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目的:通过2-DG作用于人非小细胞肺癌细胞发生的一系列生物学行为改变来探讨线粒体在肿瘤发生发展中的作用.方法:CCK-8检测不同浓度2-DG作用于A549细胞后的抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡、细胞周期和线粒体膜电位变化,对2-DG处理后的肿瘤细胞进行线粒体基因组测序.结果:作用48 h后,2-DG的浓度从100μmo... 相似文献
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目的应用成簇的规律间隔的短回文重复序列及其相关蛋白9(CRISPR/Cas9)系统构建KRAS基因敲低的人胰腺癌细胞株PANC-1并观察其细胞行为学变化。方法设计合成靶向KRAS基因的小向导RNA序列片段,体外转染构建KRAS基因敲低的PANC-1细胞。采用实时定量PCR和Western blot检测KRAS基因mRNA及蛋白表达,MTT细胞增殖实验、Transwell小室及流式细胞术分别检测KRAS基因敲低的PANC-1细胞的细胞增殖活性、细胞迁移能力及细胞内活性氧水平。结果经测序验证,体外成功转染构建KRAS基因敲低的PANC-1细胞,KRAS基因mRNA及蛋白表达均降低,细胞增殖能力和细胞迁移能力减弱,细胞内活性氧水平升高(P<0.05或P<0.01)。结论采用CRISPR/Cas9系统成功构建KRAS基因敲低的PANC-1细胞,可为研究KRAS下游新功能基因在胰腺癌发生、发展中的作用提供帮助。 相似文献
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