新型组蛋白去乙酰化酶抑制剂对缺氧损伤心肌细胞的保护作用研究

目的：利用化学发光方法和细胞筛选模型,检测新型组蛋白去乙酰化酶抑制剂（ histone deacetylase inhibitor, HDACi）JZ005的抑制组蛋白去乙酰化酶（histone deacetylases,HDACs）的活性;建立氯化钴损伤的心肌细胞缺氧模型,初步探讨JZ005对缺氧损伤细胞的保护作用。方法采用脂质体转染法将含有p21启动子元件的荧光素酶报告基因真核表达载体pCI-p21-Luc转入到人胚肾细胞293中,用G418筛选获得稳定转染荧光素酶报告基因的单克隆细胞系;采用已报道的HDACi曲古抑菌素A（ trichostatina A,TSA）为阳性对照,检测细胞筛选模型的稳定性;用HDACi化学发光检测试剂盒及上述细胞筛选模型测定JZ005抑制HDACs的活性;用不同浓度的JZ005处理氯化钴缺氧损伤的大鼠胚胎心肌细胞（H9c2）,MTT法检测JZ005对缺氧损伤细胞的保护作用。免疫印迹法检测JZ005处理后正常及缺氧损伤心肌细胞组蛋白H3的乙酰化水平变化。流式细胞术检测JZ005对H9c2细胞缺氧损伤后凋亡的影响。结果建立含p21启动子元件荧光素酶报告基因的HDACi细胞筛选模型;JZ005能够显著抑制HDACs的活性,浓度50～400μmol／L,抑制率＞50％。对缺氧损伤的心肌细胞具有明显保护作用,与对照组相比,细胞存活率提高38．33％、56．00％和35．20％,同时能够上调缺氧损伤心肌细胞组蛋白H3的乙酰化水平,拮抗缺氧损伤心肌细胞的凋亡,细胞凋亡数目从对照组的12．89％分别下降到给药组（25,50和100μmol／L）的6．63％、10．56％和8．89％。结论成功建立了HDACi的细胞筛选模型;JZ005作为一种新型的HDACi ,具有明显的保护心肌细胞拮抗缺氧损伤的作用,提示JZ005有可能开发成一种治疗缺氧损伤的药物。     

胸腔数字引流系统在胸腔镜肺叶切除术后患者中的应用

目的探讨胸腔数字引流系统在胸腔镜肺叶切除术后患者康复中的作用和效果。方法选择我院2017年5月至2018年5月胸腔镜下肺叶切除术后患者149例作为研究对象,随机分为观察组76例和对照组73例,对照组患者术后引流管通过转接管道与传统胸腔闭式引流三腔水封瓶连接,观察组则采用Thopaz数字引流系统连接。观察两组术后并发症及带管时间。结果观察组术后带管时间较对照组短(P 0. 05),且并发症发生情况也较对照组少(P 0. 05)。结论数字负压吸引装置对胸腔镜肺叶切除术后患者的快速康复具有积极的意义,其具有安全性、可行性和必要性,有利于快速康复外科的推动,减少护理工作量,提高工作效率,值得进一步推广应用。     

系统功能训练对前交叉韧带断裂重建术后快速康复的影响

目的 探讨系统功能训练对前交叉韧带断裂重建术后快速康复的影响。方法 选取2021年4月至2022年6月青岛滨海学院附属医院康复医学科及青岛市市立医院运动医学康复中心收治的32例前交叉韧带重建术的围手术期患者作为研究对象,按照随机数表法分为治疗组（n=16）与对照组（n=16）。治疗组根据快速康复外科理念采用术前及术后结合的系统康复训练方案,对照组按照常规标准进行围手术期管理。比较术前及术后第7、28天两组患者膝关节大腿周径、Lysholm评分、肌肉力量、本体感觉指标。结果 术前两组Lysholm评分比较,差异无统计学意义（P> 0.05）。术后第7、28天,治疗组大腿周径差值低于对照组,且Lysholm评分高于对照组,差异有统计学意义（P <0.05）。同时,术后第28天,治疗组的屈伸肌肌力比值高于对照组,平均轨迹误差低于对照组,差异有统计学意义（P <0.05）。结论 系统功能训练可有效预防前交叉韧带断裂重建术后患者的肌肉萎缩,对提高肌力、本体感觉、膝关节功能等具有积极作用。     

