人体液中喷布洛尔及其代谢物的GC/MS分析

用气相色谱一质谱联用(GC-MSD)系统分析方法检出了人尿中喷布洛尔的6个羟化代谢物,用Scp-Pak柱提取的方法检出了人血浆中的原型药物。并从分子结构上对此药物的代谢途径进行了研究。尿中提取和血中提取的回收率分别为90.83.%和85.88%,Gc-MSD的检测限为5pg。本方法适用于运动员兴奋剂的系统检查。     

含P6A寡肽血液的HPLC分离分析

目的：建立可用于寡肽血液浓度测定并可与ESI-MS对接的HPLC方法。方法：以ARPAK溶栓寡肽为模型化合物，考察其对色谱系统的稳定性，选择适宜的洗脱系统，消除寡肽与血浆蛋白的相互作用，确定柱温与寡肽峰面积及保留时间的关系，寻找血液中寡肽降解酶抑制剂，比较不同的填料对从血液中提取寡肽的影响，优化寡肽柱前衍生化的温度、时间、pH环境和试剂。结果：含ARPAK的小鼠血浆在50℃、pH8．5的条件下与丹酰氯反应70min，衍生化程度可达峰值。含ARPAK的血浆溶液丹酰氯衍生化后用HClO4处理，可以有效地使被测的丹酰氯衍生化的ARPAK从蛋白中游离。pH9．4的磷酸盐缓冲溶液可以有效地阻滞ARPAK在任意时刻的降解。采用自装的XAD-2柱，可以定量从鼠血浆中回收ARPAK。ARPAK在A相为pH2．1磷酸盐缓冲液，B相为乙腈的流动相中显示最佳的分离度。室温进样，20％A：80％B至45％A：55％B，10min；45％A：55％B至70％A：30％B，1min，丹酰氯衍生化ARPAK的保留时间为11．77min，检测限为10ng。结论：上述HPLC条件以及样品前处理方法可用于寡肽血样HPLC/ESI-MS研究。     

液相色谱-大气压化学电离质谱联用在小分子药物代谢研究中的应用

目的：建立可用于尿样检测的小分子药物代谢分析的液相色谱-大气压化学电离质谱联用(LC/APCI/MS)方法。方法：对14种小分子药物服用者的尿样经前处理后,考察尿样中原药和代谢产物;收集克罗帕米1次给药后24h的尿样,考察尿样中原药量与时间的关系;对1种小分子药物的葡萄糖醛酸结合物进样1μg,考察APCI／MS行为。结果：在本实验的LC/APCI/MS条件下,14种小分子药物服用者的尿样全部给出了原药或代谢产物的准分子离子峰,大多数峰为基峰,少数峰为强峰,极少数为弱峰,末发生漏检;克罗帕米服用者的尿样显示,24h内从尿样中可明确检出原药,其中3．0h和11．0h的尿样中原药浓度达峰值;雌酮的葡萄糖醛酸结合物在APCI/MS条件下既给出明确的3—O-葡萄糖醛酸—1β—基雌酮的准分子离子峰,又给出明确的雌酮碎片和β—葡萄糖醛酸碎片的互补离子蜂。结论：LC/APCI/MS用于小分子药物代谢和排泄研究既可分析经前处理的尿样,又可分析未经处理的尿样,灵敏度高,有广阔应用前景。     

人尿中安那度及其代谢物的分析研究

本文用ＧＣ／ＭＳ法研究安那度在人体内的代谢，检出了一个代谢产物。在下列色谱条件下对人尿中安那度母体药物及其代谢物进行了检测：ＨＰ５８９０Ａ－ＨＰ５９７０Ｂ气相色谱－质谱联用仪，ＨＰ－５２５ｍ×０．２ｍｍ石英毛细管柱，柱温：１００℃开始，以７℃／ｍｉｎ升温至２８０℃，保持５ｍｉｎ。方法回收率８１．４±２．６％（ｎ＝４），检测限２５ｐｇ。     

人尿中美沙芬及其代谢产物的气—质联用分析

A GC-MS method for the analysis of dextromethorphan and its metabolites is described. The urine sample was hydrolyzed with HCl, extracted with diethyl ether and derivatized with MSTFA (N-methyl-N-trimethylsilyltrifluoroacetamide)-MBTFA (N-methyl-bistrifluoroacetamide). Dextromethorphan and its 3 metabolites were detected in urine samples within 2～60 h after administration of the drug. Their structures and the variation of their concentration in urine were determined. The detection limit of dextromethorphan is 10 ng.     

