肠道菌群与阿尔茨海默病

肠道菌群（gut microbiota,GM）是指共生于人体消化道中的大量微生物,GM紊乱和多种疾病有关。最近的研究发现,阿尔茨海默病（Alzheimer′s disease,AD）患者和AD模型小鼠的GM是紊乱的,GM可通过多种途径参与AD的发生和发展。某些细菌产生的神经递质或神经毒性物质可通过循环系统进入大脑,影响神经功能。其中的毒性物质包括氨气、蓝细菌产生的β-N-甲氨基-L-丙氨酸、蛤蚌毒素、α类毒素和淀粉样蛋白等。GM异常引起的海马和大脑皮质脑源性神经营养因子（BDNF）的降低和进行性认知功能丧失有关。GM失调产生的内毒素可诱发炎症反应,而炎症反应是肥胖、胰岛素抵抗和2型糖尿病重要的风险因子。AD和2型糖尿病也具有相关性和相似性。益生菌、益生元和中药可调节GM,有实验表明它们可缓解AD患者或模型小鼠的症状。然而,它们对AD的防治效果如何,以及通过GM发挥防治AD作用的机制细节尚待更多的研究。     

我国登革2型病毒43株PrM-E基因的构建及其在哺乳动物细胞中的表达

目的：构建我国登革２ 型病毒４３ 株（Ｄ２－４３）的ＰｒＭ－Ｅ基因片段,观察其在哺乳动物细胞中的表达。方法：采用ＲＴ－ＰＣＲ和分子克隆技术构建ＰｒＭ－Ｅ基因片段,包括编码ＰｒＭ 的信号肽序列、完整的ＰｒＭ 蛋白和去除羧基端跨膜疏水区部分氨基酸的９７．８％ Ｅ蛋白的基因片段。用电穿孔法将构建的含有ＰｒＭ－Ｅ基因的ｐＣＭＶ－ＭＥ真核重组质粒导入哺乳动物细胞中进行表达。采用蛋白印迹和间接免疫荧光法对表达产物进行特异性鉴定。结果与结论：构建的ＰｒＭ－Ｅ基因全长２ ０１９个核苷酸,序列分析证明其核苷酸序列是正确的。ＰｒＭ－Ｅ基因在ＢＨＫ－２１ 细胞中获得高效表达,表达蛋白可与Ｄ２－４３ 多克隆抗体起特异反应,且表达蛋白主要位于细胞浆中。     

我国登革2型病毒43株包膜E蛋白MBP-B165抗原性的研究

目的 通过对我国登革2型病毒株包膜E蛋白包括B区在内的第267－432氨基酸编码基因片段的表达,研究MBP－B165蛋白的抗原性。方法 首先采用PCR方法扩增了编码B165蛋白的基因片段,并将其插入到pMal－C2核载体进行融合表达。采用蛋白印迹和ELISA法对表达产物进行特异性鉴定。用表达的融合蛋白MBP－B165免疫大白兔,产通过ELISA法检测兔免疫血清中登革2型病毒特异的抗体。结果 表达的融合蛋白MBP－B165可与我国登革2型病毒株抗体特异结合,而且与登革1、3和4型病毒参考株的多克隆抗体均具有较高的反应性。用表达蛋白免疫大白兔可产生针对我国登革2型病毒株E蛋白的特异抗体,并且该抗体与基他3个型病毒参考株有交叉反应。结论 我国登革2型病毒43株E蛋白包括B区在内的第267－432氨基酸序列具有一定的抗原性,而且具有黄病毒亚组特异的反应性表位,即4个型登革病毒的结构保守性表位。