烧伤创面组织TGFβ和其Ⅰ型、Ⅱ型受体的基因表达研究

采用斑点杂交技术观察了大鼠烧伤创面细胞内源性重组转化生长因子（ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒｂｅｔａ，ＴＧＦβ）和其受体基因的转录水平。结果表明，正常皮肤组织存在较弱的上述基因表达。热损伤能诱导ＴＧＦβ和ＴＧＦβ受体基因表达，它们的表达随着创面修复的进行而逐渐增强，并在创面修复最为活跃的时相达峰值。尔后随着修复的日趋完成与减弱，表达的水平也逐渐下降，但ＴＧＦβ受体基因表达的水平先于其配基恢复到或接近正常皮肤的水平。创面细胞ＴＧＦβ与其受体基因的共表达表明受体也是创伤愈合过程中的一调节因素。两者在表达模式上的差异提示机体存在生理性的调节机制以限制内源性ＴＧＦβ在愈合后期对修复细胞的过度作用。     

在同种真皮移植物上再植培养自体表皮细胞加速皮肤再生

1例43岁烧伤总面积为65％的男性病人在切痂手术后,即在其胸、腹及四肢远端移植2:1拉网的中厚异体皮,取腹股沟部的正常皮肤做自体表皮细胞培养。所植的异体皮3周后均已成活。按通常的处理法,把左大腿已成活的异体皮全部去除,经重新清创后,再在创面上移植培养的自体表皮细胞。而对胸、腹和四肢远端已成活的异体皮,改用取皮刀去除其表皮部分,进而在其残余的异体真皮上再植培养的自体表皮细胞。10天后,在异体真皮移植     

培养表皮细胞膜片漂浮存放时基底细胞增殖受抑制

培养的表皮细胞膜片用1.2U/ml Dispa-se Ⅱ在37℃的无血清培养液中孵育1小时。整片消化下来后,用磷酸缓冲液(PBS)洗两遍,移至37℃培养液中保存0～24小时,研究经不同时间保存后DNA的合成。5-溴-2脱氧尿苷(BrdU)掺入和免疫标记法是主要方法之一。取保存在培养液中漂浮0、2、4、6、8、12或24小时的细胞膜片,移至合10μm BrdU的培养液中37℃     

Effects of antipsoriatic drugs on biosynthesis of platelet activating factor by human keratinocytes.

Human keratinocytes in primary culture stimulated by Ca~(2 ) innophore A23187(Io) could synthesize and release a material which might aggregate aspirin-treated washed rabbit platelets and was identified as platelet activating factor (PAF) by four methods. Io stimulated the production of PAF by keratinocytes in a time- and dose-dependent manner. The PAF precursors, i.e., AAGPC and Lyso-PAF, were detected in keratinocytes. Nitrogen mustard and dexamethasone could time- and dose-dependently inhibit PAF biosynthesis from Io to induce human keratinocytes in culture. The IC50 of nitrogen mustard and dexamethasone were 6.34×10~(-9) M and 1.005×10~(-8) M respectively. The results showed that the synthesis and release of PAF by normal human keratinocytes may be accounted for the development of cutaneous inflammation and the pathogenesis of some skin disorders and application of drugs that inhibit PAF synthesis may be a new and effective approach to the management of some inflammatory skin diseases such as psori     

基因重组碱性成纤维细胞生长因子促进猪深Ⅱ度烧伤创面愈合的实验研究

将基因重组的碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）作为外源性生长因子来观察比较不同浓度的ｂＦＧＦ对猪深Ⅱ度烧伤创面愈合的影响。结果表明连续用药３～５天后，创面外观及电脑图像分析显示，ｂＦＧＦ对猪深Ⅱ度烧伤创面的愈合有一剂量效应。创面活检标本经用流式细胞计数仪做细胞ＤＮＡ的周期分析表明，用ｂＦＧＦ后创面细胞的Ｇ１期比例下降，Ｓ期和Ｇ２＋Ｍ期比例增多；其变化规律与创面所用的ｂＦＧＦ浓度有关，并与电脑图像分析所得的数据相一致。提示浓度合适的ｂＦＧＦ能明显地促进创面的愈合。     

基于三代测序技术对中药灵芝和食用菌rRNA基因及其基因间序列的鉴定研究

目的：基于三代PacBio测序技术,建立中药灵芝和食用菌rRNA 18S-ITS-28S全长序列文库,从分子水平快速、准确鉴定和研究品种。方法：对收集到的8种食用菌和1种中药材真菌灵芝抽提基因组DNA,设计引物扩增18S-ITS-28S全长序列,18S-ITS-28S全长序列包括连续且完整的18S rRNA-ITS1-5.8S rRNA-ITS2和28S rRNA部分序列,其总长度>3.3 kb。将18S-ITS-28S全长序列进行建库和三代PacBio测序。结果：食用菌和药用灵芝的18S rRNA、5.8S rRNA及部分28S rRNA基因序列相似度高且序列保守,而rRNA基因间（ITS1和ITS2）的序列差异性大。结论：本研究的结果提示,分析rRNA基因间（ITSs）区域,而不是仅仅分析rRNA基因,有助于真菌类中药材的鉴定和研究。     

用一种新的细胞单因子抑制成纤维细胞增殖的体内外研究

家兔巨噬细胞所产生的一种单因子具有抑制成纤维细胞增殖的作用。此单因子的制备如下,用石蜡油注射到新西兰家兔的腹腔内,诱发非特异性的免疫反应。7天后冲洗腹腔收集炎性细胞,接种在含5％胎牛血清的McCoy 5A     

生长因子对猪深Ⅱ°烧创面愈合的协同作用

创面愈合受多肿肽类生长因子的调控。本研究用活检标本的细胞ＤＮＡ周期分析、创面愈合的图象积分和用抗角化蛋白荧光抗体技术观察上皮愈合等方法来探讨基因重组的人表皮生长因子（ＥＧＦ）和基因重组的碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）对猪深Ⅱ°烧伤面愈合的调控。实验结果表明，浓度合适的ＥＧＦ或ｂＦＧＦ能促进烧伤面的愈合我，其愈合率与应用于创面生长因的剂子量有量效关系；二种生长因子同时使用，对创面的愈合有协同促进     

hEGF转基因表皮细胞的制备及其EGF蛋白表达

目的 应用Ｇ４１８筛选转染ＥＧＦ基因后的转基因上皮细胞,并测定外源性基因在转基因细胞中的稳定表达。方法 选用构建的ｐＢＫ－Ｓｉｇｎａｌ－ＥＧＦ质粒,在脂质体ＬｉｐｏｆｅｃｔＡＭＩＮＥ的介导下,转染培养６０％～７０％连片的人表皮细胞,然后利用Ｇ４１８进行筛选出稳定表达的细胞克隆。大量培养传代后,通过ＥＬＩＳＡ试剂盒检测细胞培养上清中表皮细胞生长因子（ＥＧＦ）外源性基因稳定表达水平。结果 ①人表皮细胞