前列腺酸性磷酸酶——结肠癌主动免疫治疗新靶点

目的 探讨前列腺酸性磷酸酶(PAP)作为结肠癌主动免疫治疗新靶点的可能性.方法 分别用RT-PCR方法和Western blot方法检测结肠癌细胞系中PAP mRNA和PAP蛋白的表达水平;免疫组织化学方法检测结肠癌肿瘤组织中的PAP蛋白的表达水平.利用PAP表位肽对结肠癌患者的PBMCs进行体外诱导,ELISA法检测PAP特异性IFN-γ分泌水平;51Cr释放法检测CTLs的细胞毒活性.结果 3种结肠癌细胞(colo 201,colo 205和colo 320)表达PAP mRNA和PAP蛋白,结肠癌组织中PAP呈阳性表达.从3/5个结肠癌患者的PBMCs中诱导出PAP多肽特异性CTLs,CTLs的细胞毒活性依赖于CD8 的T淋巴细胞.结论 PAP可能成为结肠癌特异性免疫治疗的新靶点.     

前列腺酸性磷酸酶在非前列腺腺癌中的表达

目的:探讨前列腺相关抗原-前列腺酸性磷酸酶(PAP)在非前列腺癌中的表达水平. 方法: 分别用RT-PCR方法和Western Blot方法检测多种腺癌细胞系中PAP mRNA和PAP蛋白的表达水平;用免疫组织化学方法检测多种腺癌肿瘤组织中的PAP蛋白的表达水平. 结果: 3种结肠癌细胞(colo 201, colo 205和colo 320)、3种胃癌细胞(MKN-7, MKN-28和 MKN-45)和7种乳腺癌细胞(OCUB-F, OCUB-M, R-27, MCF-7, CRL-1500, YMB-1-E和MDA-MB-231)表达PAP mRNA和PAP蛋白,结肠癌、胃癌和乳腺癌肿瘤组织中PAP呈阳性表达. 在检测的5种肾细胞癌细胞和肾细胞癌组织中均未发现有PAP的表达. 结论: PAP是结肠癌、胃癌和乳腺癌的新靶点.     

前列腺酸性磷酸酶体外诱导结肠癌特异性CILs的研究

目的 探讨前列腺酸性磷酸酶(PAP)是否可以诱导结肠癌患者的外周血单核细胞(PBMCs)产生特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTLs).方法 利用负载有PAP213-221(LYCESVHNF)多肽、Flu多肽(阳性对照)、EBV多肽(阳性对照)、HIV多肽(阴性对照)的CIR-A2402细胞与结肠癌患者(5例)及健康人(8例)的HLA-A24 PBMCs在体外进行CTLs诱导,ELISA法检测PAP多肽特异性IFN-γ的分泌水平,51Cr释放法测定CTLs的细胞毒活性.结果 3例结肠癌患者和1例健康人的PBMCs与负载有PAP213-221多肽的CIR-A2402细胞孵育后所分泌的IFN-γ,显著高于与负载有HW多肽的C1R-A2402细胞孵育后分泌的INF-γ水平(P＜0.05),说明本实验诱导出了PAP多肽特异性的CTLs.与对PAP-/HLA-A24 淋巴母细胞的杀伤率比较,这种CTLs对PAP /HLA-A24 的结肠癌细胞colo 320的杀伤率显著增高,而对PAP /HLA-A24-的结肠癌细胞colo 205的杀伤率无显著增加.而且这种CTLs的细胞毒活性可以被抗CD8和抗HLA class Ⅰ的抗体所封闭,说明其细胞毒活性依赖于CD8 的T淋巴细胞.结论 PAP可能成为结肠癌特异性免疫治疗的新靶点.     

前列腺酸性磷酸酶体外诱导结肠癌特异性CTLs的研究

目的探讨前列腺酸性磷酸酶（PAP）是否可以诱导结肠癌患者的外周血单核细胞（PBMCs）产生特异性细胞毒性T淋巴细胞（CTLs）。方法利用负载有PAP213-221（LYCESVHNF）多肽、Flu多肽（阳性对照）、EBV多肽（阳性对照）、HIV多肽（阴性对照）的C1R-A2402细胞与结肠癌患者（5例）及健康人（8例）的HLA-A24＋PBMCs在体外进行CTLs诱导,ELISA法检测PAP多肽特异性IFN-γ的分泌水平,51Cr释放法测定CTLs的细胞毒活性。结果3例结肠癌患者和1例健康人的PBMCs与负载有PAP213-221多肽的C1R-A2402细胞孵育后所分泌的IFN-γ,显著高于与负载有HIV多肽的C1R-A2402细胞孵育后分泌的INF-γ水平（P〈0.05）,说明本实验诱导出了PAP多肽特异性的CTLs。与对PAP-/HLA-A24＋淋巴母细胞的杀伤率比较,这种CTLs对PAP＋/HLA-A24＋的结肠癌细胞colo320的杀伤率显著增高,而对PAP＋/HLA-A24-的结肠癌细胞colo205的杀伤率无显著增加。而且这种CTLs的细胞毒活性可以被抗CD8和抗HLAclassⅠ的抗体所封闭,说明其细胞毒活性依赖于CD8＋的T淋巴细胞。结论PAP可能成为结肠癌特异性免疫治疗的新靶点。