溃疡性结肠炎患者外周血中性粒细胞凋亡与粘附分子水平的关系及意义

目的　探讨溃疡性结肠炎 (U C)患者外周血中性粒细胞 (PMN)凋亡机制。方法　采用流式细胞术检测 32例 UC患者外周血 PMN凋亡 ,EL ISA法检测 P-选择素 (P- sel)和细胞间粘附分子 - 1(ICAM- 1)的水平。结果　活动期 UC患者 PMN凋亡率明显低于对照组和缓解期 UC患者 (P<0 .0 1)。不同病情活动期 U C患者 PMN凋亡有显著性差异 (P<0 .0 1)。活动期 UC患者外周血中 P- sel和 ICAM- 1水平均高于对照组和缓解期 U C患者(P<0 .0 1或 (P<0 .0 5 ) ,且与 PMN凋亡呈负相关 (r值分别为 - 0 .72 38和 - 0 .5 2 13,P均 <0 .0 1) ,与病情呈正相关。结论　各种免疫细胞粘附分子表达上调可能是导致 UC患者 PMN凋亡延迟的重要机制     

急性白血病患者血浆Fas和NO的检测及临床意义

目的 探讨急性白血病患者血液中可溶性Fas(sFas)和一氧化氮水平的变化。方法 采用ELISA法检测47例急性白血病患者血浆sFas的含量，比色法检测NO的含量。结果 急性白血病患者血浆sFas的水平显著高于正常对照组，而NO的含量显著低于正常人对照组。结论 提示急性白血病患者血液中sFas和NO水平的变化与白血病细胞逃避机体免疫杀伤作用有一定关系。     

CD4+ CD25+调节性T细胞在免疫性血小板减少性紫癜中的调节作用

目的检测免疫性血小板减少性紫癜(ITP)患者治疗前后CD4 CD2 5调节性T细胞(Treg)的比例以及变化规律,探讨Treg在ITP发病机制中的作用。方法收集42例ITP患者治疗前、后外周血标本,分离血单个核细胞,采用流式细胞术检测ITP患者治疗前后Treg的比例以及变化。结果ITP患者治疗前Treg比例明显低于正常对照组(P<0.01),治疗后Treg比例显著升高,明显高于治疗前,但仍低于正常对照组(P<0.01);治疗有效组ITP患者Treg比例显著高于治疗无效组(P<0.01),治疗显效组显著高于良效和进步组(P<0.01),良效和进步组与治疗无效组比较差别无显著性。(P>0.05)。结论ITP患者外周血Treg比例降低,提示Treg可能参与了ITP的发病机制。     

4种血清型登革病毒多表位重组抗原的表达及血清学初步评价

目的在原核表达系统中对登革病毒包膜蛋白(E蛋白)和非结构蛋白1(NS1)融合的B细胞抗原表位进行表达、纯化及血清学评价。方法将B细胞抗原表位用形成α螺旋的连接肽(EAAAK)2作为接头,串联合成1条全新的多表位融合重组基因rE,将其克隆到原核表达载体pET-28a(+)中,转化大肠杆菌BL21(DE3)后经IPTG诱导表达融合蛋白,用镍柱对重组蛋白纯化,并用SDS-PAGE和Western blot方法鉴定表达产物。以融合蛋白为抗原,用间接ELISA检测登革热病人血清IgM抗体。结果重组表达载体pET28a-rE构建成功,并在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达。融合蛋白主要以包涵体形式存在,用镍柱纯化获得高纯度的目的蛋白,SDS-PAGE和Western blot检测结果显示蛋白分子量大小与预期结果相符,建立的间接ELISA具有较高的准确性。结论原核表达的登革病毒多表位融合蛋白具有良好的血清学检测价值。     

