基于沙堡蠕虫和贻贝黏蛋白的融合基因构建及其在昆虫细胞中的表达

目的 构建基于贻贝足蛋白（Mfp）和沙堡蠕虫分泌蛋白（Pcs）的融合基因,并实现其在昆虫细胞中的表达,为新型黏附材料研制奠定基础。方法 理性设计基于Mfp和Pcs的融合分子,通过PCR扩增得到目的基因,再通过pFastBacHBM载体所介导的平末端克隆以及DH10Bac所介导的转座合成带有目的基因的重组杆状病毒质粒（Bacmid DNA）,利用昆虫表达系统生成携带目的基因的杆状病毒,并通过病毒感染细胞实现融合蛋白Pc1-Mfp5的可溶性表达。结果 测序结果显示,重组载体构建成功。病毒滴度测试显示,收获高滴度的杆状病毒。SDS-PAGE以及Western印迹分析表明,Pc1-Mfp5融合蛋白在昆虫细胞中实现了可溶性表达。结论 成功构建pc1-mfp5融合基因,并实现了其在昆虫系统中的可溶性表达,为新型仿生黏附材料的研制奠定了基础。     

贻贝黏附蛋白研究进展

仿生黏附材料具有高强度黏附性、柔韧性、耐水性以及良好的生物可降解性等优点,因此广泛应用于医药和工业制造等领域.海洋生物贻贝的足蛋白(Mfp)是其中最具代表性的天然高强度黏附物质之一,基于它研制的仿生黏合剂已在牙科、骨科和皮肤科等临床治疗中得到广泛应用.该综述对Mfp的种类、形态特性、黏附机制和基因工程制造等方面的研究进行了梳理和阐述,并对其今后的研发和应用趋势进行了展望.