RNA干扰HIF-1α对低氧状态下食管鳞癌Eca109细胞放射敏感性的影响

目的:观察低氧状态下食管鳞癌Eca109细胞中低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)及表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)的表达,探讨HIF-1α对Eca109细胞放射敏感性的影响及其可能的分子机制。方法:以常氧组为对照。氯化钴(cobalt chloride,CoCl_2)模拟肿瘤低氧微环境,用RT-PCR检测体外低氧状态下Eca109细胞中HIF-1α和EGFR mRNA表达水平,免疫细胞化学法检测HIF-1α和EGFR蛋白表达水平。Western blot检测RNAi沉默HIF-1α对EGFR蛋白表达的影响、采用流式细胞术检测HIF-1α沉默后,Eca109细胞经放射线照射后的凋亡情况,评价其放射敏感性的变化。结果:与常氧组比较,低氧状态下,Eca109细胞中HIF-1αmRNA表达无明显变化(P0.05),HIF-1α蛋白表达增加。EGFR mRNA表达明显升高(P0.05),EGFR蛋白表达也相应增加。与未转染组和对照组比较,siRNA转染Eca109细胞可有效沉默HIF-1α蛋白在低氧状态下的表达(P0.05),EGFR蛋白的表达水平也明显下调(P0.05)。Eca109细胞在低氧状态下放射敏感性较常氧下明显降低(P0.05)。RNAi沉默HIF-1α可部分逆转低氧造成的Eca109细胞的放射耐受。结论:低氧可上调食管鳞癌Eca109细胞HIF-1α蛋白水平;HIF-1α增加Eca109细胞在低氧状态下的放射抗性,可能与HIF-1α上调EGFR mRNA及蛋白表达有关,有效抑制HIF-1α可增加Eca109细胞的放射敏感性。     

食管癌二野淋巴结清扫术后复发规律探讨

目的 分析胸段食管癌二野淋巴结清扫术后局部复发规律,为术后放疗提供帮助.方法 搜集本科2004-2009年收治的134例胸段食管鳞癌术后局部复发患者的临床资料,依据放疗前定位CT分析复发类型及各区域淋巴结转移情况.结果 食管癌术后淋巴结转移占94.0%,吻合口复发占9.7%,食管原瘤床复发占3.7%.126例淋巴结转移患者中纵隔、锁骨上、腹部的分别占80.2%、43.7%、13.5%(χ2=113.15,P=0.000).淋巴结转移上纵隔占73.8%,左喉返神经区(1L区、2L区、4L区、5区)占38.9%,右喉返神经区(1R区)占43.7%,隆突下占34.1%,奇静脉占15.1%,锁骨上占43.7%[右锁骨上多于左锁骨上(31.7%和16.7%;χ2=7.81,P=0.005)].结论 淋巴结转移是胸段食管癌术后局部复发最主要的类型,原瘤床和吻合口复发少见.锁骨上、喉返神经区、奇静脉淋巴结及隆突下淋巴结是二野淋巴结清扫术后淋巴结转移的高发区.

Abstract：

Objective To investigate the local-regional recurrence in thoracic esophageal cancer after radical surgery including two-field lymph node dissection and provide evidence for postoperative radiotherapy. Methods We reviewed local-regional recurrence for 134 cases with esophageal squamous cell carcinoma after radical surgery from 2004 to 2009. Results In 134 cases, lymph node metastasis rate,anastomosis recurrence rate and tumor bed recurrence rate was 94. 0%, 9. 7% and 3.7%, respectively. As to the 126 cases with lymph node metastasis, significant difference was detected between mediastinal metastasis, supraclavicular metastasis and abdominal lymph node metastasis (80. 2%, 43.7% and 13.5%,respectively, χ2= 113. 15, P = 0. 000). Furthermore, the relative metastasis rate in upper mediastinum,middle mediastinum and the lower mediastinum was 73.8%, 39.7% and 1.6%, respectively, the difference was statistically significant ( χ2 = 139. 11, P = 0. 000 ). Significant difference was identified between right and left supraclavicular lymph node metastasis (31.7% vs 16. 7%, χ2= 7. 81, P = 0. 005 ).To confirm the analysis above,lymph node metastasis rate of left recurrent laryngeal nerve nodes, (including region 1L, 2L, 4L and 5) ,right recurrent laryngeal nerve nodes, azygos nodes, subcarinal nodes, and 2R region was 38.9%, 43.7%, 15.1%, 34.1% and 25.4%, respectively. Conclusions The main characteristics of local-regional recurrence may be lymph node metastasis for esophageal squamous cell carcinoma after radical surgery. On the contrary, tumor bed recurrence is rare. Dangerous regions include supraclavicular nodes, recurrent laryngeal nerve nodes, azygos nodes as well as subcarinal nodes.     

