氯灭活水中脊髓灰质炎病毒机制的研究

目的探讨氯对脊髓灰质炎病毒核酸和衣壳蛋白的破坏在灭活病毒中的作用,并对病毒基因组受损区域进行定位,阐明氯灭活脊髓灰质炎病毒的机制。方法以不同剂量(0.1、0.5、1.0、1.5和2.0mg/L)的有效氯对脊髓灰质炎病毒作用不同时间(0、15、30、45和60min),采用大片断逐步步移PCR(long-overlapping PCR)分析氯对病毒全基因组的损伤,以ELISA技术分析氯对病毒衣壳蛋白的破坏,以细胞培养检测病毒感染性。结果脊髓灰质炎病毒各部分对氯的抵抗力强弱存在如下关系:病毒衣壳>基因组蛋白编码区>基因组5′端非编码区(noncoding region,NCR)>基因组3′端NCR>poly A尾;脊髓灰质炎病毒的polyA尾和3'端NCR破坏可造成病毒的感染性下降,但不能完全灭活病毒;5′端NCR的破坏与病毒感染性的消失一致,损伤区域主要位于富含二级结构的区域。结论氯主要通过破坏脊髓灰质炎病毒核酸而非衣壳蛋白灭活病毒;病毒基因组5′NCR内二级结构区域的破坏对脊髓灰质炎病毒具有致死效应。     

南海官兵驻岛礁细菌分布及抗菌药物敏感性研究

目的了解我国南海驻岛官兵所生活岛礁的细菌种类、分布情况,以及细菌对抗菌药物的敏感性。方法无菌采集上岛1个月后人体皮肤、生活用品、厨房餐具、驻礁地表面和岛上空气样本,经增菌培养、细菌分离,进行细菌学鉴定和药敏试验。结果 120份样本分离出细菌27种124株;其中弧菌科细菌73株（58.9%）,肠杆菌科细菌27株（21.8%）,非发酵菌11株（8.9%）,革兰阳性球菌6株（4.8%）,厌氧菌2株（1.6%）。药敏结果显示,73株致病性弧菌对亚胺培南/西司他丁、头孢哌酮、阿莫西林/克拉维酸的敏感率为96.2%、88.5%、87.1%,对其它10种抗菌素的敏感率为85.9%～61.5%;27株肠杆菌对亚胺培南/西司他丁、头孢他啶、阿莫西林/克拉维酸的敏感率为92.6%、74.1%、74.1%,对其它10种抗菌素的敏感率为63.0%～40.7%;11株非发酵菌对亚胺培南/西司他丁、阿莫西林/克拉维酸、头孢他啶的敏感率为81.8%、72.7%、63.6%,对其它10种抗菌素的敏感率为54.6%～27.3%;革兰阳性菌对万古霉素、替考拉林、阿米卡星的敏感率为96.8%、93.5%、83.4%,对其它7种抗菌素的敏感率为50.5%～18.7%。结论南海某岛礁细菌分布以孤菌为主,但也进入大量陆地细菌,抗菌素敏感性与近海海水和陆地有所不同,为驻岛礁官兵细菌感染的防治提供了依据。     

肺结核病患者外周血前炎性因子及细胞亚群凋亡的研究

目的探讨前炎性因子及CD4＋T淋巴细胞凋亡在结核病免疫病理过程中的作用及临床意义。方法对45例肺结核患者采用免疫酶联吸附法检测血清中的TNF-α及IL-10水平,分离外周血单核细胞标记后用流式细胞仪测定CD4＋T淋巴细胞凋亡率,并进行相关性分析。结果肺结核患者血清中的TNF-α及IL-10水平明显高于健康对照组（P〈0.05）,其外周CD4＋T淋巴细胞凋亡率明显高于健康对照组（P〈0.05）;涂阳组外周血CD4＋T淋巴细胞凋亡率与涂阴组和健康对照组差异有显著性（P〈0.05）;复治组外周血CD4＋T淋巴细胞凋亡率显著高于初治组和对照组;外周血CD4＋T淋巴细胞凋亡率与TNF-α及IL-10水平呈正相关（P〈0.05）。结论外周血CD4＋T淋巴细胞凋亡率与TNF-α及IL-10水平呈正相关,均参与了对结核杆菌感染的免疫病理过程。     

