复方肾华治疗大鼠改良慢性血清病肾炎的实验研究

目的　观察复方肾华胶囊对改良大鼠慢性血清病肾炎模型的治疗作用。方法　采取传统大鼠慢性血清病肾炎模型制作方法加上切除大鼠一侧肾脏、隔日饮饲牛血清白蛋白 (BSA)酸化水、腹腔注射大肠杆菌内毒素 (LPS)等措施 ,制作肾炎模型 ,与西药蒙诺作对照 ,观察中药肾华对肾炎大鼠尿蛋白、血生化、凝血指标、肾功能、病理、免疫荧光以及增殖细胞核抗原 (PCNA)表达的作用。结果　肾华胶囊能够显著减轻肾炎大鼠肾脏重量及肾重指数、降低肾炎大鼠尿蛋白、升高血清蛋白、降低胆固醇、甘油三酯、改善肾功能、纠正凝血功能紊乱、减轻肾脏病理改变、减轻免疫荧光变化、减弱PCNA的表达。结论　中药肾华胶囊对大鼠慢性血清病肾炎模型有较好的治疗作用     

高效液相色谱法测定人参片中人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的含量

目的:测定人参片中人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的含量。方法:采用高效液相色谱法(HPLC法)。色谱柱选用HypersilC18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-0.05%磷酸溶液(99∶400),检测波长为203nm。用外标法按峰面积计算回收率。结果:人参皂苷Rg1浓度在101.12～1011.20μg/mL(r=0.99968,n=5)范围内与峰面积呈良好线性关系,回收率为99.43%(RSD为1.07%);人参皂苷Re浓度在80.88～808.80μg/mL(r=0.99938,n=5)范围内与峰面积呈良好线性关系,其回收率为99.44%(RSD为11.23%)。结论:HPLC法操作便捷,测定结果准确,可用于人参片的含量测定和质量控制。     

高效液相色谱法测定银翘解毒合剂中绿原酸的含量

目的:建立一种银翘解毒合剂中绿原酸的高效液相色谱测定方法,用于生产及市场监控.方法:以依利特C18柱(250mm×4.6mm,5μm)为色谱柱,用乙腈-0.4%磷酸(10:90)为流动相,以外标法按峰面积计算.结果:该法平均回收率为100.14%,表明可用于测定银翘解毒合剂中绿原酸的含量.结论:该法简便快捷,结果准确,可用于银翘解毒合剂中绿原酸的含量测定和质量控制.     

利用PCR方法获得shRNA抑制内外源性基因的表达

目的探讨PCR法获得的shRNA对外源性基因和内源性基因表达的抑制效果。方法选择绿色荧光蛋白(GFP)和大鼠肾脏系膜细胞高丰度表达的纤维连接蛋白(FN)分别作为外源性和内源性基因的靶基因,设计特异性引物,利用PCR扩增获得shGFPRNA和shFNRNA。前者与pEGFP质粒共转染至293T细胞,48h后进行激光共聚焦检测细胞表达GFP阳性率;后者转染至大鼠系膜细胞(RMC)中,48h后提取总RNA逆转录成cDNA,经realtimeRTPCR检测FN的mRNA表达水平,提取细胞总蛋白进行Westernblot检测FN蛋白表达水平。结果PCR获得的shGFPRNA产物能有效抑制外源性基因GFP的表达,抑制效率可达70%±3.2%;shRNA转染组内源性基因FN的表达水平明显下降,与对照组相比有显著性差异(P<0.05)。结论PCR方法可快速简单、廉价地获得shRNA,对内源性或外源性基因进行特异性抑制。     

IgA肾病肾小管周围毛细血管的变化及临床意义

目的：探讨IgA肾病患者肾小管周围毛细血管与血管内皮细胞生长因子（VEGF）及其受体VEGF-R2（Flk-1）的表达变化及临床意义.方法：对24例不同病理改变的IgA肾病肾组织进行序列切片.采用免疫组织化学SP法检测肾小管间质中VⅢ因子、VEGF和Flk-1的表达.对各指标之间与临床病理改变之间进行相关分析.结果：IgA肾病患者肾组织中,肾小管间质中微血管密度在中度病变的病人表达最多,在重度者表达最少（P〈0.05）.VEGF主要表达于肾小管上皮细胞,Flk-1主要表达于肾间质中肾小管周围毛细血管内皮细胞.两者与肾小管周围毛细血管密度呈正相关（P〈0.05）.在中、重度组肾小管间质肾小管周围毛细血管的微血管密度与患者尿NAG酶的含量呈负相关（r=-0.57,P〈0.05）,与间质纤维化呈负相关性（r=-0.82,P〈0.01）.结论：IgA肾病肾小管周围毛细血管密度变化与肾小管间质的病变密切相关.血管内皮细胞生长因子可能是导致肾小管周围毛细血管密度变化的主要原因.     

氟激光和掺钕钇铝石榴石激光联合应用进行周边虹膜切除术

为了探讨治疗闭角型青光眼的理想术式，对１５１例２００只原发性急、慢性闭角型青光眼，部分混合型青光眼行联合激光周边虹膜切除术。先用氖激光在术眼虹膜面作分层击射，达２／３～３／４基质层厚；然后用掺钕钇铝石榴石激光（ｎｅｅｄｙｍｉｕｍ：ｙｔｔｒｉｕｍａｌｕｍｉｎｕｍｇａｒｎｅｔ，Ｎｄ：ＹＡＧ）作穿透击射。虹膜透切率为１００．０％，１次透切成功率为９５．０％，术中、术后并发症的发生率明显较单独术式低。随访时间在２年以上者为１６１只眼。随访结果表明联合激光手术的远期疗效显著，是适宜于亚洲人虹膜特点的较为理想术式，建议在门诊推广应用。     

淀粉样变肾病伴肾组织内乙肝标志物阳性1例报告

原发性淀粉样变肾病合并肾组织内乙肝标志物阳性实属罕见,二者是合并存在还是在发病机制上存在相关性尚有待探讨.本文报告淀粉样变肾病伴肾组织内乙肝标志物阳性(资料来源于解放军总医院肾科)1例.     

