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目的构建靶向HIF-1α的RNAi慢病毒载体,为进一步观察其对难治性癫痫大鼠模型脑内HIF 1α基因过度表达的干扰作用奠定基础。方法根据GenBank报道的大鼠HIF-1α基因序列,选择4个靶序列,设计并合成4对含编码短发夹RNA(shRNA)序列的寡核苷酸,双链退火后,插入经限制性内切酶Age I和EcoR I处理所得的线性化慢病毒载体pGCSIL-GFP(表达绿色荧光蛋白,GFP)的U6启动子下游,合成4种重组病毒pGCSIL-GFP-shRNA1,2,3,4,经酶切和测序鉴定构建正确后,分别与Lipofectamine 2000共转染293T细胞包装,收集富含慢病毒颗粒的细胞上清液浓缩后得到高滴度的慢病毒液,孔稀释法测定病毒滴度。采用同样方法构建阴性对照重组慢病毒。结果酶切和测序分析证实成功构建了靶向大鼠HIF-1α的慢病毒表达载体4对,滴度为(5~7)×108 TU/ml。结论本实验成功构建了针对大鼠HIF-1α基因的RNAi慢病毒载体,为实现在细胞和动物模型以慢病毒为载体的HIF-1α靶向治疗提供了良好的实验基础。 相似文献
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目的探讨影响超低位直肠/直肠肛管癌经括约肌间切除术(Intersphincteric resection, ISR)选择的临床病理因素。方法回顾性分析由同一组专业医师共同完成的超低位直肠癌(肿瘤距肛缘≤5cm 或距齿状线≤3cm)切除术患者156例。纳入指标包括:年龄、性别、肿瘤分化程度、肿瘤距肛缘距离、病理TNM分期、术前CS分期和新辅助治疗。 结果共有63例患者接受ISR,93例患者未接受此术式。单因素分析表明肿瘤病理T分期(P=0.038)、N分期(P=0.044)和术前CS分期(P<0.001)与ISR选择有关。多因素分期显示肿瘤病理T分期、N分期和CS分期是影响直肠肛管癌ISR选择的独立因素。 结论超低位直肠癌患者是否可行经括约肌间切除术与肿瘤局部浸润程度、淋巴结受累情况有关,而与肿瘤距肛缘距离、肿瘤分化程度及新辅助化疗无关。直肠指检仍是决定是否可行经括约肌间切除术的有效方法。 相似文献
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多学科协作诊治模式下结直肠癌术后新辅助化疗相关不良反应的临床研究 总被引:2,自引:1,他引:1
目的探讨多学科协作(multi-disciplinary team,MDT)诊治模式下结直肠癌术后新辅助化疗相关的不良反应。方法回顾性分析2007年11月至2008年1月期间四川大学华西医院肛肠外科专业组收治确诊为结直肠癌患者的临床资料,比较分析MDT组与非MDT组术后恢复指标以及术后1周、1个月时的化疗监测指标和不良反应。结果该期间本专业组共收治了确诊为结直肠癌的患者181例,有131例满足纳入条件,其中男95例,女36例;结肠癌20例,直肠癌111例。MDT组和非MDT组之间基线一致,2组间手术方式差异无统计学意义(P〉0.05)。在术后康复过程中,MDT组患者拔除胃管的时间和拔除血浆引流管的时间明显早于非MDT组(P〈0.01),同时MDT组经口进食的时间也早于非MDT组(P〈0.05)。术后1周时,MDT组的白细胞(WBC)和CEA水平下降均多于非MDT组(P〈0.05);且此时食欲不振、神经炎/神经反射消失以及脱发的现象在MDT组内所占比例大于非MDT组(P〈0.05)。术后1个月时,2组间WBC的差异无统计学意义(P〉0.05),而MDT组CEA值的下降大于非MDT组,差异有统计学意义(P〈0.05);此时MDT组内脱发现象的构成比仍大于非MDT组,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论本研究中MDT组在手术治疗的同时联合应用了术后快速康复流程,从而获得了更好的康复效果,但新辅助化疗有可能带来术后近期康复阶段更多的不良反应,这可能成为影响该类患者术后恢复的风险,如何合理安排术后以及出院后的康复策略,使这一风险得到规避,并同时保证近期的恶性肿瘤综合治疗效果,需要进一步的研究。 相似文献
