NSE启动子在骨髓间充质干细胞成神经分化中启动FTH1基因特异性表达及体外磁共振成像

目的 探讨神经元特异性烯醇化酶(neuron-specifc enolase,NSE)启动子控制的铁蛋白重链(ferritin heavy chain 1,FTH1)报告基因在骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,MSCs)成神经分化中的特异性表达及MRI显像的可行性.方法 以慢病毒为载体将含NSE启动子的FTH1基因转入MSCs中,对其成神经诱导分化,Western blot检测分化前后细胞内FTH1的表达,在0.5 mmol/L枸橼酸铁铵(ferric ammonium citrate,FAC)的培养条件下,细胞内FTH1基因表达所引起的聚铁效应通过普鲁士蓝染色及透射电镜检测;磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI)观察细胞T2WI信号变化.结果 含NSE启动子的FTH1基因的MSCs(MSCs-NSE-FTH1)成功分化为神经元样细胞(Neurons-NSE-FTH1).Western blot检测结果显示FTH1在Neurons-NSE-FTH1细胞内明显表达,而在MSCs-NSE-FTH1细胞内表达极低.普鲁士蓝染色和透射电镜观察证实Neurons-NSE-FTH1细胞内较多铁颗粒聚集.MRI检查发现Neurons-NSE-FTH1细胞T2WI信号明显降低.结论 NSE启动子在MSCs成神经分化中能特异性启动FTH1基因表达,并引起MRI信号改变.     

高压氧吸氧持续时间与脑出血大鼠模型神经细胞损伤因子水平的关系

目的研究高压氧(HBO)吸氧持续时间与脑出血(ICH)大鼠模型神经细胞损伤因子水平的关系。方法健康清洁级成年雄性SD大鼠150只, 采用随机数字表法分为正常对照组、ICH组和4个HBO组(A组、B组、C组和D组), 每组25只。正常对照组大鼠不作处理, ICH组和HBO组大鼠以胶原酶诱导法建立ICH模型。4个HBO组于ICH造模后6 h进行HBO干预, 吸氧持续时间分别为40、60、80、100 min。每组分别于第1、3、5、7、14天各处死5只大鼠取材。观察各组大鼠不同时间点的脑组织含水量及病理学变化, 采用免疫组化法和实时荧光定量PCR法检测各组大鼠不同时间点血肿周边脑组织中B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达及其mRNA水平。结果第1天, ICH组、4个HBO组大鼠的脑组织含水量均高于正常对照组(P<0.05)。除正常对照组外, 其他各组大鼠的脑组织含水量均呈先增后减的趋势, ICH组大鼠在第3天达到最大值, 4个HBO组大鼠于第5天达到最大值。正常对照组大鼠脑组织血管结构清晰, 细胞核及核膜清晰可见, 未见明显组织肿胀、细胞坏死以及胶质...     

高血压基底节区出血的治疗体会

高血压是一种常见病、多发病,而高血压性脑出血(hypertensive intracerebral hemorrhage,HICH)是其最严重的并发症之一,其预后不良,致残率、死亡率高[1]。在HICH中,以基底节脑出血发生率最高,致残致死率也最高。目前,多数学者认为外科治疗HICH的疗效明显优于非手术治疗。我科自     

骨髓间充质干细胞成神经分化中的FTH1基因表达

目的 明确骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)成神经分化对细胞内铁蛋白重链(ferritin heavy chain 1,FTH1)基因表达的影响,探讨FTH1报告基因成像检测定向分化细胞的可行性.方法 以慢病毒为载体将FTH1基因转入MSCs中,利用全反式维甲酸和神经细胞诱导液对其诱导分化,Western blot检测分化前后细胞内FTH1的表达,MRI观察细胞T2WI信号变化,普鲁士蓝染色和透射电镜检测细胞内FTH1表达所引起的聚铁效应.结果 携带FTH1基因的MSCs(MSCs-FTH1)成功分化为神经元样细胞(Neurons-FTH1).Western blot检测显示MSCs-FTH1及Neurons-FTH1细胞中FTH1均明显表达;在500 μmol/L枸橼酸铁铵的培养条件下,两种细胞MRI检查均发现T2WI信号明显降低;普鲁士蓝染色和透射电镜证实细胞内较多铁颗粒聚集.结论 MSCs成神经分化对细胞内FTH1基因的表达无明显影响,基于FTH1的MRI报告基因成像可用于MSCs神经分化后的检测.