二氧化氯灭活水中脊髓灰质炎病毒的机制

目的探讨二氧化氯对脊髓灰质炎病毒核酸和衣壳蛋白的损伤在病毒灭活中作用,阐明二氧化氯灭活脊髓灰质炎病毒机制。方法观察不同质量浓度（0．1、0．2、0．4、0．8、1．2mg／L）和不同作用时间（0、1、2,4、8和12min）二氧化氯对脊髓灰质炎病毒的作用,用大片段逐步步移RT-PCR（10ng-overlapping RT-PCR）分析二氧化氯对病毒全基因组的损伤,用ELISA分析病毒衣壳蛋白的损伤,通过细胞培养检测病毒感染性。结果脊髓灰质炎病毒衣壳蛋白对二氧化氯抵抗力强于核酸;基因组各部分对二氧化氯抵抗力强弱存在差异;二氧化氯对PV1 5’-NCR124-679nt区域的损伤与PV1的灭活一致。结论二氧化氯主要通过破坏脊髓灰质炎病毒核酸而不是衣壳蛋白来灭活病毒;病毒基因组5’-NCR内二级结构区域的破坏对脊髓灰质炎病毒具有致死效应。     

呼吸道肺炎克雷伯菌耐药性与 CTX-M 型 ESBLs 的研究

目的：探讨来源于呼吸道肺炎克雷伯菌(KP)耐药性与CTX-M型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的关系。方法采用PCR 扩增和测序分析检测 KP 质粒和染色体上的 CTX-M 型 ESBLs 基因;采用纸片扩散法检测抗菌药物敏感性;使用χ2检验分析相关数据。结果有 CTX-M-1群酶和 CTX-M-25群酶检出,CTX-M 型 ESBLs 的总检出率为39.02%(48株),其中质粒和染色体上同时携带 CTX-M-1群酶的检出率为26.02%(32株)。β-内酰胺类抗菌药物头孢唑林、氟喹诺酮类抗菌药物左旋氧氟沙星、磺胺类抗菌药物复方磺胺甲恶唑等在 CTX-M 型 ESBLs 阳性组的耐药率明显高于阴性组(P <0.05)。结论在来源于呼吸道的 KP 中,在质粒和染色体上同时携带 CTX-M-1群酶基因最常见,CTX-M 型 ESBLs 与 KP 对某些抗菌药物产生耐药性关系密切。     

云南白药水提取物抑制铜绿假单胞菌AlgR2-AlgR1双组份调控系统磷酸化研究

目的：研究亚致死剂量的云南白药水提取物（Aquatic Extract of Yunnan Baiyao,AEYB）对铜绿假单胞菌（Pseudomonas Aeruginosa,PA）AlgR1-AlgR2双组份调控系统的磷酸化、海藻酸盐的生物合成及生物膜形成的影响。方法：通过放射性同位素标记方法研究AEYB对AlgR1-AlgR2磷酸化的影响;采用real-time PCR分析YBX海藻酸盐合成酶基因algD转录的影响;用咔唑法和结晶紫法分别对海藻酸盐和静态生物膜进行定量测定。结果：AEYB并不抑制AlgR2的自磷酸化,但能抑制AlgR2的磷酸基团向AlgR1转移,从而抑制AlgR1的磷酸化。AEYB可显著下调algD基因的转录,并抑制alginate的合成,最终减少PA静态生物膜的形成。结论：云南白药可通过抑制AlgR1-AlgR2系统的磷酸化的途径来减少PA的alginate的生物合成,对PA生物膜的形成具有抑制作用。     

细胞壁锚定蛋白编码基因SasX 与金黄色葡萄球菌耐药性的相关性研究

目的 探讨细胞壁锚定蛋白编码基因SasX 与金黄色葡萄球菌耐药性的相关性。方法 PCR扩增SasX 基因;运用琼脂稀释法检测抗菌药物的最小抑菌浓度;采用卡方检验和确切概率法分析数据。结果 SasX 基因的检出率为28.75%（92株）,其中在MRSA和MSSA中的检出率分别是33.15%（61株）和22.79%（31株）;SasX 基因在ICU和痰液中的检出率分别为42.05%（37株）和26.94%（45株）。ICU等的SasX 基因阳性株构成比均明显比阴性株高（P ＜0.05）,但在MRSA中,神经外科和呼吸内科的SasX 基因阳性株构成比却明显比阴性株低（P ＜0.05）;头孢西丁等在SasX 基因阳性株中的耐药率明显高于阴性株（P ＜0.05）;在MRSA中,阿米卡星、复方新诺明等在SasX 基因阳性株中的耐药率明显高于阴性株,而在MSSA中,仅阿米卡星、红霉素在SasX 基因阳性株中的耐药率明显高于阴性株（P ＜0.05）。结论 SasX 基因阳性金黄色葡萄球菌更容易产生耐药性（对MRSA影响更大）。SasX 基因在各个临床科室和各种标本中的检出情况各异,应个体化处理。     