稳定表达人GM-CSF和IL-4 EA.hy926细胞株建立及对DC诱导作用

目的获得分别能稳定表达人白细胞介素4(IL-4)和人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)的内皮细胞株,并用于树突状细胞(DC)的体外诱导培养。方法构建重组的慢病毒表达载体,在293T细胞中进行慢病毒的包装,用获得的高滴度的慢病毒感染内皮细胞EA.hy926细胞株,建立能够高效、稳定表达IL-4和GM-CSF的EA.hy926细胞株。结果 EA.hy926细胞株感染效率达90%以上,长期传代仍能保持较高阳性率。RT-PCR在mRNA水平上检测目的基因有表达;ELISA和Western方法证实感染后细胞IL-4、GM-CSF在蛋白水平的表达分别是未感染细胞的80倍和143倍。感染后细胞的生长状态良好,能够长期在体外进行传代培养,可以用于DC诱导实验。结论构建的细胞系可以稳定表达细胞因子IL-4和GM-CSF。     

颈动脉超声在颈动脉斑块患者冠脉病变程度评估中的应用及对脑梗死发生风险的预测价值

目的:探讨颈动脉超声在颈动脉斑块患者冠脉病变程度评估中的应用及对脑梗死发生风险的预测价值.方法:选取 2021 年 4 月至 2023年 4 月期间我院收治的冠心病(Coronary Heart Disease,CHD)患者 106 例作为研究对象,均行颈动脉超声及冠脉造影(Coronary Angiography,CAG)检查,根据CAG检查结果将患者分为单支病变组(n=38)、双支病变组(n=36)及三支病变组(n=32).比较三组及不同冠状动脉狭窄程度 Gensini 评分、患者颈动脉硬化等级评分、颈动脉斑块个数、易损斑块、非易损斑块,对比易损斑块患者与非易损斑块患者脑梗死发生率.结果:随病变支数增加、Gensini评分分值升高,CHD患者颈动脉硬化等级评分、颈动脉斑块个数、易损斑块人数占比呈上升趋势,非易损斑块人数占比呈下降趋势(P＜0.05);易损斑块患者脑梗死发生率高于非易损斑块患者(P＜0.05).结论:颈动脉超声对颈动脉斑块患者冠脉病变程度具有一定评估价值,并对其短期脑梗死发生风险具有一定预测价值,可作为临床判断病情、评估预后的有效检查方式.     

新型组蛋白去乙酰化酶抑制剂对结肠癌细胞的增殖抑制作用

目的：观察组蛋白去乙酰化酶抑制剂（histone deacetylase inhibitor, HDACi）JZ004对结肠癌细胞系HCT-8和HT-29细胞增殖的影响,并初步探讨其抗癌机制。方法用不同浓度JZ004分别处理HCT-8和HT-29细胞, MTT法检测细胞的增殖情况;流式细胞仪检测细胞周期停滞、细胞凋亡;若丹明（rhodamine）123和二氯二氢荧光素二乙酸酯（ DCFH-DA）测定细胞线粒体跨膜电位及活性氧（ reactive oxygen species ,ROS）产生的变化;免疫印迹法检测细胞内乙酰化组蛋白H3、p21、细胞周期蛋白依赖激酶（CDK）4、Bcl-2、Mcl-1、Bax等相关蛋白的表达水平。结果MTT结果显示,JZ004对结肠癌细胞系的增殖有明显抑制作用,其抑制效果与时间、剂量呈正相关;流式分析结果显示,细胞凋亡率随JZ004浓度提高而增加;JZ004处理72 h后,p21表达水平上调,CDK4蛋白表达下调,细胞周期停滞于G0／G1期而抑制细胞的生长,细胞内ROS产生增多,且线粒体跨膜电位显著下降,促凋亡蛋白Bax的表达呈上调趋势,而抑凋亡蛋白Bcl-2、Mcl-1表达则受到抑制。结论 JZ004作为一种新型的HDACi对结肠癌细胞具有明显的抑制生长和诱导凋亡作用,凋亡诱导机制可能与Bcl-2家族蛋白表达水平变化有关。提示JZ004具有成为结肠癌临床化疗药物的潜能。     

