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目的 检测结直肠癌(colorectal cancer, CRC) 患者血清外泌体KRAS,BRAF,NRAS 和PIK3CA 相关基因位点的突变,分析其与癌组织基因突变的一致性及其可能的影响因素。方法 2019 年2 月~ 2021 年1 月中国人民解放军联勤保障部队第九二〇医院100 例结直肠癌患者作为研究对象。提取患者血清外泌体,并用蛋白免疫印迹(Westernblot,WB)法检测外泌体标志物CD63 和TSG101 的蛋白表达;聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测血清外泌体及手术切除的癌组织中KRAS,BRAF,NRAS 和PIK3CA 基因突变情况,Kappa 一致性检验分析血清外泌体突变与组织突变的一致性,Logistic 单因素回归分析影响一致性的因素。结果 癌症基因组图谱(the cancer genomeatlas,TCGA)数据显示,KRAS,BRAF,NRAS 和PIK3CA 的结直肠癌突变率分别为35% ~ 96%,5% ~ 15%,5% ~ 30%和18% ~ 36%,且KRAS 和BRAF 的突变与结直肠癌患者的低存活率有关。血清外泌体中KRAS,BRAF,NRAS 和PIK3CA 的突变率分别为94.00%,11.00%,17.00% 和35.00%;结直肠癌组织KRAS,BRAF,NRAS 和PIK3CA 的突变率分别为34.00%,5.00%,6.00% 和16.00%;血清外泌体中KRAS,BRAF,NRAS 和PIK3CA 的突变率均高于组织,差异有统计学意义(χ2=101.027 ~ 256.250,均P < 0.05)。血清外泌体与组织中KRAS 突变的一致率为40.00%(Kappa值=0.064,P>0.05),BRAF 突变的一致率为99.00%(Kappa 值=0.599,P<0.05),NRAS 突变的一致率为89.00%(Kappa 值=0.475,P<0.05),KRAS 突变的一致率为81.00%(Kappa 值=0.523,P<0.05)。ECOG 评分、转移、临床分期是影响外泌体和组织KRAS,BRAF,NRAS 和PIK3CA 的突变检测一致性的因素。结论 结直肠癌患者血清外泌体KRAS,BRAF,NRAS 和PIK3CA 的突变率高于组织,二者BRAF,NRAS 和PIK3CA 的一致性中等,为外泌体的基因检测指导临床靶向治疗提供参考。 相似文献
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