高产的大鼠胰岛提取法

目的 探寻经济、高产的大鼠胰岛分离纯化方法 .方法 Wistar大鼠分别以质量浓度为0.1%、0.05%及0.03%的V型胶原酶胆管灌注,灌注量6～8mL,经过静态及震荡2步消化法后,用Dextran不连续密度梯度法纯化胰岛.通过DTZ和AO/PI染色及葡萄糖刺激试验对分离纯化胰岛进行体外检测;通过体内肾被膜下移植检测其体内活性.结果 3种胶原酶浓度平均胰岛收获量分别为(835±183)、(1243±339)及(711±103)个/只,通过体内外检测表明以0.1%、0.05%胶原酶分离纯化胰岛功能良好,0.05%收获量最大,0.05%和0.1%与0.03%之间比较P＜0.05.结论 以0.05%的胶元酶V6～8mL胆管灌注消化的方法 是一种收获量较大,同时所提取胰岛数量多、活性良好,酶耗量较低的胰岛提取方法 .     

BPA微囊与APA微囊机械强度和生物相容性的比较研究

目的 比较海藻酸钡-多聚赖氨酸-海藻酸(BPA)微囊与海藻酸-多聚赖氨酸-海藻酸(APA)微囊的生物相容性和机械强度的生物物理特性.方法 用静电微囊发生仪制备BPA和APA微囊,通过机械振荡法和肌肉下移植来检测微囊的机械强度.通过微囊大鼠腹腔移植来观察BPA和APA微囊的生物相容性.结果 机械振荡48h后APA微囊的破损率为4.3%,BPA微囊仅为1.5%;肌肉下移植1个月后,组织切片H&E染色显示,APA和BPA微囊均保持完整,仅有轻度纤维化包裹;腹腔移植4、8和10周后,从大鼠腹腔内取出的微囊中95%～98%为结构完整,呈圆形,表面光滑,光镜下无明显的结缔组织包绕.结论 所制备的BPA微囊的生物相容性河机械强度优于APA微囊.     

Dextran分离纯化大鼠胰岛的生物学特性

目的探讨一种分离纯化大鼠胰岛的方法,并评价该法分离得到的胰岛的生物学特性。方法常规外科手术分离胰腺。然后将其剪为1mm3左右碎块,置于0·9mg/ml胶原酶V37℃振荡消化10~17min,以含10%胎牛血清的Hank’s液终止消化。60目筛网过滤。Dextran T40非连续密度梯度离心纯化胰岛。纯化后的胰岛经DTZ染色,吖啶橙/碘化丙啶(AO/PI)染色、放射免疫分析检测胰岛素分泌量,纯化后的胰岛进行异种移植,检测降糖效果。结果胰岛分布于11?xtran和1640及11%和22?xtran界面之间,平均每只Wistar大鼠消化后可获得2181±14个胰岛,纯化后回收1826±24个胰岛,胰岛收获量达(85·7±5·9)%,纯度高达95%以上。胰岛对葡萄糖刺激有良好的反应性,纯化后胰岛异种移植,可逆转实验性糖尿病SD大鼠血糖7~10天。结论胶原酶消化,Dextran T40纯化是一种简单、高效的胰岛分离纯化方法,获得的胰岛有良好的生物学特性。     

佳木斯市医疗照射频率调查

随着医疗卫生事业的发展,医用Ｘ射线诊断、核医学和放射治疗等应用日渐广泛。为了加强放射工作人员、受检者的防护,我们按照卫生部要求对佳木斯市医疗照射水平进行调查,现将调查结果报道如下。1　医院概况佳木斯市医疗照射单位98个,放射工作人员391人,占医院职工总数4%。Ｘ射线诊断设备佳木斯市区所用Ｘ线机为200ｍＡ～600ｍＡ,其中400ｍＡ～600ｍＡ占主导地位。六县(市)所用Ｘ射线机以200ｍＡ为主,7台Ｘ-ＣＴ机,佳木斯市区占5台,佳木斯市区1台Ｘ射线治疗机。核医学设5台γ计数器,1台活度计,1台肾图仪。近几年,佳木斯Ｘ射线诊断设备更新较快…     

使用动物垫料添加机或垫料倾倒机时人员呼吸防护用品的评估

目的通过检测分析垫料装填倾倒和过程中工作区域内空气粉尘以及氨气的浓度,来评估工作环境的气体危害,以帮助实验动物机构选择合适的呼吸防护用品。方法选定有垫料的工作区域,连续采样3次。自检了工作状态时垫料倾倒工作区域空气中的氨浓度并委托第三方检测公司检测了垫料装填和倾倒过程中的空气粉尘浓度。结果检测结果发现,工作状态时垫料倾倒工作区域空气中的平均氨浓度为0.19 mg/m~3,垫料分装过程中的平均空气粉尘浓度为0.55 mg/m~3,倾倒过程中的平均粉尘浓度为0.27 mg/m~3。上述结果均远远小于国家标准规定的工作场所有害物质浓度。结论根据GBT18664-2002的标准,判定理论上使用动物垫料添加机或垫料倾倒机的实验动物机构,在操作时无需使用N95口罩。建议实验动物生产或使用单位配备动物垫料添加机或垫料倾倒机并按照国标做职业健康检测及风险评估以保护工作人员及环境,并根据具体情况配备不同的呼吸防护用品。     

模拟微重力条件下大鼠胰岛培养及体内移植的实验研究

目的研究经模拟微重力条件培养的胰岛是否能够降低胰岛移植过程中引发的免疫排斥反应，进而延长胰岛的体内存活时间。方法分离新鲜胰岛，应用培养皿对胰岛进行静态培养，同时应用旋转式生物反应器对胰岛进行三维立体培养。应用吖啶橙一碘化丙啶（AO-PI）染色和葡萄糖刺激实验对3种条件下培养得到的胰岛进行生物学活性研究。2000当量胰岛在旋转式生物反应器中培养5d后，将其移植入经链脲佐菌素（STZ）处理的糖尿病模型SD大鼠。肾被膜下作为实验组，以新鲜分离的胰岛和静态培养5d的胰岛移植入经STZ处理的糖尿病模型SD大鼠肾被膜下作为对照组。在不同时间点上，检测各组SD大鼠血糖变化情况；对各移植组中大鼠进行糖耐受实验。切除。肾被膜下的移植物组织作为标本，进行苏木精一伊红（HE）染色及胰岛素组织化学染色检测。结果体外检测结果表明，与新鲜分离的胰岛和静态培养的胰岛相比，微重力条件下培养的胰岛仍保持良好的胰岛素合成及分泌功能。体内实验表明，微重力条件下培养的胰岛体内移植组的血糖保持正常的时间明显高于接受静态培养的胰岛和新鲜分离的胰岛移植组。将微重力培养条件下胰岛移植大鼠后，取。肾被膜下移植区组织标本进行HE染色，未见明显淋巴细胞浸润，胰岛素免疫组织化学均可见阳性细胞。而新分离的胰岛以及静态培养的胰岛移植后，大鼠。肾被膜下移植物组织标本可见淋巴细胞浸润，移植物的厚度明显变小。结论胰岛在微重力条件下培养可降低移植引起的免疫排斥反应，进而延长移植物体内存活时间。