免疫毒素:Ⅱ抗人T淋巴细胞单克隆抗体和蓖麻毒素结合物的制备及其细胞毒性质

抗体和毒素的结合物称“免疫毒素”,近年来由于单克隆抗体的出现,更增强了“免疫毒素”的特异性。在抗人T淋巴细胞的单克隆抗体上接蓖麻毒素就能成为特异性杀伤T细胞的制剂,为有效地清除骨髓中的T细胞,为在临床上治疗各种有关疾病提供了新的途径。 本文叙述了用异型双功能连接剂,N—琥珀酰亚氨基—3—(2—吡啶基二硫)丙酸(SPDP),将抗人T淋巴细胞单克隆抗体与蓖麻毒素相连接,并初步证明这些免疫毒素对T淋巴细胞的特异性杀伤。     

分子伴侣HSP70研究进展

分子伴侣HSP70在原核、真核细胞均已发现,它们具有共同的生化特征,在细胞内各自分布在特定的区域。其主要生物学功能是促进新生多肽链的正确折叠,对于分子重排、解离聚集蛋白和新生多肽的膜运输也具有重要的辅助作用。     

利用噬菌体随机15肽库确定SLE相关多肽的研究

目的 利用噬菌体随机15肽库确定SLE相关多肽。方法 从系统性红斑狼疮（SLE）病人血清中纯化抗dsDNA多克隆抗体,以此为筛选配基,对噬菌体随15肽库进行亲和筛选。结果 经3轮筛选,每轮的投入／产出比逐轮升高,提示筛选具有良好的富集效果。第3轮筛选后选其中18个克隆重进行结合试验,结果显示有6个公与SLE病人血清反应而不与正常人血反应,经DNA序列测定,发现其中5个克隆相同,通过该序列推出插入的外源短肽序列,合成并纯化该肽段。用此肽段分别与20例SLE病人及20例正常人血清反应,结果差异有显著性。结论 该肽段可能是与SLE相关的抗原多肽。     

细胞裂解物的O''''Farrell电泳

本实验室建立了O'Farrell 1975年提出的一种新型双向电泳(2-DE)技术,采用含脲与中性去污剂的等电聚焦技术(IEF)为第一向,十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺电泳(SDS-PAGE)为第二向.此技术将上述两种分离方法的特点结合起来,显著提高了对蛋白质多肽的电泳分辨率.O'Farrell电泳技术已成为现今所有蛋白质多肽分离分析技术中分辨率最高的一种,在基因表达、遗传变异、癌变过程的研究中应用日益广泛.     

蛋白激酶Cξ亚型基因及UrotensinⅡ基因中各有一个单核苷酸位点与中国北方汉族人群2型糖尿病相关

目的采用单核苷酸多态性(singlenucleotidepolymorphism,SNP)标记,在以往中国北方汉族人群2型糖尿病相关基因定位区域(1p36.33-p36.23)内寻找疾病易感基因位点。方法通过生物信息学方法在公共SNP数据库中查找定位区域内10个候选基因中的23个SNP位点,用单碱基延伸反应(singlebaseextension,SBE)法对北方汉族人群散发2型糖尿病患者(192例)及对照组(172例)进行分型及病例-对照关联分析。结果23个SNP位点中有8个为中国北方人群常见SNP位点;对病例组和对照组分型分析显示,位于蛋白激酶Cξ亚型(PRKCZ)基因中的一个位点(rs436045)及urotensinⅡ(UTS2)基因中的一个位点(rs228648),其等位基因频率在两组的差异具有统计学意义(P<0.05)。结论上述两个SNP位点可能和中国北方汉族人群2型糖尿病相关,以上结果为进一步研究上述两个位点所在的基因与2型糖尿病的关系提供了理论依据。     

蛋白激酶Cξ亚型基因内SNP功能分析

目的对中国北方汉族人群2型糖尿病易感基因蛋白激酶Cξ亚型(PRKCZ)基因内的5个单核苷酸多态性(singlenucleotidepolymorphismSNP)标记在疾病发生中的作用进行分析。方法通过生物信息学比对及报告基因活性测定等方法分析PRKCZ基因内5个SNP位点对基因表达的影响。结果PRKCZ基因中rs427811和rs809912位点两种等位基因重组质粒报告基因活性存在明显差异,提示这两个位点可能影响PRKCZ基因表达。结论PRKCZ基因中两个SNP位点可能通过影响基因的表达水平而在中国人2型糖尿病发生中发挥作用。     

超氧化物歧化酶的脂质体载体

类脂被提纯后,当与水相共存时又能自发地重新形成封闭的膜系统,这种重新形成的膜系统称为脂质体。脂质体除可作为研究生物膜的模型外,近年来还发现它可能是一种有希望的药物载体。有各种方法可用来制取脂质体。如溶于有机溶剂的类脂在令溶剂蒸发后,可在水相的参与下形成多层脂质体;在去污剂与磷脂的混合物中移去去污剂形成单层脂质体;溶于乙醇的类脂快速注入缓冲溶液,则可形成小的单层脂质体等。但是所有这些方法形成的脂质体包裹水相的效率都不高,特别是对于生物大分子。     

以激活的脾细胞为反应细胞测定IL-2活性

本文介绍了以激活的小鼠脾细胞为反应细胞测定IL-2活性的方法,并研究了影响其活性测定的一些因素.此方法不需传代培养,比对IL-2依赖性CTLL(细胞毒性T淋巴细胞瘤)细胞株法简便,活性测定的灵敏度与特异性与采用对IL-2依赖的CTLL细胞株法所测定的结果相似,在无CTLL细胞株的情况下,也可以作为IL-2活性测定的方法.     

蛋白电泳银染显色法

银染显色法是一种电泳染色的新方法。作者经过反复比较,建立了一种实用的操作方法。其检测灵敏度比考马斯亮蓝法高50倍以上,重复性好,本底清晰,易于掌握,所用的试剂都易于得到。本文所介绍的方法特别适用于微量样品的电泳分离或高分辨电泳图谱的检出。     

胸腺素对前胸腺细胞分化的影响

<正> 自从Goldstein首次报告从小牛胸腺分离制备了胸腺素F_5(也称胸腺素)后,发现它是一个强的提高机体免疫能力的制剂,在一些实验模型中可以代替胸腺而重建免疫功能。本文利用免疫荧光技术和细胞毒方