血浆内皮素-1基因多态性与冠状动脉痉挛的相关性研究

目的:探讨国人冠状动脉(冠脉)痉挛患者血浆内皮素-1基因多态性分布频率及其与冠脉痉挛之间的关系.方法:分别对100例冠状动脉痉挛患者(冠脉痉挛组)和120例健康对照人群(健康人群组)进行血浆内皮素-1的DNA测序,比较其外显子-1+138位点(rs10478694)、内含子-4第8002位点(rs2071942)及外显子-5第5665位点(rs5370)的基因多态性分布频率.结果:冠脉痉挛组比健康人群组的外显子-1+138位点4腺嘌呤(A)/4A野生型(2.5% vs 8.0%)及4A/3A杂合型(20.8% vs 30.0%)的发生频率、内含子-4第8002位点鸟嘌呤(G)/A杂合型(33.4% vs 41.0%)及A/A突变型(3.3% vs 12.0%)的发生频率、外显子-5第5665位点G/胸腺嘧啶(T)杂合型(29.2% vs 46.0%)及T/T突变型(5.8% vs 11.0%)发生频率均降低,差异有统计学意义(P＜0.05).冠脉痉挛组比健康人群组的外显子-1+138位点3A/3A突变型(76.7% vs 62.0%)的发生频率、内含子-4第8002位点G/G野生型发生频率(63.3% vs 47.0%)、外显子-5第5665位点G/G野生型的发生频率(65.0% vs 43.0%)均升高,差异均有统计学意义(P＜0.05).冠脉痉挛组比健康人群组3A-G-G单模样本的分布频率降低(0.47 vs 0.65,OR=0.475),而4A-A-T单模样本分布频率升高(0.05 vs 0.01,OR=4.158),差异均有统计学意义(P＜0.05).结论:血浆内皮素-1外显子-1+138位点、内含子-4第8002位点及外显子-5第5665位点基因多态性可能与冠状动脉痉挛的发生密切相关.     

纳米银避孕泡沫对阴道微生态的影响

目的 研究纳米银避孕泡沫对阴道微生态的影响.方法 采用用药前后自身对比的方法,对30例使用纳米银避孕泡沫的性活跃期妇女进行阴道分泌物检测.结果 妇女使用纳米银避孕泡沫后阴道炎症反应明显改善,白细胞脂酶降低,差异有统计学意义(P＜0.05);而阴道菌群密集度稍上升,差异有统计学意义(P＜0.05);对阴道细菌的多样性和优势菌的影响差异无统计学意义(P＞0.05).结论 纳米银避孕泡沫对阴道微生态无不良影响,并且具有一定的抗菌效果.     

卵巢早衰患者来源的诱导多能干细胞的建系、鉴定及诱导分化

 目的: 建立和鉴定卵巢早衰(又称原发性卵巢功能不全,primary ovarian insufficiency,POI)患者来源的诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs),研究其向原始生殖细胞分化的潜能。方法: 将表达Oct4、Sox2、c-Myc、Klf4和Lin28基因的pEB-C5和表达SV40 T抗原的pEB-Tg质粒转染POI患者的外周血单个核细胞,将其重编程为iPSCs并检测其干细胞多能性特性。添加转化生长因子β1(transfroming growth factor-β1,TGF-β1)和骨形态发生蛋白 4(bone morphogenetic protein 4,BMP4)后,应用real-time PCR和 Western blot方法分别检测原始生殖细胞标志物的mRNA及蛋白表达水平。结果: 通过碱性磷酸酶染色、细胞免疫荧光、拟胚体及畸胎瘤形成检测,证明了POI患者外周血来源的iPSCs可成功向3胚层细胞分化并保持多能性。添加TGF-β1和BMP4后,诱导组原始生殖细胞特异性标志物干细胞生长因子受体(stem cell growth factor receptor, c-Kit)、发育多能性相关蛋白 3 (developmental pluripotency-associated 3,STELLA/DPPA3)和DEAD盒多肽 4(DEAD box polypeptide 4,VASA/DDX4)的mRNA水平明显升高(P<0.05),VASA/DDX4蛋白表达水平亦明显增加(P<0.05)。结论: POI患者外周血单个核细胞在体外可被成功诱导成无外源性基因整合的iPSCs,并且具有多能分化特性,添加TGF-β1和BMP4后可向原始生殖细胞分化。     

单静脉入路超声导引封堵动脉导管未闭探讨

目的 探讨单静脉入路超声导引封堵动脉导管未闭(PDA)的可行性.方法 自2003年5月至2010年4月共对123例PDA患者进行封堵治疗,其中采用动静脉双入路法46例,采用单静脉入路超声法77例.动静脉双入路法通过主动脉弓降部左侧位造影观察PDA的形状、最窄内径及术后分流情况,作为选择封堵器大小的依据及即时疗效评价手段...     