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目的 初步探讨结直肠手术中运用生物性不可吸收补片进行腹膜重建的临床效果.方法 回顾性分析2007年2月至2007年11月,四川大学华西医院肛肠外科治疗组接收结直肠手术的患者,纳入并分析其中采用了生物性不可吸收补片行腹膜重建患者的病历资料.结果 研究共纳入了71例患者,均顺利运用补片进行腹膜重建术并完成手术.手术时间55~210min,平均114.23min;术中出血10~300mL,平均45.82mL.所有患者中有52例接受新辅助治疗,术后有68例接受辅助治疗.患者术后经肛排气时间(3.51±0.78)d、拔除血浆引流管时间(2.14±1.32)d、拔除尿管时间(3.51±1.56)d,术后住院时间(9.45±6.46)d,随访期间复查肛门指检发现直肠狭窄者6例(8.45%),有异物感者7例(9.86%),出现中远期肠梗阻者1例(1.41%).结论 使用该补片患者的术后康复情况与未使用该补片的常规手术的报道是接近的,而术后并发症则较常规手术报道的少,但使用补片是否会为患者带来更多的好处以及会带来哪些好处,需要进一步的研究来证实. 相似文献
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目的探讨在多学科协作(multi—disciplinary team,MDT)诊治模式下,新辅助化疗联合手术的综合治疗策略在老年人群中应用的安全性和临床差异性。方法回顾性研究2007年6月~12月期间就诊于四川大学华西医院肛肠外科专业组的结直肠癌患者的资料,分析比较老年组(≥60岁)和非老年组(〈60岁)之间应用综合治疗策略的临床疗效差异。结果在术前指标中,老年组患者合并心血管系统、内分泌系统以及其他系统疾病的构成比均明显高于非老年组(P〈0.05),其中老年组术前患有高血压和糖尿病患者的构成比均明显高于非老年组(P〈0.05),其余术前指标差异无统计学意义(P〉0.05)。各项术中指标的差异在2组间均无统计学意义(P〉0.05)。而在术后指标中,老年组术后并发症发生率高于非老年组(P〈0.05),老年组患者术后拔除胃管、尿管和引流管的时间和非老年组之间的差异无统计学意义(P〉0.05);同时老年组患者术后进食时间、经肛门排气/排便时间以及下床活动时间与非老年组比较,差异也无统计学意义(P〉0.05)。在化疗相关并发症方面,2组间差异也无统计学意义(P〉0.05)。结论尽管老年患者可能术前基础情况更差、治疗难度更大,但新辅助化疗联合手术的综合治疗策略并不会导致老年组患者手术治疗的延误,而且手术干预过程中的术式选择也并不会受到影响,术后近期治疗效果满意。因此在老年群体中应用该策略是具有一定临床效果和安全性的。 相似文献
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多学科协作诊治模式下新辅助化疗对直肠癌术后近期并发症影响的临床对照研究 总被引:1,自引:1,他引:0
目的探讨在多学科协作(multi—disciplinaryteam,MDT)诊治模式下,应用新辅助化疗联合手术治疗的直肠癌患者术后近期并发症发生的情况。方法研究四川大学华西医院2007年4月至2007年10月期间最终诊断明确、未进行过MDT模式下的新辅助治疗且首次发现并行外科治疗的直肠癌患者。研究观察此组患者术后1个月以内并发症发生的情况,并和非MDT诊治组进行比较。结果根据条件纳入研究的直肠癌病例数为189例。其中,肿瘤位置〈3cm者38例,3~7cm者86例,≥7cm者65例;肿瘤病理学TNM分期Ⅰ期5例,Ⅱ期122例,Ⅲ期50例,Ⅳ期12例。开腹手术181例,腹腔镜手术8例;造口手术者33例,非造口手术者156例。术后并发症总发生率为27.0%(51/189),其中,切口出血1例,腹腔内(深部)出血4例,吻合口出血5例;肺部感染1例,伤口感染7例,尿路感染3例,腹腔内(深部)感染1例,不明原因发热19例;伤口浅层裂开1例,伤口液化15例;吻合口漏3例,直肠阴道瘘2例;肠梗阻7例,尿潴留7例,应激性溃疡2例。随访时间为术后2~10个月,平均5.8个月,无死亡病例。MDT组和非MDT组之间基线一致。MDT组术后无输血史的构成比明显高于非MDT组(P〈0.05)。此外,MDT组手术时间明显比非MDT组更短(P〈0.05)。而开腹手术和腹腔镜手术的构成比、造口手术和非造口手术的构成比以及直肠癌根治性切除手术类型的构成比2组间比较差异无统计学意义(P〉0.05)。患者术后排气时间、术后排便时间、术后进食时间2组间比较差异亦无统计学意义(P〉0.05)。而MDT组患者术后下床活动时间和术后住院时间明显短于非MDT组(P〈0.05)。MDT组术后总并发症发生率明显小于非MDT组(P〈0.05)。其中,伤口感染、伤口液化以及尿潴留的发生率明显小于非MDT组(P〈0.05)。采用多因素Logistic回归分析,发现MDT组内影响术后并发症发生率的危险因素有术后进食时间和术后住院时间;而在非MDT组内,影响术后并发症发生率的危险因素仅为术后住院时间。结论进行MDT诊治的直肠癌患者,具体手术方式和是否联合应用新辅助化疗,并不会导致术后并发症发生率的增加,也没有增加术后并发症发生的风险;可以认为这样的一套综合治疗方案在术后近期内具有一定的可行性和安全性,但对于中长期临床效果的评估,还有赖于研究的进一步观察。 相似文献
