关。     

湖南省医学会病理学专业委员会第六届第二次年会在衡阳市召开

湖南省医学会病理学专业委员会第六届第二次年会于1 999年 9月 1 4～ 1 8日在衡阳市召开。到会代表 1 2 7名 ,会议共收到论文 1 1 5篇。会议由主任委员钱仲主持 ,并聘请了省内外知名教授进行了学术专题讲座、论文交流和疑难病理读片等 ,会议气氛活跃 ,学术空气浓厚 ,达到了预期的目的。本次会议还进行了换届选举 ,文继舫任第七届委员会主任委员 ,杨元华、苏琦和刘保安任副主任委员 ,李景和担任秘书。并聘请钱仲任名誉主任委员。湖南省医学会病理学专业委员会第六届第二次年会在衡阳市召开@李景和…     

漳平山区肺结核病人治疗管理探讨

我国大部山区均属老、少、边、穷地区,地广人稀、居住分散、交通不便、经济落后。对于肺结核病人的治疗管理确实存在不少困难。本刊先后发表过不少有关这方面的内容,现将陆续收到的部分稿件摘要发表于下,作为经验交流。     

MEBO在肉芽创面植皮后的应用

本文介绍了５４例烧伤肉芽创面植皮后应用湿润暴露法（ＭＥＢＴ）治疗的情况，临床观察说明，湿润烧伤膏（ＭＥＢＯ）有利于移植皮片的成活与生长。组织学观察证实移植皮片增生活跃，扩展迅速。植皮前取肉芽组织送病理切片观察，发现ＭＥＢＴ治疗的烧伤创面，其肉芽组织中纤维母细胞明显少于非ＭＥＢＴ治疗者。提示ＭＥＢＯ可能有抑制纤维母细胞的作用。