IRF-4结合蛋白对人涎腺腺样囊性癌细胞增殖的抑制作用

目的 探讨IRF-4结合蛋白(IRF-4 binding protein,IBP)对人涎腺腺样囊性癌细胞增殖的影响.方法 用免疫组化(S-P法)染色技术对27例人涎腺腺样囊性癌组织和20例正常涎腺组织标本进行IBP表达的检测和分析.用脂质体法转染IBP过表达及空白对照载体至人腺样囊性癌细胞株ACC2,G418筛选后建立...     

IBP促进人涎腺腺样囊性癌细胞对紫杉醇耐药

目的探讨IBP对SACC细胞抗紫杉醇凋亡能力的影响及其机制。方法将ACC2转染IBP组和空白对照组各自根据不同紫杉醇浓度分成5组,紫杉醇作用72 h后,MTT法检测在紫杉醇作用下IBP对SACC细胞增殖的影响;通过微管蛋白Tubulin免疫荧光染色,观察紫杉醇作用前后ACC2细胞微管的变化及IBP与微管的关系。结果 IBP使ACC2细胞对紫杉醇产生一定程度的耐药,在5μg/ml的紫杉醇浓度下最为明显;紫杉醇开始作用后,ACC2-C1细胞的微管点状聚集成团,而ACC2-C1/IBP细胞的微管则出现明显的紊乱、断裂,IBP能促进微管的解聚;IBP所发的绿色荧光与微管的红色荧光糅合在一起呈黄色,IBP与微管存在一定程度的共定位。结论 IBP促进SACC细胞对紫杉醇耐药。     

偏侧咀嚼对大鼠颞骨关节窝改建的影响

目的　探讨偏侧咀嚼对大鼠颞骨关节窝位置的影响。方法　通过拔除大鼠右侧下颌磨牙建立偏侧咀嚼动物模型,观察不同时间长度偏侧咀嚼对大鼠颞骨关节窝的矢状向和水平向位置的影响。结果　偏侧咀嚼1、 2、4个月的大鼠非咀嚼侧颞骨关节窝前缘与对侧相比有向前的移位,偏侧咀嚼2、4个月的大鼠非咀嚼侧颞骨关节窝前缘和对照组同侧相比有向前的移位,而咀嚼侧关节窝未发现明显变化。偏侧咀嚼2、4个月的大鼠非咀嚼侧颞骨关节窝有向内的移位。各个时间实验组大鼠咀嚼侧关节窝与对照组对比没有发现有统计学意义的改变。结论　偏侧咀嚼会造成非咀嚼侧颞骨关节窝向前,向内的改建。偏侧咀嚼可能是颞下颌关节紊乱症的病因之一。     

175例牙冠折裂的治疗与修复

外伤、牙髓治疗后未及时冠修复等因素造成牙冠折裂的情况,在口腔门诊治疗中比较常见。由于患者对折裂牙的保留要求日渐增多及治疗方法和修复技术不断提高,折裂牙的保留问越来越引起重视。我科自1994年以来对折裂牙进行修复治疗,避免了部分折裂牙的拔除,取得了较满意的效果。     

硬脂酸镁过度润滑作用对盐酸二甲双胍缓释片的影响

目的 考察硬脂酸镁过度润滑作用对盐酸二甲双胍缓释片的影响。方法 通过改变硬脂酸镁的用量、改变硬脂酸镁的混合时间、改变加料器转速,制备不同盐酸二甲双胍缓释片。通过对比总混颗粒的粉体性质、片剂的溶出。综合评价硬脂酸镁过度润滑对盐酸二甲双胍缓释片的影响。结果 增加硬脂酸镁的用量、延长总混时间、加快加料器的转速均会导致硬脂酸镁过度润滑。表现为颗粒流动性并未明显改善,但可压性显著下降,盐酸二甲双胍缓释片溶出无明显减缓。结论 盐酸二甲双胍缓释片的可压性对硬脂酸镁的润滑作用敏感,需控制硬脂酸镁的用量、混合的时间以及加料器的转述,防止过度润滑,造成可压性变差的现象产生。     

