源于中国人转移性黑素瘤细胞株的建立及其生物学特性研究

目的:建立中国汉族女性转移性黑素瘤来源的黑素瘤细胞系,并研究其基本生物学特性。方法:从1例17岁女性恶性黑素瘤患者腋窝淋巴结分离转移细胞体外培养,建立细胞系。通过短串联重复序列（STR）基因型检测对比细胞系与其来源组织信息,并检测基因突变情况;CCK8实验检测细胞增殖,软琼脂克隆实验检测细胞锚定非依赖性恶性增殖能力;染...     

血清中亚甲基四氢叶酸还原酶活性与白癜风临床特征相关性研究

目的:明确白癜风患者血清中亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)活性与白癜风临床特征间的关系。方法:选择性别年龄相匹配的白癜风患者及健康对照各90例,采用ELISA法检测血清中MTHFR活性。结果:白癜风患者血清中MTHFR活性为(332.77±92.85)U/L,显著低于对照组的(403.66±96.56)U/L,(P0.0001)。静止期、进展期及快速进展期患者血清中MTHFR活性呈逐级降低趋势。MTHFR活性在患者性别、家族史、病程等方面无显著差异。结论:白癜风患者血清中MTHFR活性降低可能与白癜风疾病发展相关。     

抗氧化因子Nrf2对H2O2诱导的人黑素细胞氧化应激水平和抗氧化基因表达的影响

目的 干预人黑素细胞中激活转录因子NF-E2相关因子2(Nrf2)的表达,观察其对过氧化氢(H₂O₂)诱导的氧化损伤作用,以及对Nrf2下游相关抗氧化基因表达影响。方法 将siRNA或pCMV6-XL5-Nrf2瞬时转染入PIG1细胞,从而上调或者下调Nrf2的表达,检测黑素细胞内活性氧簇(ROS)和丙二醛(MDA)浓度、细胞增殖情况,以及下游抗氧化基因还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸[NAD(P)H]、醌氧化还原酶(NQO-1)、血红素氧化酶(HO-1)和谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)的表达。结果 H₂O₂预处理可促进PIG1细胞中ROS和MDA的生成。上调Nrf2的表达可在人黑素细胞中抑制H₂O₂诱导的ROS和MDA产生,促进细胞增殖及Nrf2核转位,增强NQO-1、HO-1及γ-GCS的表达,而下调Nrf2表达可观察到相反的结果。结论 在人黑素细胞中干预抗氧化因子Nrf2的表达可通过影响Nrf2相关抗氧化酶的活性来调控H₂O<...     

microRNA-196a2单核苷酸多态性对靶基因IL-2表达的影响

目的观察基因单核苷酸多态性（SNP）对成熟microRNA（miRNA）-196a2在人角质形成细胞HaCaT细胞中表达水平的影响,及对预测的靶信使RNA（mRNA）IL-2 3＇非翻译区（UTR）结合能力的影响,探讨miRNA-196a2 SNP是否与皮肤病等自身免疫性疾病关联。方法在HaCaT细胞中转染构建miR-196a2-T（野生型）和miR-196a2-C（突变型）的表达质粒,RT-PCR检测表达效果;将两种基因型的表达质粒与预测的靶mRNA IL-2 3＇UTR的报告基因质粒共转染细胞,双荧光素酶报告基因实验分别检测结合能力,并使用SPSS17.0软件统计分析。结果成功构建miR-196a2-T/C表达质粒和IL-23＇UTR报告基因质粒;miRNA-196a2野生型和突变型的表达质粒在HaCaT细胞中的表达水平无显著差异（P〉0.05）;IL-2是miR-196a2的靶基因,SNP影响miR-196a2与IL-2 3＇UTR的结合（P〈0.05）。结论 MiR-196a2可与IL-2结合调节其转录后水平,从而参与免疫反应,可能影响多种皮肤病等自身免疫性疾病的进程。     

银杏叶提取物对氧化应激损伤黑素细胞的影响

目的:观察银杏叶提取物对黑素细胞氧化应激损伤的影响。方法:用1.0mmol/L的H2O2处理人黑素细胞系PIG1细胞,采用CCK8法检测黑素细胞的活力,并于倒置显微镜下观察黑素细胞形态学的变化。结果:①银杏叶提取物各浓度组对黑素细胞氧化应激损伤具有保护作用并呈剂量依赖性增强,与模型组相比差异均具有显著性(P≤0.05)。②倒置显微镜下观察可见H2O2组黑素细胞减少,细胞树突明显收缩,部分细胞变圆,不同浓度银杏叶提取物可明显抑制细胞树突收缩,并显示一定的剂量依赖性。结论:银杏叶提取物对氧化应激损伤的黑素细胞具有保护作用。