冠状动脉痉挛致心肌血流灌注降低：反向再分布的机制研究

目的 探讨冠状动脉痉挛患者核素心肌灌注显像反向再分布（RR）的机制.方法 选择双嘧达莫负荷201TI心肌灌注显像表现为RR且诊断为冠状动脉痉挛的患者26例（RR组）、无冠状动脉狭窄及RR者16例（对照组）,在冠状动脉造影术中重复双嘧达莫试验,测量并比较注射双嘧达莫前后RR相关、非RR相关血管和对照组相应血管的校正心肌梗死溶栓疗法（TIMI）血流帧计数（CTFC）和心肌血流灌注积分（TMPG）.统计学处理采用t检验、χ2检验及相关分析.结果 冠状动脉造影见RR相关血管僵硬,血流速度和心肌灌注明显低于非RR相关血管,且RR区域静态心肌灌注缺损与冠状动脉造影血流速度缓慢高度相关（r=0.79,t=10.18,P＜0.001） 而对照组的各支冠状动脉血流速度和心肌灌注无明显差异.RR相关血管注射双嘧达莫前后CTFC分别为（36±6）帧及（26±7）帧（t=4.15,P＜0.01） TMPG分别为（2.02±0.39）级和（2.92±0.12）级（t=2.25,P＜0.05） 非RR相关血管注射前后CTFC分别为（29±7）帧及（25±5）帧（t=2.31,P＜0.05） TMPG分别为（2.56±0.31）级和（2.96±0.06）级（t=2.17,P＜0.05） 而对照组注射双嘧达莫前后TCFC及TMPG均无明显变化（t=0.932及0.867,P均＞0.05）.结论 冠状动脉痉挛患者静息状态下RR相关血管及微血管处于轻度痉挛状态,导致血流速度及心肌灌注缓慢 而负荷状态下血管扩张,使血流速度和心肌灌注加快,因而呈现RR.     

冠状动脉痉挛致心肌血流灌注降低:反向再分布的机制研究

Objective To investigate the mechanism of reverse redistribution (RR) on dipyridamole 201Tl myocardial perfusion studies in the patients with coronary artery spasm. Methods Twenty-six patients with coronary artery spasm and presented as RR on dipyridamole 201Tl myocardial perfusion studies were enlisted as RR group, while other 16 patients with no coronary artery stenosis nor RR were enlisted as control group. Dipyridamole test was repeated during coronary angiography. Corrected thrombolysis in myocardial infarction (TIMI) frame count (CTFC) and TIMI myocardial perfusion grade (TMPG) were measured at RR related and non-RR related coronary arteries before and after dipyridamole infusion respectively.All of the data were analyzed by Student's t-test orχ2-test and correlation analysis. Results Coronary artery angiography showed slower blood flow and lower myocardial perfusion in RR related vessels when compared with non-RR related vessels in RR group, but there was no significant difference among the main coronary arteries in control group. The perfusion defects of RR area at rest were positively related to slowerblood velocity at corresponding coronary arteries ( r = 0.79, t = 10.18, P ＜ 0.001 ). In RR related vessels,CTFC were (36 ±6) frames and (26 ±7) frames (t =4.15, P ＜0.01 ), while TMPG were (2.02 ±0.39)grades and (2.92 ± 0.12) grades ( t = 2.25, P ＜ 0.05 ) before and after dipyridamole infusion, respectively.In non-RR related vessels, CTFC were (29 ±7) frames and (25 ±5) frames (t =2.31, P ＜0.05), while TMPG were (2.56 ± 0.31 ) grades and (2.96 ± 0.06) grades ( t = 2.17, P ＜ 0.05 ) before and after dipyridamole infusion, respectively. However, there were no significant changes of CTFC and TMPG before and after dipyridamole infusion in control group ( t = 0.932, 0.867, respectively, both P ＞ 0.05 ). Conclusion RR is related to the decreased blood flow and myocardial perfusion induced by coronary artery spasm at rest,which may be improved by stress test such as intravenous dipyridamole infusion.     