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多学科协作诊治模式下新辅助/辅助化疗联合结直肠癌手术的临床效果 总被引:2,自引:2,他引:2
目的 探讨多学科协作(multi-disciplinary team, MDT)诊治模式下,结直肠癌手术围手术期不同新辅助/辅助化疗治疗策略的临床效果.方法 回顾性分析2007年1~12月期间四川大学华西医院肛肠外科专业组收治确诊为结直肠癌患者的临床资料,将患者分为非辅助化疗组(新辅助化疗 手术治疗)和辅助化疗组(新辅助化疗 手术治疗 辅助化疗),比较2组的治疗效果.结果 共收治了789例结直肠疾病患者,其中明确诊断为结直肠癌并符合纳入研究条件的患者195例,其中男109例,女86例; 年龄为25~84岁,中位年龄60.00岁,平均59.98岁; 结肠癌59例,直肠癌136例.随访时间为5~17个月,全部195例患者中失访3例,成功随访率为98.5%,随访期间无复发和死亡.2组患者基线基本一致,2组间术前内科合并症、肿瘤并发梗阻症状和术前是否输血的差异无统计学意义(P>0.05); 2组在术中是否输血和Dukes分期方面的差异有统计学意义(P<0.05),而其他手术相关指标和病理指标间差异无统计学意义(P>0.05); 在术后治疗中,2组间是否输血的差异有统计学意义(P<0.05); 术后住院期间康复指标在2组间差异无统计学意义(P>0.05); 2组间术后并发症和排便情况差异无统计学意义(P>0.05).术后1和3个月随访中发现,2组间CEA和CA19-9值差异有统计学意义(P<0.05).结论 在MDT诊治模式下,进行新辅助化疗 手术治疗 辅助化疗方案并不影响患者的康复,也不增加患者术后并发症的风险,并可能提高患者术后对排便习惯的接受程度,具有一定的安全性和临床价值,但是否能提高临床效果有待进一步研究. 相似文献
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目的 探讨难治性颞叶癫痫中低氧诱导因子-1α (HIF-1α)在不同脑区表达水平的变化及其与耐药蛋白MDR1/Pgp表达的关系.方法 以SD大鼠作为研究对象,设置点燃组和对照组.点燃组处理方法:以马桑内酯(CL)0.4ml/kg肌注,1次/72h,在给药1~5次期间判定点燃模型是否构建成功,选择符合标准的大鼠继续给药,1次/6d,共30次;最后点燃组共存留7只大鼠.对照组5只大鼠,在同时间点给予0.4ml/kg生理盐水肌注.取大鼠脑组织标本,制备后采用实时荧光定量PCR(RQ-PCR)、免疫组织化学(IIHC)和Western blotting三种方法分别检测HIF-1 α、MDR1/Pgp在脑组织中的表达情况.结果 IHC显示,HIF-1α在点燃组主要表达于大鼠海马、颞叶皮质等部位的神经元和神经胶质细胞,在对照组仅见微弱表达.Pgp的分布及表达情况与HIF-1 α一致.RO-PCR显示,点燃组HIF-1αmRNA在海马中的表达为对照组的1.741倍,在颞叶中的表达是对照组的1.395倍.Pgp mRNA在海马及颞叶的表达分别为对照组的2.297倍和1.474倍.Western blotting显示,点燃组海马HIF-1 α蛋白表达(1.284±0.166)较对照组(0.763±0.117)明显增高(p<0.05),且点燃组颞叶皮质中HIF-1α蛋白(1.350±0.105)亦较对照组(0.941±0.078)明显增高(P<0.05).Pgp的表达与HIF-1α表达呈一致变化,即点燃组海马和颞叶中Pgp的表达(0.831±0.086,0.919±0.129)较对照组(0.441±0.053,0.643±0.095)明显增高(P<0.05).另外,点燃组Pgp蛋白和mRNA在海马中的表达较颞叶高(P<0.05).结论 HIF-1α在大鼠颞叶癫痫耐药模型的海马和颞叶皮质中的表达较正常大鼠高,且与Pgp表达的空间分布一致.HIF-1 α与PgP表达的相关性提示HIF-1 α可能与难治性颢叶癫痫的耐药性相关. 相似文献
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