IgA肾病肾小球系膜区Ⅳ型胶原的表达及定量研究

目的 探讨肾小球系膜区IV型胶原的含量与IgA肾病(IgAN)肾小球硬化的关系。方法 应用标记的链亲和素一生物素(LSAB)免疫组化技术,检测了46例IgAN肾小球系膜区IV型胶原的阳性表达及分布情况,并应用HPIAS系列高清晰度彩色病理图像分析系统对IV型胶原进行了定量研究和分析。结果 IgAN的IV型胶原在肾小球系膜区的含量显著增加,并随着病理变化的加重,其阳性表达强度及面积也相应增加。结论 肾小球系膜区IV型胶原含量的增加是IgAN肾小球硬化的重要标志之一。根据其含量的多少,可间接反映病情活动、病变进展及预后,具有较高的临床实用价值。     

成人微小病变肾病综合征发生急性肾损伤的相关影响因素分析

目的探讨成人微小病变肾病综合征发生急性肾损伤( AKI)的相关影响因素。 方法回顾性分析2002年1月1日至2015年12月31日在解放军总医院病理诊断为微小病变肾病,临床表现为首发肾病综合征的成年患者。记录其横断面临床及病理指标,并将其分为AKI组及非AKI组进行比较。用单因素及多元Logistic回归分析与AKI发生相关的影响因素。并对AKI相关的各影响因素进行交互作用检验。 结果共纳入403例患者,男女比例为1∶1.13,肾活检时平均年龄为(39.5 ± 15.1)岁,其中118(29.3%)例发生了AKI。AKI组与非AKI组相比,年龄、性别、尿蛋白定量、血清白蛋白、血肌酐、血尿素氮、估算的肾小球率过滤、肾小管萎缩、肾间质病变差异均有统计学意义(P<0.05)。单因素Logistic回归分析显示高龄、男性、尿蛋白定量多、肾小管萎缩、肾间质水肿、间质纤维化及炎细胞浸润、高血压是成人微小病变肾病发生AKI的危险因素。交互作用检验表明血清白蛋白对AKI的作用受到肾间质纤维化的显著影响(P＝0.0 050),且在调整年龄分组、性别、高血压、尿蛋白定量、肾小管萎缩、肾间质水肿、肾间质炎细胞浸润混杂因素后,其交互作用仍显著(P＝0.0 263)。从多元Logistic回归分析可见,在无肾间质纤维化的人群中,血清白蛋白水平的升高是AKI的独立保护因素(调整后的OR 0.8,95%CI 0.7～ 0.9,P<0.001)。在有肾间质纤维化人群中,血清白蛋白的升高对AKI肾脏的保护作用不显著(调整后的OR 1.0,95%CI 0.9～1.0,P＝0.0 278)。 结论高龄、男性、尿蛋白定量多、肾小管萎缩、肾间质水肿、间质纤维化及炎细胞浸润、高血压是成人微小病变肾病综合征发生AKI的危险因素。血清白蛋白升高对AKI的保护作用受到肾间质纤维化的影响。     

血红蛋白在鉴别糖尿病肾病与非糖尿病肾脏疾病中的作用

目的探讨血红蛋白在鉴别糖尿病肾病(DN)与非糖尿病肾脏疾病(NDRD)中的临床意义。 方法对2004年1月至2012年4月在解放军总医院肾脏病科行肾活检、病理诊断明确且病史资料完整的66例DN、78例NDRD患者进行回顾性分析,比较两组临床指标及合并症的差异,采用多因素Logistic回归分析方法明确DN的独立危险因素;比较DN及NDRD组不同CKD分期的血红蛋白水平差异,明确其贫血性质及贫血相关的独立危险因素。 结果DN组糖尿病罹病时间、肾病罹病时间、平均动脉压、血清肌酐、尿素氮、24 h尿蛋白定量水平及合并糖尿病视网膜病变、心血管病、贫血的比例均高于NDRD组,差异具有统计学意义(P<0.05);多因素分析显示糖尿病罹病时间长(OR＝1.012,95%CI 1.005～1.019)、合并糖尿病视网膜病变(OR＝ 4.265,95%CI 1.616～11.255)、血红蛋白水平低(OR＝ 0.952,95%CI 0.929～0.976)及合并心血管病(OR＝2.875,95%CI 1.089～7.593)是DN的独立危险因素;CKD1～3期DN组及NDRD组的血红蛋白水平均存在显著性差异(P<0.05),该差异在CKD 4～5期消失;DN及NDRD组共有60例诊断为贫血,均为正细胞正色素性贫血;多因素Logistic回归分析显示白蛋白降低(OR＝0.928,95%CI 0.879～0.980)、血清肌酐升高(OR＝1.011,95%CI 1.004～1.019)、病理诊断为DN(OR＝6.213,95%CI 2.690～14.347)是贫血的独立危险因素。 结论血红蛋白与DN显著独立相关,早期对血红蛋白水平的监测可能为临床鉴别DN与NDRD提供新线索。