口服依西美坦后尿中内源性甾体排放规律

依西美坦(exemestane)作为芳香酶抑制剂,因其能够抑制人体内的雄激素向雌激素转变,提高雄激素水平,而被世界反兴奋剂机构(WADA)禁用。本研究通过对一名健康男性志愿者口服单次治疗剂量依西美坦1片(25 mg/片)后,留取15天尿样,采用气相色谱/质谱联用技术,分析其中的内源性甾体激素并逐一定量,分析口服依西美坦后尿中内源性甾体激素的排放规律。结果显示,尿中睾酮等内源性雄性甾体激素浓度有一定增加,几种相关内源性雄性甾体激素比值无明显变化,而睾酮与雌酮浓度比值发生明显变化。采用气相色谱/同位素比质谱技术测定尿中雄酮和本胆烷醇酮的13C/12C比值,未显示外源性来源。结果提示口服单次治疗剂量依西美坦对尿中内源性甾体激素的排放有一定影响。     

蛋白质及多肽的液相色谱-电喷雾离子化质谱研究进展

蛋白质及多肽的液相色谱电喷雾离子化质谱研究进展徐友宣彭师奇（北京医科大学生源药物化学中德联合实验室，北京１０００８３）多肽及蛋白质药物对临床的重要性，已引起各国药物化学界的广泛重视。在多肽或蛋白质药物的结构研究中，ＭＳ研究有重要价值。例如ＦＡＢＭ...     

LC/APCI/MS在血药浓度研究中的应用

目的：建立可用于血样检测的小分子药物代谢分析的高灵敏、简捷的液相色谱/大气压解离质谱联用(LC/APCI／MS)方法。方法：海洛因、6—乙酰吗啡、乙酰可待因和螺内酯分别于大鼠血浆中39℃孵育，定时取样，用LC/APCI／MS测定原药及代谢产物的浓度，绘制代谢曲线。结果：海洛因在5min内消失，经6—乙酞吗啡最终代谢为吗啡，30min后吗啡浓度达到峰值；6—乙酰吗啡在20min内消失，代谢产物吗啡的浓度随之达到峰值；乙酞可待因在血浆中代谢缓慢，60min后仅有部分代谢，生成可待因；螺内酯也以缓慢的速度代谢，60min后代谢产物坎利酮的浓度尚远离峰值。结论：LC/APCI／MS作为高灵敏废的简捷方法用于血药浓度研究具有广阔前景。     

人体尿液中新型促红细胞生成受体激动剂的检测

In the present study, isoelectronic focusing with different pH gradients ( pH 3−5, 2−6) or migrating distances (8.5, 12 and 17 cm) and SDS-PAGE was used to separate continuous erythropoietin receptor activator (CERA), recombinant human erythropoietin (rhEPO), darbepoitin and endogenous EPO spiked in human urine with 37 ℃ overnight incubation.  Double blotting and chemiluminescent visualization were used to detect the IEF and SDS-PAGE profiles.  The bands of CERA profile were detected and well separated from the endogenous EPO and the other two EPO preparations with both SDS-PAGE and the IEF method using a gradient pH 3−5 and a migrating distance of 17 cm, and a significant particular band of CERA profile was found in the IEF result.  These preliminary results indicated that the methods were reliable and reproducible for detecting CERA, and could be used as a routine procedure for anti-doping analysis.     

小分子药物的APCI/MS研究

目的：建立可用于小分子药物分析的高灵敏大气压化学解离／质谱（APCI／MS）方法。方法：比较电喷雾离子化（ESI）／MS与APCI／MS对58种小分子药物在1μg进样量下的灵敏度，考察其中44种小分子药物在AP－CI／MS条件下的质谱行为；以其中5种小分子药物为模型化合物，观察碰撞诱导解离电压（CID电压）对APCI／MS的影响。结果：在相同的质谱条件下，APCI／MS测定小分子药物的灵敏度明显高于ESI／MS；在APCI／MS条件下，小分子药物的分子离子峰，大多数为基峰，少数为强峰，极少数为弱峰，此外，还给出了丰富的碎片峰，小分子经物的结构与CID电压对APCI／MS的分子离子峰及碎片离子丰度有明确的影响。结论：APCI／MS作为一种高灵敏分析方法在与小分子药物的体内过程相关的研究中有广泛应用前景。μμ