人卵丘颗粒细胞和壁层颗粒细胞体外培养方法比较

目的:建立有效分离、提纯及培养人卵丘颗粒细胞的方法,并与人壁层颗粒细胞的体外培养相比较。方法:收集卵胞浆内单精子显微注射取卵时的卵泡液和直接机械分离卵母细胞所得的卵丘颗粒细胞复合物,直接将卵丘颗粒细胞复合物接种于培养皿中培养。用密度梯度离心法分离卵泡液中的人壁层颗粒细胞。用免疫荧光法检测卵泡刺激素受体(follicle stimulating hormone receptor,FSHR)的表达;用CCK-8法检测细胞生长曲线;用ELISA检测这2种颗粒细胞分泌雌激素的能力。结果:直接法所得人卵丘颗粒细胞培养24 h后可贴壁,体外培养生长状态与人壁层颗粒细胞相似;免疫荧光检测显示两者均表达FSHR;CCK-8实验结果表明,两者体外培养生长曲线相似;ELISA结果显示两者分泌雌激素能力相当。结论:利用机械切割获得人卵子周围卵丘颗粒细胞复合物直接培养的方法操作简单,获得的人卵丘颗粒细胞具有与人壁层颗粒细胞相似的生长状态、生长曲线以及雌激素分泌能力,可作为人颗粒细胞亚群体外培养方法的补充。     

国产注射用比伐卢定和肝素在冠状动脉介入治疗术中对血小板功能的影响

目的:探讨国产注射用比伐卢定和肝素在经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术中对血小板功能的影响. 方法:选择36例择期行PCI的患者,术中用肝素(肝索组,n=18)或国产注射用比伐卢定(比伐卢定组,n=18)抗凝.分别在用药前、用药后10 min、用药结束、用药结束后30 min、用药结束后2 h静脉采血,检测二磷酸腺苷诱导的血小板最大聚集率和血浆P选择素水平. 结果:肝素组患者用药后血小板最大聚集率及血浆P选择索水平升高,用药后10 min与用药前比较,差异均有统计学意义(P均<0.05),其余各时间点与用药前比较,差异均无统计学意义(P均>0.05).比伐卢定组患者血小板最大聚集率及血浆P选择素水平,用药后10 min及用药结束与用药前比较均降低(P均<0.05),差异均有统计学意义;用药结束后30 min与用药前比较,差异无统计学意义(P>0.05). 结论:与常规肝素抗凝相比,国产注射用比伐卢定作为抗凝剂应用于PCI术中可以短时间内降低血小板活性、抑制血小板聚集,具有暂时性抗血小板的功能.     

冠心病患者凝血机制的变化及其临床意义

目的检测冠心病患者血浆组织因子(TF)、组织因子途径抑制物(TFPI)水平及国际标准化比值(INR)、活化部分凝血活酶时间(APTT)的变化,探讨其在冠心病诊治中的临床意义。方法冠心病患者96例(冠心病组),非冠心病患者25例(对照组),冠心病组分为急性心肌梗死组(33例)、不稳定性心绞痛组(33例)和稳定性心绞痛组(30例)。冠心病患者又按Gensini积分分为A组、B组和C组,每组32例。分析各组TF、TFPT、INR和APTT的变化。结果冠心病组患者TF、TFPI、TF/TFPI高于对照组,INR、APTT低于对照组;急性心肌梗死组患者TF、TFPI、TF/TFPI显著高于不稳定性心绞痛组及稳定性心绞痛组患者,INR、APTT明显低于不稳定性心绞痛组及稳定性心绞痛组患者。C组患者TF、TF/TFPI明显高于B组和A组,INR、APTT低于B组和A组患者;INR与TF/TFPI呈负相关(r=-0.302,P=0.003),INR与APTT呈正相关(r=0.349,P=0.01)。结论冠心病患者TF、TFPI、TF/TFPI、INR、APTT水平在一定程度上反映了病情的严重程度,其中TF/TFPI能反映冠心病患者的凝血状态,对冠心病患者的危险分层和治疗有一定的临床意义。