巨细胞病毒感染捕获ELISA分析方法的建立和应用

目的：建立CMVIgM抗体捕获ELISA法并用聚合酶链反应（PCR）技术对此方法进行了评价。评价：采用巨细胞病毒（CMV）AD－169株感染人胚肺细胞的方法制备CMV抗原，并采用冻化抗制备法及甘愿酸法制备抗原，羊抗人IgM（μ链）McAb包被酶标板，建立CMVIgM抗体捕获ELISSA法。结果：不同浓度抗μ链McAb包被，包被时间、包被液、封闭液等不同条件，以有抗原浓度、抗CMV抗体酶结合物浓度对此法的建立有不同的影响。PCR法与用最佳条件配合后的本方法CMVIgM抗体检出率无显著差异（P＞0．05）。结论：本法测定CMV－IgM抗体的敏感性和特异性较高，简便、适用，易于推广，可广泛应用于临床。     

承德市婴幼儿急性呼吸道感染病原体的检测分析

急性呼吸道感染 (ＡｃｕｔｅＲｅｓｐｌｒａｔｏｉｎＩｎｆｅｃｔｉｏｎ,ＡＲＩ)是严重危害婴幼儿健康的常见病症 ,其病原体种类较多。为了解承德市ＡＲＩ的病原学资料、提高临床诊治效果 ,我们应用ＰＣＲ技术对62例临床诊断为ＡＲＩ的婴幼儿进行了呼吸道合胞病毒 (ＲＳＶ)腺病毒 (ＡＤＶ)肺炎衣原体 (ＣＰ)沙眼衣原体 (ＣＴ)肺炎支原体(ＭＰ) 5种病原体的检测。现将结果报道如下。1　材料与方法1 1　病例选择与标本采取　实验病例选自 1996～ 1998年冬春季节就诊患儿中被临床诊断为ＡＲＩ者 ,计 62例 ,年龄范围2 1天～ 1岁 ,性别分布为男性…     

多种金属离子与单宁酸反应媒染微血管的对比研究

目的　镜下观察单宁酸与金属盐溶液中Ca2 + 、Au+ 、Ag+ 、Pb2 + 、Cu2 + 、Al3 + 、U6+ 、K+ 联用显示大脑微血管的效果。方法　用单宁酸媒染固定液灌流大鼠 ,取脑切片 ,入氯化钙、氯化金、硝酸银、硝酸铅、硫酸铜、硫酸铝钾、醋酸双氧铀、高锰酸钾和重铬酸钾等溶液中呈色。结果　单宁酸与Ca2 + 、Cu2 + 、Ag+ 、Al3 + 结合显示血管清晰 ,与Au+ 、U6+ 、Pb2 + 、K+ 联用媒染血管效果欠佳。结论　含Ca2 + 、Cu2 + 、Ag+ 、Al3 + 的金属盐类可替代氯化铁媒染微血管 ,氯化金、醋酸双氧铀、硝酸铅、重铬酸钾和高锰酸钾不宜与单宁酸联用来显示血管     

类风湿关节炎患者血清白细胞介素的检测及意义

目的探讨白细胞介素(IL)-6、IL-17、IL-23及类风湿因子(RF)、C-反应蛋白(CRP)在类风湿关节炎(RA)患者发病中的作用。方法采用流式液相多重蛋白定量技术(CBA)检测60例活动期RA患者和32例健康对照组血清中IL-6、IL-17、IL-23的水平,采用免疫比浊法检测RF及CRP水平。结果活动期RA患者血清中IL-6、IL-17、IL-23、RF、CRP的水平高于健康对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。RF与IL-17呈正相关。不同年龄组的RA患者之间,IL-17水平差异有统计学意义(P0.05)。结论 IL-6、IL-17、IL-23、RF及CRP在RA的发病过程中起着重要的作用,IL-17可能成为临床诊断的潜在候选指标之一。     

黄芩茎叶总黄酮对胶原性关节炎小鼠Th1/Th2细胞平衡的调节

目的观察黄芩茎叶总黄酮对Ⅱ型胶原诱导性关节炎小鼠脾淋巴细胞Th1、Th2及其相关细胞因子IL-10、IFN-γ的影响,初步探讨黄芩茎叶总黄酮对类风湿性关节炎的作用。方法选用C57BL/6小鼠,建立鸡Ⅱ型胶原诱导性关节炎小鼠模型,将造模成功的小鼠随机分为CIA模型组、黄芩茎叶总黄酮组、雷公藤多苷组,另设正常对照组,于初次免疫后第21天开始灌胃给药,35 d后流式细胞术检测小鼠脾淋巴细胞Th1、Th2水平及相关细胞因子IL-10、IFN-γ的表达。结果与模型组比较,药物组小鼠CD4+T淋巴细胞中Th1细胞数量明显降低(P0.05),Th2比例增加(P0.01),药物组IL-10分泌显著增多(P0.05),IFN-γ分泌明显减少(P0.05),2用药组无明显差异(P0.05)。结论黄芩茎叶总黄酮可以调节Th1/Th2的平衡及其相关细胞因子IFN-γ、IL-10的表达。     