Smoothened慢病毒干扰载体的构建及其对人牙周膜干细胞增殖与分化的影响

目的 体外构建及筛选人Smoothened(SMO)基因的慢病毒干扰载体,使用此载体下调人牙周膜干细胞(human periodontal ligament stem ceils,PDLSCs)中SMO基因表达并检测其对细胞增殖与分化的影响.方法 针对人SMO 基因设计3条干扰序列,构建RNA干扰慢病毒载体,在293FT细胞中包装病毒液并转染293A细胞,通过实时荧光定量PCR检测干扰效率,得到具有最佳干扰效率的病毒后,转染PDLSCs,用Western blot检测其对PDLSCs中SMO基因的干扰效果及对细胞分化的影响,CCK-8法检测其对PDLSCs增殖的影响.结果 成功构建3个SMO慢病毒干扰载体(pGP-SMO1、pGP-SMO2、pGP-SMO3),通过转染293A细胞并进行实时荧光定量PCR检测后,得到pGP-SMO1具有最佳干扰效率,转染后SMO mRNA水平下降到对照的(28.5±2.5)％.利用此病毒能够很好地转染体外培养的PDLSCs,并使PDLSCs中SMO蛋白水平下降80％.进一步检测细胞增殖发现,与未转染组比较,SMO下调后PDLSCs增殖变慢[(1.09±0.20) vs (1.86±0.21),P＜0.01].同时也导致成骨分化标志物Runx2的蛋白表达下调.结论 利用慢病毒介导的干扰病毒载体成功干扰了PDLSCs SMO基因的表达,SMO基因的下调会导致PDLSCs增殖减慢,成骨分化能力减弱.     

purmorphamine促进人牙周膜干细胞应力成骨

目的研究purmorphamine在动态张应力促人牙周膜干细胞(human periodontal ligament stem cells,PDLSCs)向成骨细胞分化过程中的作用。方法分离培养鉴定PDLSCs,在矿化诱导环境中加入purmorphamine,采用Flexcell FX-4000T应力加载系统对细胞加力24 h,以Real-time PCR检测成骨相关指标Runx2、alkaline phosphatase(ALP)以及Hedgehog(Hh)通路的标志物GLI1、Pathed1(PTCH1)、Smoothend(SMO)。结果动态张应力作用24 h后,成骨相关指标Runx2、ALP,Hh通路的标志物GLI1、PTCH1、SMO的表达水平明显升高(P<0.05);加入purmorphamine后,成骨相关指标Runx2、ALP,Hh通路的标志物GLI1、PTCH1、SMO的表达水平较加力组均有增强,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 purmor-phamine可能通过激活Hh通路,进而增强人PDLSCs应力条件下向成骨细胞分化。     

RNAi沉默IBP基因表达对乳腺癌细胞的抑制作用

目的 构建IRF-4结合蛋白(IBP)基因RNA干扰 (RNAi) 的真核表达载体,观察其对MDA-MB-231乳腺癌细胞内IBP基因表达及细胞增殖和侵袭力的影响.方法 以IBP为靶基因,以pcDNATM6.2-GW/EmGFPmiR质粒为载体,设计构建4对重组体,并进行DNA测序鉴定.重组载体转染MDA-MB-231细胞后,选择转染效果最好的1对重组体建立稳定转染的细胞株,经RT-PCR和Western blot检测重组表达质粒对IBP mRNA和蛋白表达的抑制效果;MTT法检测对各组细胞生长的影响;细胞体外侵袭实验测定对侵袭力的影响.结果 重组体测序结果与目的序列完全一致;重组体转染MDA-MB-231细胞后IBP的mRNA和蛋白表达降低约70%;IBP表达下调后乳腺癌细胞增殖减缓(P<0.05);同时体外侵袭实验显示转染后乳腺癌发生迁移细胞数明显低于未转染组和空质粒对照组[分别为(25±7)、(67±6)、(68±5),P<0.05].结论 下调IBP能有效降低乳腺癌细胞的增殖和侵袭力.     

喇叭口状残根根管重塑对牙根-桩核联合体抗折性能的影响

目的　研究喇叭口状残根根管重塑对牙根 -桩核联合体抗折性能的影响。方法　标准尺寸的有机玻璃模拟牙根 3 2个分为正常根管组和 3组喇叭口状根管共 4组。喇叭口状根管组分别为光固化复合树脂根管重塑的喇叭口状根管组、银汞合金根管重塑的喇叭口状根管组和对照组 (即未做处理的喇叭口状根管 )。常规铸造桩核修复 ,用磷酸锌粘固粉粘固于根管内 ,软衬材料模拟牙周膜 ,置于生理盐水中浸泡待测。试件用特殊夹具固定在电子式万能实验机平台上并垂直加载 ,加载速度为 1mm/ m in,直至桩核脱出、牙根折裂 ,记录此时载荷大小 ( N)。结果　正常根管组、光固化复合树脂根管重塑的喇叭口状根管组、银汞合金根管重塑的喇叭口状根管组、对照组的抗折载荷均数分别为 2 0 2 .92 N、194.60 N、146.89N、142 .0 9N。显示正常根管组抗折载荷明显高于对照组 ;光固化复合树脂根管重塑的喇叭口状根管组抗折载荷明显高于对照组 ,差异均有显著性 ( P<0 .0 1) ,而正常根管组与光固化复合树脂根管重塑的喇叭口状根管组之间无显著性差异 ( P>0 .0 5 ) ;银汞合金根管重塑的喇叭口状根管组抗折载荷与对照组无显著性差异 ( P>0 .0 5 )。结论　利用适当的材料对喇叭口状根管进行重塑后 ,不但改变了根管的形态 ,还对根管壁进行加厚和加