前处理方法及冻融次数对尿液蛋白标志物质量影响的探究

目的探究不同前处理方法及冻融次数对尿液样本蛋白质量的影响。方法取样后的尿液样本经过离心与不离心处理后,分别于室温及4 ℃冷藏放置4、12、24、48、72 h,及在-80 ℃反复冻融1、3、5、10次后,经过桥式酶联免疫吸附测定方法检测丛生蛋白、肾损伤分子 1、胱抑素C及视黄醇结合蛋白4种蛋白的质量浓度变化。结果经离心处理的样本,在室温或4 ℃冷藏放置48 h后,丛生蛋白质量浓度显著降低。未经离心处理的样本,室温放置24 h后,丛生蛋白质量浓度显著降低;4 ℃冷藏条件下蛋白相对稳定,在放置72 h后显著降低。4种蛋白-80 ℃反复冻融1、3、5、10次后,质量浓度均无显著变化;未经离心处理样本,蛋白质量浓度较离心处理样本高。结论在冷冻保存前,尽量将尿液样本先放置在4 ℃环境下处理或暂存,且暂存时间不超过72 h;若室温放置,时间不超过24 h;且根据研究用途决定是否离心。样本反复冻融10次对尿液蛋白质量无明显影响,可以根据检测需求及实际条件,确定样本是否分装及分装管数等。