联合检测Syk及nm23H1在大肠癌中的表达及其意义

目的：探讨候选抑癌基因脾酪氨酸激酶（spleen tyosine kinase,Syk）及转移抑制基因（metastasis suppressorgene,nm23H1）在大肠癌组织中的表达及其生物学行为之间的关系。方法：采用免疫组织化学SP法,分别检测60例大肠癌组织及30例癌旁正常组织中Syk及nm23H1蛋白的表达情况;并分析其与大肠癌病理特征及生物学行为之间的关系。结果：Syk及nm23H1蛋白在大肠癌组织中的阳性表达率分别为31.7%、53.3%,在癌旁组织中的阳性表达率分别为96.7%、93.3%,癌组织中的阳性表达率均较癌旁组织明显降低（P〈0.05）。单因素分析显示Syk及nm23H1蛋白分别与淋巴结转移、浸润深度、Dukes分期密切相关（P〈0.05）,但与患者的年龄、性别、肿瘤大小、发生部位和肿瘤分化程度无明显关系（P〉0.05）。结论：大肠癌组织中Syk和nm23H1蛋白表达均明显低于癌旁正常组织,可能与大肠癌的发生发展及恶性程度相关。联合检测Syk及nm23H1的表达对大肠癌的临床治疗和预后判断有一定价值。     

前列腺癌中细丝蛋白A表达的临床意义

[目的]探讨细丝蛋白A（filamin A,FLNA）在前列腺癌中的表达及意义。[方法]采用免疫组织化学方法、Western blot检测68例前列腺癌组织及距其癌组织边缘2cm以上的镜下未见癌浸润的正常组织中FLNA蛋白的表达情况。[结果]免疫组织化学结果表明,FLNA蛋白在前列腺癌组织的表达阳性率为38.2%,较正常前列腺组织（75.7%）明显降低（P〈0.05）。Western blot结果表明,FLNA的蛋白在前列腺癌组织的相对表达量较正常前列腺组织明显降低,两者比较差异具有统计学意义（P〈0.05）。FLNA蛋白表达与前列腺患者年龄、PSA水平无关（P〉0.05）;而与淋巴结转移、临床分期以及Gleason评分有关（P〈0.05）。[结论]前列腺癌组织中FLNA蛋白表达明显减低,可能在前列腺癌发生的负反馈调节中起重要作用。     

调强放疗对局限期小细胞肺癌体积及预后影响分析

目的研究分析在调强放疗(IMRT)作用下局限期小细胞肺癌(LS-SCLC)体积变化规律及其影响因素,及预后因素分析。方法回顾性分析101例行胸部IMRT治疗的LS-SCLC患者临床资料,进行生存分析;并对其中20例规律复查患者进行肿瘤体积变化趋势及其影响因素分析。结果配对t检验分析发现,放疗定位与放疗结束时肿瘤体积差异有统计学意义(P<0.05);生存分析发现合并肺部基础病、年龄、放疗剂量是生存的影响因素(P均<0.05);Cox比例风险模型多因素分析,发现放疗剂量、肿瘤退缩率、年龄、合并肺部基础病是预后的影响因素(P均<0.05)。结论 LS-SCLC肿瘤体积在IMRT结束时退缩最明显,放疗后第1个月最小,之后逐渐增大,放疗结束6个月后超过放疗前;放疗结束时肿瘤退缩率、合并肺部基础病、放疗剂量、年龄是LS-SCLC的预后影响因素。     

