重组人Flt3配体在毕氏酵母中的表达及其对恶性造血细胞的体外作用

目的 用毕氏酵母（Ｐｉｃｈｉａ ｐａｓｔｏｒｉｓ）表达人可溶性Ｆｌｔ３配体（ｒｈＦＬ）,并观察ｒｈＦＬ对恶性造血细胞增殖的作用;探讨地塞米松（ＤＸＭ）对Ｆｌｔ３受体（Ｆｌｔ３Ｒ）表达及ｒｈＦＬ介导的恶性造血细胞增殖的影响。方法 人工合成ＦＬ基因片段,经基因重组技术获得重组质粒ｐＰＩＣＺα－ＦＬ,电转化毕氏酵母,筛选分泌ｒｈＦＬ的基因工程菌株,用流式细胞仪测定恶性造血细胞表面Ｆｌｔ３Ｒ的表达,用ＭＴ     

人IL－8酶联免疫测定法在白血病标本检测中的应用

采用酶标ＥＬＩＳＡ夹心法，建立了一种简便、灵敏、特异的检测标本中ＩＬ－８含量的方法，其检测下限达１３．７ｐｇ／ｍｌ。运用此法检测了２０例正常人血浆标本、３０例白血病病人血浆标本和１１例白血病病人脑脊液标本，发现白血病病人标本中ＩＬ－８含量明显高于正常人标本（Ｐ＜０．０５），为临床和科研上检测标本中ＩＬ－８含量提供了一个手段。     

Flt3配体联合其他细胞因子对受照射小鼠免疫系统的作用研究

目的：研究Flt3配体（FL）在受照射小鼠免疫系统恢复中的作用。方法：采用F－800血细胞自动计数仪行外周血细胞计数及血细胞分类计数，流式细胞仪分析外周血淋巴细胞表型。结果：照射前应用FL或照射后联合应用FL，IL－11，EPO和G－CSF等细胞因子，能有效地促进受照小鼠外周血白细胞和淋巴细胞的恢复，对CD8^ 细胞的恢复作用尤为明显，同时使CD4^ /CD8^ 细胞比值较早恢复正常，提高受照射小鼠的生存率，结论：FL不但能促进辐射损伤机体造血功能的恢复，对免疫系统的亦具有重要的作用，FL单独或与其他细胞因子联合应用，对辐射损伤动物具有明显的防护和治疗效应。     

大肠杆菌表达rhIL—8的纯化和生物学活性鉴定

高志昕应用钙盐沉淀法将ｈＩＬ一８重组质粒ＰＨＮＰ１０１转化感受态大肠杆菌ＨＢ１０１，转化菌经扩增培养，其包涵体及胞浆内均发现有重组蛋日的表达（约１０：１）。表达蛋白经初步分离，肝素柱、离子交换柱和凝胶柱进一步纯化，获得了高纯度的ｒｈＩＬ—８（＞９５％）。纯化的中ＩＬ—８在新西兰免体内白细胞动员试验中显示了较高的生物学活性硕士研究生＊导师脉采血，计数其外周血白细胞总数。对照组静脉注射等体积灭菌生理盐木，并于相同的时间点干血检查。２结果２．１重组质拉ｐＨＮＰ１０１转化ＨＢ１０１细菌：转化菌可在含１００ｍｇ／Ｌ氨苄青霉素的琼脂平板上生长并形成定落．空日质粒转化细菌则不能生长。２．２纯化ｒｈＩＬ——８的ＳＤＳ—ＰＡＧＥ：成熟ｈＩＬ——８是一低分子蛋曰，分子量约为１０ｋｕ．初步分离的ｒｈＩＬ——８经纯化后其纯度逐步提高（＞９５％），于电泳图谱上１０ｋｕ处显示单一条带（附图）。２．３纯化ｒｈＩＬ——８的ＥＬＩＳＡ检测；ｈＩＬ——８ＥＬＩＳＡ检测结果显示上述纯化后的蛋白为特异性ｒｈＩＬ——８，其含量约为２５ｍｇ／Ｌ。２．４ｒｈＩＬ——８快速募集白细胞进人外周血循环：在静注，ｒｈＩＬ——８（１０μｇ／ｋｇ）５ｍｉｎ后，兔外     