小鼠BTLA慢病毒表达载体的构建及鉴定

目的 构建小鼠BTLA慢病毒表达载体,并对表达产物进行鉴定.方法 以pET-28a-mBTLA质粒为模板,通过PCR技术构建pMD18-T-mBTLA质粒,将小鼠BTLA基因全长编码序列克隆到慢病毒转移载体,通过脂质体转染293T细胞包装成小鼠BTLA慢病毒颗粒.PCR技术和基因测序对重组质粒进行鉴定.荧光显微镜观察重组慢病毒感染293T细胞形态学变化.RT-PCR和Western blot法鉴定BTLA在重组慢病毒感染293T细胞中的表达.50％组织培养感染剂量法(TCID5o法)检测重组慢病毒滴度.结果 成功构建的pMD18-T-mBTLA质粒和pSL6-mBTLA质粒,经双酶切电泳后均出现大小约为1 kb的条带与mBTLA编码序列的大小相符.基因测序并比对分析进一步证实mBTLA编码序列成功整合到质粒载体.病毒上清PCR扩增和293T细胞形态学观察证实Lenti-mBTLA慢病毒包装成功.TCID50法测定Lenti-mBTLA慢病毒滴度为1.3×108 pfu/mL.RT-PCR和Western blot法证实Lenti-mBTLA慢病毒能有效表达mBTLA mRNA和蛋白质.结论 成功构建了表达小鼠BTLA的慢病毒.     

上腹部手术患者外周血中性粒细胞凋亡及Bcl—2表达的变化

目的　观察上腹部手术患者围手术期外周血中性粒细胞 (PMN)凋亡及Bcl 2基因表达的变化。方法　选择 2 5例择期行上腹部手术患者 ,采用流式细胞术检测术前和术后不同时点外周血PMN凋亡及Bcl 2基因的表达。结果　手术患者术前PMN凋亡率明显低于对照组 ,而Bcl 2的表达明显高于对照组。术后 1、3、12、2 4hPMN凋亡呈进行性下降 ,72h时有所升高 ;Bcl 2基因的表达在术后 1、3、12、2 4h呈进行性升高 ,72h时有所降低。结论　手术应激可致手术患者外周血PMN凋亡延迟 ,可能是术后炎症反应的原因之一。Bcl 2基因表达上调是PMN凋亡延迟的分子机制之一     

开角型青光眼患者血清一氧化氮水平的检测

一氧化氮（ｎｉｔｒｉｃ ｏｘｉｄｅ，ＮＯ）是由血管内皮细胞生成并释放的舒张因子，是新近发现的调节和参与机体生理病理过程中的重要细胞因子，与许多疾病的发生、发展密切相关。我们检测２０例开角型青光眼（ａｎｇｌｅ－ｏｐｅｎ　ｇｌａｕｃｏｍａ，ＡＯＧ）患者血清 ＮＯ水平，并与闭角型青光眼和正常人对比，旨在探讨ＮＯ在ＡＯＧ病理过程中的作用，为青光眼的防治提供新的理论依据。１资料与方法１．１　对象 ２０例 ＡＯＧ患者，男 １１例，女 ９例，年龄平均 ４４． ６５岁．２９倒闭角型青光眼（ａｎｇｌｅ－ｃｌｏｓｕｒｅ　ｇ…     

脓毒症小鼠多器官髓样细胞触发受体1基因的表达及其意义

目的 探讨脓毒症时小鼠肺、肝、肾及小肠组织髓样细胞触发受体1(TREM1)表达的改变及其意义.方法 雄性昆明小鼠60只,随机分为对照组(10只)、假手术组(10只)、盲肠结扎穿孔(CLP)组(40只), CLP法制备脓毒症模型,CLP后6、12、24和48 h处死动物分别留取肺、肝、肾及空肠组织,采用半定量逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)法检测TREM1、TNF-α mRNA 的表达.结果 CLP组6、12、24和48 h肺、肝、肾组织TREM1及TNF-α mRNA 的表达升高,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01),而空肠组织差异无统计学意义(P＞0.05);而且CLP后肝、肺、肾、小肠组织TREM1 mRNA 表达与TNF-α mRNA 水平均呈显著正相关.结论 脓毒症时小鼠多器官TREM1基因的表达明显上调,可能与组织炎症反应失控及多脏器功能损害密切相关.     

肿瘤患者血浆可溶性P—选择素的检测及意义

探讨肿瘤患者血浆可溶性Ｐ－选择素（Ｐ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ）检测的意义。方法用ＥＬＩＳＡ法检测１１６例不同肿瘤患者血浆中可溶性Ｐ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ的含量。结果各组肿瘤患者血浆可溶性Ｐ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ均明显高于正常人对照组（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）。结论肿瘤患者血浆可溶性Ｐ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ含量与正常人有差异，检测可溶性Ｐ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ有可能成为肿瘤辅助诊断的一项有价值的指标。