黑青稞籽皮提取物提高小鼠耐缺氧及抗疲劳能力的初步研究

目的研究黑青稞籽皮提取物对小鼠耐缺氧及抗疲劳能力的影响。方法采用小鼠动物实验,分别研究黑青稞籽皮提取物对常压耐缺氧、亚硝酸钠中毒、急性脑缺血小鼠存活时间的影响以及通过对异丙肾上腺素增加心肌耗氧、失血性休克小鼠心搏时间的影响的观察评价其耐缺氧。利用负重游泳实验评价其抗疲劳功能。结果与生理盐水组比较,黑青稞籽皮提取物在3.5 g/kg剂量条件下显著延长常压耐缺氧小鼠的存活时间(P<0.01),在4.0 g/kg剂量条件下能够有效延长断头小鼠喘气时间(P<0.05),在2.0 g/kg剂量条件下能够延长小鼠负重游泳时间(P<0.05)。结论黑青稞籽皮提取物具有提高小鼠耐缺氧及抗疲劳能力的作用。     

黑青稞籽皮提取物对心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用

目的研究黑青稞籽皮提取物对心肌细胞缺氧／复氧（H／R）损伤的保护作用及其机制。方法取大鼠胚胎心肌细胞（H9c2）,随机分为5组：正常对照组（C组）、缺氧／复氧组（H／R组）、缺氧／复氧＋低、中、高剂量药物组（H／R＋L、M、H组）。流式细胞术检测细胞凋亡、细胞线粒体跨膜电位（Aaltm）和细胞内活性氧（ROS）产生情况;Westernblot方法检测B细胞淋巴瘤／白血病-2基因（Bcl-2）,Bcl-2相关X蛋白（Bax）,总丝氨酸苏氨酸蛋白激酶（tAkt）和磷酸化丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶（pAkt）蛋白表达变化。结果药物组[H／R＋L）组至（H／R＋H组）】细胞凋亡比例为（26．7±2．9）％至（6．1±1．1）％,较H／R组[（57．3-＋10．4）％1明显降低,差异有统计学意义（P〈0．05）;与H／R组比较,药物组△ψm升高,差异有高度统计学意义（P〈0．01）,ROS水平下降,差异有高度统计学意义（P〈0．01）,Bcl-2及pAkt表达升高,Bax及tAkt表达无明显变化。结论黑青稞籽皮提取物对心肌细胞缺氧／复氧损伤具有保护作用,可抑制心肌细胞凋亡．其可能与Bcl一2／13ax调控和激活磷脂酰肌醇一3激酶／丝氨酸苏氨酸蛋白激酶（P13K-Akt）信号通路有关。     

消化系统神经内分泌肿瘤编码错误分析

目的 分析某三甲医院消化系统神经内分泌肿瘤编码常见错误,提高编码准确率。方法 检索该医院2020年1月1日至2021年12月31日病理诊断为消化系统神经内分泌肿瘤的病案,逐一核查,统计错误编码类型,总结编码经验。结果 符合条件的病案共123份,有91份编码错误,错误率占73.98%。其中形态学编码被错误分类到/0良性肿瘤、/1动态未定或动态未知和/2原位癌中,错误分类到/1的占比最高,占错误编码的59.34%,相应的部位编码同时错误;将神经内分泌瘤错误分类到神经内分泌癌的占23.07%。结论 消化系统神经内分泌肿瘤病理诊断知识更新迅速,编码员缺乏对新知识的了解,容易出现编码错误。编码员应该与病理科及临床科室沟通互动,及时更新知识体系,熟练掌握编码规则,以提高医院编码质量。     

四种血小板制品滤除白细胞效果的实验研究

目的观察过滤对血小板的影响,遴选适于过滤的血小板制品。方法对机采血小板、手工浓缩血小板和相应的两种冰冻血小板进行过滤,观察血小板回收率、白细胞去除率和血小板聚集率等多项血小板功能指标。结果机采血小板回收率为86．81％,手工浓缩血小板回收率仅为73．08％;两种冰冻血小板制品损失量达60%～70％;过滤后机采血小板达到去白细胞标准,而手工血小板未达到去白细胞标准;过滤对液态保存血小板制品的功能无明显影响,但手工浓缩血小板功能低于机采血小板。结论冰冻保存的血小板制品不适于去白细胞过滤;手工浓缩血小板制备工艺尚需进一步改进和提高,并研制与之相适应的去白细胞滤器;机采血小板质董拔好．国产滤器可达到去白细胞标准．是当前适于滤除白细胞的血小板制品。