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以成纤维细胞作为饲养层供角朊细胞生长 总被引：2，自引：0，他引：2
体外角朊细胞培养已有多年的历史，随着人们对角朊细胞(Keratinocyte，KC)生长状况、结构功能及生物学特性的不断了解，培养技术日趋完善。比较成熟的是以NIH3T3细胞作为饲养层，有血清培养法和无血清培养法，前者可以培养出整张细胞膜片用于临床；后者用于对KC特性的实验研究，但3T3细胞作为异种细胞，存在伦理学问题及潜在的危害，因此本研究用成纤维细胞作为饲养层培养KC，旨在观察其促贴壁、生长和分化作用，为临床提供理论依据。 相似文献
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目的 体外培养人真皮成纤维细胞。方法 利用胶原酶消化法培养人真皮成纤维细胞 ,然后通过细胞形态学、免疫组织化学等方法进行分析鉴定。结果 培养的细胞为长梭形 ,并表达成纤维细胞波形蛋白、Ⅰ型胶原蛋白。结论 培养出高纯度的人真皮成纤维细胞 ,可作为填充材料修复组织缺损 相似文献
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目的 拟建立一种不依赖于活病毒和高等级生物安全条件,快速简便检测中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)受体结合区(RBD)特异性的中和抗体。方法 利用哺乳动物表达系统表达重组rRBD-Fc蛋白;应用流式细胞术检测rRBD-Fc蛋白与Huh-7细胞结合的最佳浓度,建立通过流式细胞术检测rRBD-Fc与Huh-7结合活性的方法,并利用无关蛋白验证结合的特异性;在此基础上,利用RBD特异性中和抗体、RBD特异性非中和抗体、MERS-CoV RBD免疫小鼠血清和无关抗体建立能够检测中和抗体阻断RBD与Huh-7结合作用的RBD特异性中和抗体检测技术方法,并与实毒中和试验进行比较,评价方法的一致性;应用建立的中和抗体检测方法进行血清学检测。结果成功表达了rRBD-Fc蛋白,rRBD-Fc蛋白能够与Huh-7细胞特异性结合,并确定了rRBD-Fc与Huh-7细胞结合的最佳剂量;在此基础上建立了通过流式细胞术检测抗体阻断RBD与Huh-7结合作用的RBD特异性中和抗体检测技术方法,结果表明,检测方法能够区分具有中和活性的RBD特异性中和抗体、rRBD-Fc免疫小鼠血清和其他抗体,具有特异性,且能够反映中和活性的强弱。该方法在检测12株中和抗体时,与传统的实毒中和试验检测结果具有很好的一致性,能够有效应用于血清学检测。结论 成功建立了一种不依赖活病毒和高等级生物安全条件,即可快速检测MERS-CoV RBD特异性中和抗体的方法,为针对MERS-CoV疫苗设计和抗体效果快速评价、血清学调查和免疫保护机制研究提供了一种更加简便、安全的技术手段。 相似文献
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目的 建立LPS/D-GaIN诱导小鼠急性肝损伤模型。方法 40只雌性C57BL/6小鼠用于观察8种不同LPS与D-GalN剂量配比联合刺激后小鼠存活时间,以确定模型建立的最佳剂量。使用腹腔注射最佳剂量染毒32只雌性C57BL/6小鼠,分别在0h、1h、4h、8h处死,每组8只,0h注射相同剂量生理盐水作为对照。观察染毒后小鼠肝组织病理损伤,检测血清中ALT及炎症因子IL-6、MCP-1和TNF-α表达水平变化。结果 通过观察小鼠存活时间,确定腹腔注射最佳染毒剂量为LPS（2.5mg/kg）和D-GalN（0.3g/kg）;小鼠染毒后肝组织呈进程性病变,最终发展为肝脏弥漫性坏死,肝细胞核崩解。与对照组相比,血清ALT显著升高（P<0.001）,IL-6、MCP-1、TNF-α均在1h后达到最高水平（P<0.001）,然后持续下降。结论 成功建立LPS/D-GaIN诱导小鼠急性肝损伤模型,为探索急性肝损伤的致病机制以及药物干预治疗提供有效的动物模型。 相似文献
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