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反义PCNA与反义bcl-2脱氧寡核苷酸抑制人视网膜色素上皮生长 总被引:4,自引:1,他引:3
目的 观察反义增生细胞核抗原 (PCNA)和反义 bcl-2脱氧寡核苷酸对培养的人视网膜色素上皮细胞 (RPE)生长的作用 .方法 用 DNA合成仪合成有 1 8个核苷酸的反义PCNA和 1 5个核苷酸的反义 bcl- 2脱氧寡核苷酸片段 ,以不同浓度加入 RPE培养液 ,培养 2~ 4d,用 SABC法检测细胞PCNA和 bcl- 2的表达 ,用 MTT法及流式细胞仪测定细胞抑制率 .结果 6 .2 5~ 1 0 0μm ol· L- 1 的反义 PCNA对 RPE的抑制率为 8.3%~ 38.4% ,呈剂量依赖性 ,并抑制细胞 PCNA的表达 .反义 bcl- 2未显示抑制作用 .结论 反义 PCNA脱氧寡核苷酸可抑制近 40 %的 RPE生长 ,其临床应用值得进一步研究 相似文献
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目的观察胰高血糖素样多肽-1(GLP-1)对大鼠2型糖尿病性心肌病心肌损伤的影响。方法采用高脂高糖膳食合并链脲佐菌素(40 mg/kg)诱导的方法建立2型糖尿病大鼠模型。将糖尿病大鼠模型随机分为模型组和GLP-1组,采取皮下包埋缓释泵,分别给两组大鼠连续灌注生理盐水或GLP-1 30 pmol/(kg·min 1),7 d后,处死取心脏,利用Langendorff离体心脏灌流系统进行心脏功能检测和心肌细胞形态学观察。结果糖尿病大鼠在建模成功后第10天出现左心室功能异常。3周后,与正常相比,左室发展压(LVDP)、心率–左心室发展压乘积值(RPP)、dp/dtmax、m-dp/dtmax分别降低40.80%、51.50%、50.87%、52.81%;心肌组织炎性细胞浸润增加,血管周围及心肌细胞间纤维化增加,心肌细胞凋亡指数增加。GLP-1处理组LVDP、RPP、dp/dtmax、m-dp/dtmax分别较模型组增加25.36%、10.90%、22.62%、30.07%,心肌细胞炎症、凋亡减少,心肌组织间及血管周围纤维化降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论糖尿病可直接诱发以间质性纤维化、代偿性纤维化、炎症细胞浸润和凋亡细胞增多为特点的心肌组织损伤,形成糖尿病性心肌病。体内持续释放GLP-1可缓解糖尿病引发的心肌组织损伤,对其心肌组织有保护作用。 相似文献
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bcl-2反义寡聚脱氧核苷酸抑制HL-60细胞生长的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
在体外培养中研究了基因的反义寡聚脱氧核苷酸(antisense oligodeoxynucleo-tide,ASON)对HL-60细胞生长增殖的影响。根据bcl-2基因cDNA的序列分析,以bcl-2mRNA翻译起始区域前15个核苷酸为作用靶序列,人工合成了15聚ASON片段,同时合成15聚无关寡聚核苷酸(ODN)片段,以作序列特异性对照。把上述ASON和无关ODN片段与HL-60细胞共培养,同时设置空白对照组,作用一定时间后分别测定细胞动力学和~3H-TdR掺入率。实验发现:从3.5—30.0μmol/L的ASON对细胞生长有不同程度抑制作用,低于10μmol/L时抑制作用小,大于10.0μmol/L时抑制作用显著,浓度愈大,抑制程度愈大,而无关ODN作用组的细胞生长状态与空白对照组无显著差别,作用48小时后浓度3.5μmol/L抑制率为6%,而20.0μmol/L时上升为40%;作用96小时后3.5μmol/L的ASON抑制率是5.1%,30μmol/L的抑制率高达67%。相同浓度的ASON作用不同时间后,细胞生长率各不相同,当浓度达到14.0μmol/L时,48小时的细胞生长抑制率达22%,72和96小时的抑制率分别为25%和29.3%。HL-60细胞被ASON处理后,培养体系中死细胞数随时间延长而增加,浓度在10—30μmol/L范围内,死细胞率由2%增到50%,但在无关ODN及空白对照组中未观察到这种现象。同时发现由于bcl-2的ASON作用使HL-60细胞的 相似文献
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目的:构建逆转录病毒载体介导的人白细胞介素-2(IL-2)基因真核细胞表达载体.方法:合成带有和表达载体克隆位点相匹配酶切位点的聚合酶链式反应(PCR)引物,用PCR方法从质粒pHIG53中扩增出人的IL-2cDNA,将其定向克隆人表达载体pDOR-neo.结果:PCR扩增出的IL-2cDNA片段约475bp,酶切鉴定该片段已被克隆人pDOR-neo的多克隆位点,构建成人IL-2基因真核表达载体pDORIL-2.结论:用PCR扩增目的基因片断,有快速、获得量大、可改变酶切位点等优点;pDORIL-2的构建成功,为开展基因治疗的研究打下了基础。 相似文献
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反义bcl-2 RNA促进膀胱癌BIU-87细胞的凋亡 总被引:2,自引:0,他引:2
为探讨反义bcl2对膀胱癌BIU87细胞凋亡的作用,应用Lipofectamine将插有反义bcl2基因片段的重组逆转录病毒载体转染BIU87细胞,使细胞在体外标准培养条件下生长速率降低,用流式细胞仪检测细胞周期的变化。结果显示:G期细胞比率增高,细胞周期分析可见凋亡峰,细胞形态学观察凋亡细胞增多,DNA凝胶电泳出现梯状电泳带。结果提示:反义bcl2瞬时表达可促进BIU87细胞凋亡 相似文献
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生长因子或/和其受体的合成失控常与某些人和动物肿瘤的发生有关.例如转化生长因子(Transforming Growth Factor,TGFα)及与此有关,成熟TGFα是由50个氨基酸残基组成的单链多肽分子,它通过与细胞的表皮生长因子受体(EGFR)结合而发挥其生理作用,除少数组织(如银屑病皮肤细胞等)外,正常组织一般难以检测到TGFα,但是,许多肿瘤和肿瘤细胞株中却有TGFα的过量合成.它是肿瘤细胞以自分泌方式发展过程中 相似文献
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Cloningandsequencingofthefourthexonoftransforminggrowthfactorαgene¥HuiHongxiang(惠宏襄);JinMing(金明);HanHua(韩骅);WangChengji(王成济)(... 相似文献