人IL—8酶联免疫测定法在白血病标本检测中的应用

采用酶标ＥＬＩＳＡ夹心法，建立了一种简便，灵敏，特异的检测标本中ＩＬ－８含量的方法，其检查下限达１３．７ｐｇ／ｍｌ。运用此法检测了２０例正常人血浆标本，３０例白血病病人血浆标本和１１例白血病病脑脊液标本，发现白血病病人标本本中ＩＬ－８含量明显高于正常人标本（Ｐ〈０．０５），为临床和科研检测标本中ＩＬ－８含量提供一个手段。     

F1t3 receptor expression on the surface of malignant hematopoietic cells and responses to F1t3 ligand stimulation

Hematopoiesis is a complex process in which cell growth and differentiation are controlled by a number of hematopoietic growth factors or cytokines, acting as either positive or negative regulators. Disruption of balanced hematopoiesis may lead to the uncontrolled clonal expansion of a cell lineage, causing the leukemic transformation. Among them, class III receptor-type tyrosine kinases (RTKs) and their ligands seem to play an important role in hematopoiesis, especially in the early stages …     

鼠静脉内单剂量注射白细胞介素8可快速动员造血祖细胞进入外周血

目的:研究重组人白细胞介素8(rhIL-8)动员小鼠外周造血干/祖细胞的生物学效应.方法:给BALB/c小鼠单剂量单次或联合注射IL-8和重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)后,分别观察小鼠外周白细胞计数、CFU-C等指标,在此基础上,给致死性辐照小鼠(接受7.5Gy~(60)Co-γ射线照射)经尾静脉回输2×10~6个上述动员的PBMNCs,无菌饲养12天后,取其外周血,观察外源性CFU-S数等指标,并取5×10~5骨髓MNCs(MMNCs)再次回输给第二组致死性辐照小鼠,观察其外周血中骨髓造血重建活性细胞(MRA)数.结果:给小鼠     

三株抗rhIL－6单克隆抗体识别表位的鉴定及IL－6的双单克隆抗体夹心RIA检测方法的建立

采用放射免疫标记抗体竞争结合法，对３株抗ｒｈＩＬ－６单克隆抗体识别的表位进行了鉴定。按识别表位的不同，将３株单克隆抗体分为两组：一组ＳＩ８，ＳＩ９识别相同或相近的表位，另一组ＳＩ７。在表位鉴定的基础上，选择识别不同表位的单克隆抗体，由此获得最佳组合，灵敏度为８０ｐｇ／ｍｌ。通过对肾脏病人血清ＩＬ－６水平检测，所得结果与以ＩＬ－６依赖株Ｂ９生物学检测结果一致，且重复性好，特异性强。     

小鼠静脉内注射白细胞介素8对动员骨髓造血干／祖细胞的作用研究

研究重组人白细胞介素８动员小鼠造血干／祖细胞的生物学效应。方法：将ｒｈＩＬ－８单独或联合重组人粒细胞集落刺激因子给ＢＡＬＢ／ｃ小鼠静脉内注射，观察ＢＡＬＢ／ｃ小鼠外周血单个核细胞的增殖能力；并将ＰＢＭＮＣ回转给经致死性照射的ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，观察其造血重建功能。     

重组人Flt3配体联合其它细胞因子对免疫细胞的体外抗辐射作用研究

目的：研究重组人Flt3配体(rhFL）及其他细胞因子在体外免疫细胞的抗辐射作用及其可能机理。方法：用流细胞仪分析照射前后外周血单个核细胞（PBMC）表型及rhFL对受PBMC有型的影响。[^3H]-TdR测定细胞的增殖能力。PBMC来源贴壁细胞经细胞因子诱导树突状细胞（DC）,并观察辐射对诱导DC的影响及rhFLDC的抗辐射效应;用PI－Annexin,V、DNALadder分析细胞凋亡。结果：PBMC在体外经15Gy照射后,CD^8 、CD^56 细胞明显减少,照射产细胞培养液中加入100ng/mlrhFL,可促进CD^56 细胞的;有应用rhFL及照射后联合应用IL－2等细胞因子,可促进受照射CD^8 、CD^56 细胞的恢复;rhFL可协调,GM－CSF、IL－4、TNFα产生DC,并使DC细胞的数量较常规方法诱导产生的数量增加6倍,而rhFL对DC分化诱导的辐射作用有明显的抗性;rhFL可抑制照射所致的细胞凋亡。结论：rhFL单独或与其他细胞因子联合应用,对人外周血免疫细胞具有明显的抗辐射效应,对这辐射损伤机体遥调节和恢复具有重要的使用价值。