生脉饮与黄芩茎叶总黄酮对CVB3感染细胞的保护作用

建立Hela细胞柯萨奇病毒B组3型（CVB3）感染模型，以质量浓度为0、97．5、195g／ml的黄芩茎叶总黄酮（SSTF）及0、2．5、5mg／ml的生脉饮采用析因设计，MTT法测定细胞吸光度值。结果两种药物均能减少细胞损伤，且两药联用作用增强，以SSTF97．5g／ml、生脉饮2．5mg／ml为最佳组合。提示SSTF与生脉饮均对病毒感染细胞有保护作用，且两者具有协同作用。     

Th1型细胞因子在胶原蛋白诱导性关节炎小鼠血清中的动态变化

目的研究鸡Ⅱ型胶原蛋白诱导性关节炎(CIA)小鼠血清Th1型细胞因子IFN-γ、IL-2、TNF-α的动态变化。方法 72只DBA1/J小鼠随机分为正常对照组(每组6只)和模型组(每组12只),分别在加强免疫后第7、14、21、35天,无菌摘眼球取血清,应用流式细胞术检测各组小鼠血清中细胞因子IFN-γ、IL-2、TNF-α在关节炎不同时期的动态变化情况。结果模型组IFN-γ在加强免疫后第7天和第14天显著升高(P0.05),加强免疫后第21天、第35天开始下降,与正常组比较无区别(P0.05);模型组IL-2和TNF-α在加强免疫后第7天上升明显,与正常组比较有统计学意义(P0.05),加强免疫后第14、21、35天IL-2和TNF-α逐渐下降,与正常组比较无统计学意义(P0.05)。结论 CD4+Th1型细胞因子参与CIA发病全过程,而且在不同的发病阶段其相关细胞因子的变化与关节炎的炎症进展有一定关系。     

穿山龙总皂苷对小鼠的急性毒性实验

目的:观察穿山龙总皂苷对小鼠的急性毒性作用。方法:采用灌胃和皮下注射的方法,一次性给药后连续观察7天,检测药物对小鼠的急性毒性作用。结果:未测得小鼠灌胃给予穿山龙总皂苷的半数致死量(Median lethal dose,LD50),灌胃给药小鼠的最大耐受剂量(Maximumto lerated dose,MTD)为0.42g/kg/d,最大耐受量倍数为1355倍。小鼠皮下注射穿山龙总皂苷的LD50为0.17g/kg。结论:穿山龙总皂苷口服给药较为安全。     

柯萨奇病毒性心肌炎免疫机制研究进展

柯萨奇病毒(Coxsackievirus,CVB)是人类病毒性心肌炎(Viryl myocaditis,VMC)的主要病原体,约占50%左右,尤以CVB3最常见[1].虽然国内外对VMC进行了大量的研究,但该病的发病机制至今还不十分清楚,大多数学者认为VMC的发病与病毒直接侵犯心脏、机体的免疫反应损伤和生化机制有关,现就该病主要免疫发病机制近几年的研究进展综述如下.     

穿山龙水溶性总皂苷对类风湿患者成纤维样滑膜细胞核因子κB p65的抑制作用

【目的】观察穿山龙水溶性总皂苷对体外培养类风湿关节炎患者成纤维样滑膜细胞核因子κB(NF-κB)p65及其抑制因子IκB-α蛋白水平和mRNA含量的影响。【方法】培养类风湿患者成纤维样滑膜细胞,分为穿山龙水溶性总皂苷低、中、高剂量组(中药低、中、高剂量组,10、20、30 mg/L),模型组,同时设立空白对照组;经药物干预后,采用Western blot法测定NF-κB和IκB-α蛋白水平,采用半定量逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测成纤维细胞中NF-κB和IκB-αmRNA的表达。【结果】经穿山龙干预后的关节炎患者成纤维样滑膜细胞的NF-κB活化受到显著抑制,蛋白及基因表达水平较模型组显著下降(P0.05),IκB-α蛋白及基因表达显著提升(P0.05)。【结论】穿山龙水溶性总皂苷可以抑制类风湿关节炎患者成纤维样滑膜细胞的核转录因子的表达,这可能是穿山龙治疗类风湿关节炎的机理之一。