FLNA在鼻咽癌发生中的作用及其可能的分子机制

目的：探讨细丝蛋白A（filamin A,FLNA）在鼻咽癌中的表达水平及其过表达对鼻咽癌（nasopharyngeal carcinoma, NPC)细胞生物表型的影响。 方法： 收集2008年1月至2008年12月唐山市人民医院病理科活检取得并经病理证实的新鲜NPC组织标本63例及21例距其癌组织边缘2 cm以上且镜下未见癌浸润的正常鼻咽组织（对照组）,采用免疫组织化学及Western blotting方法检测NPC组织及正常鼻咽组织中FLNA及MMP-9蛋白的表达。以慢病毒转染建立FLNA过量表达的NPC CNE2细胞株,采用RT-PCR及Western blotting检测转染后NPC CNE2细胞株中FLNA的表达变化;MTT法检测FLNA蛋白过量表达对NPC细胞增殖的影响,Transwell实验检测CNE2细胞的侵袭能力。 结果： FLNA蛋白在NPC组织中的阳性表达率明显低于正常鼻咽组织（36.5% vs 66.7%, P <0.05）,其在NPC组织的相对表达量较正常鼻咽组织的相对表达量明显降低\[（0.378±0031） vs （0.835±0.078）, P <0.05\],FLNA蛋白的表达水平与NPC T分期、有无淋巴结转移、临床分期以及组织分级有关（ P <0.05）。FLNA蛋白高表达的CNE2细胞其增殖能力明显减弱、侵袭转移能力明显降低、 MMP-9蛋白表达量明显下调。 结论： NPC组织中FLNA蛋白表达明显降低可能是鼻咽黏膜恶性转变的重要生物学标志,对预测NPC发生、浸润、转移有重要意义。     

低氧对食管癌Eca109细胞体外迁移及侵袭的影响

 目的 探讨低氧对食管癌迁移及侵袭能力的影响及其作用机制。方法 采用CoCl2化学低氧法模拟肿瘤低氧微环境,半定量RT-PCR和免疫细胞化学分别检测不同低氧时相时食管癌Eca109细胞中低氧诱导因子-1α（HIF-1α）、E-钙粘蛋白及基质金属蛋白酶-2（MMP-2）mRNA及蛋白的表达。Western印迹法检测雷帕霉素联合低氧处理Eca109细胞后,HIF-1α、E-钙粘蛋白及MMP-2的变化。细胞划痕试验和Transwell实验检测雷帕霉素联合低氧对Eca109细胞迁移及侵袭能力的影响。结果 Eca109细胞在低氧状态下,HIF-1αmRNA无明显变化（P>0.05）,仅蛋白表达增多;E-钙粘蛋白的mRNA表达明显降低（P<0.05）,蛋白表达减少;MMP-2 mRNA表达明显升高（P<0.05）,蛋白表达增多。雷帕霉素在低氧状态下可显著抑制HIF-1α及MMP-2表达,促进E-钙粘蛋白高表达。经雷帕霉素处理后,Eca109细胞在低氧状态下,迁移速度减慢,侵袭穿膜细胞数减少（P<0.05）。结论 低氧使Eca109细胞中HIF-1α蛋白表达增多,后者可能通过下调E-钙粘蛋白、上调MMP-2表达促进食管癌在低氧状态下的迁移及侵袭。     

CCNG2在前列腺癌中的表达及其临床意义

[目的]探讨细胞周期蛋白G2（CCNG2）在前列腺癌中的表达及意义。[方法]采用免疫组织化学方法、Western blot检测85例前列腺癌组织及距其癌组织边缘2cm以上镜下未见癌浸润的正常组织中CCNG2蛋白的表达情况。[结果]免疫组织化学结果表明,CCNG2蛋白在前列腺癌组织及正常前列腺组织中的表达阳性率分别为31.8%、96.5%,差异有统计学意义（P〈0.05）。Western blot结果表明,CCNG2蛋白在前列腺癌组织的相对表达量较正常前列腺组织的相对表达量明显降低,差异具有统计学意义（P〈0.05）。CCNG2蛋白表达与前列腺癌患者年龄、肿瘤大小、PSA水平无关（P〉0.05）;而与Gleason score、淋巴结转移以及肿瘤临床分期有关（P〈0.05）。[结论]前列腺癌组织中CCNG2蛋白表达明显降低,且与前列腺癌Gleason score、淋巴结转移、临床分期有关。