极低频电磁场对小鼠脑和肝脏c-fos mRNA水平的影响

目的　研究极低频电磁场暴露对小鼠脑和肝组织c fosmRNA水平的影响。方法　将小鼠暴露于 5 0Hz、0 .2mT及 5 0Hz、6 .0mT的电磁场中 ,持续 2周或 4周 ;采用竞争性RT PCR方法检测小鼠脑和肝脏c fosmRNA水平。结果　 5 0Hz、0 .2mT及 5 0Hz、6 .0mT电磁场暴露 2周后 ,小鼠脑组织c fosmRNA的水平上升为 ( 0 .0 178± 0 .0 0 76 )amol 12 0ngcDNA和 ( 0 .0 0 92± 0 .0 0 4 2 )amol 12 0ngcDNA ,与对照组 [( 0 .0 0 12± 0 .0 0 0 5 )amol 12 0ngcDNA]比较 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;肝组织c fosmRNA的水平上升为 ( 0 .0 117± 0 .0 0 5 5 )amol 12 0ngcDNA和 ( 0 .0 14 8± 0 .0 16 2 )amol 12 0ngcDNA ,与对照组[( 0 .0 0 0 5± 0 .0 0 0 5 )amol 12 0ngcDNA]比较 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。 0 .2mT和 6 .0mT电磁场暴露4周后 ,小鼠脑组织c fosmRNA的水平上升为 ( 0 .0 10 0± 0 .0 0 5 4 )amol 12 0ngcDNA和 ( 0 .0 198±0 .0 0 79)amol 12 0ngcDNA ,与对照组 [( 0 .0 0 15± 0 .0 0 0 8)amol 12 0ngcDNA]比较 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;肝组织c fosmRNA的水平分别上升为 ( 0 .0 173± 0 .0 12 2 )amol 12 0ngcDNA和 ( 0 .0 133±0 .0 0 90 )amol 12 0ngcDNA ,而对照组无表达。结论　 5 0Hz电磁     

间歇性无氧运动对小鼠脑、心肌、骨骼肌抗氧化能力及脂质过氧化损伤的影响

目的:观察间歇性无氧运动对小鼠脑、心肌、骨骼肌抗氧化能力和脂质过氧化损伤的影响.方法:选用96只昆明雄性小鼠,建立间歇无氧运动模型,观察运动后脑、心肌、骨骼肌SOD活性、T-AOC能力及MDA含量的变化及间歇性无氧运动对小鼠行为能力的影响.结果:间歇运动后,小鼠骨骼肌SOD活性、T-AOC及MDA含量显著高于对照组(P<0.05).心肌SOD和T-AOC变化与骨骼肌大致相同,显著高于对照组(P<0.05),但MDA差异不显著(P>0.05).脑组织T-AOC升高显著(P<0.05).结果显示:间歇运动使小鼠体重自然增长速度延缓.间歇性无氧运动对小鼠抗氧化能力及脂质过氧化水平的影响存在较明显的组织差异.     

纳米氧化铝在多重耐药质粒RP4接合转移过程中对细菌形态学的影响

目的探讨纳米氧化铝(平均粒径为20nm)对液相条件下多重耐药质粒RP4接合转移的影响,并从形态学角度初步探讨其影响机制。方法接合供体菌为大肠杆菌HB101(RP4),受体菌为Salmonella aberdeen Kauffmann 50312(strR),供、受体菌液均为109cfu/ml(浓度比为1∶3),纳米Al2O3浓度分别为0.005、0.05、0.5、5、50mmol/L,25℃静止接合8h后计算转接合子数,然后采用透射电镜和激光扫描共聚焦显微镜进行形态学研究。结果RP4的接合转移随着纳米Al2O3浓度的升高具有上升趋势。5mmol/L和50mmol/L纳米Al2O3组接合率分别为空白对照组的150倍和40倍,差异均有统计学意义。透射电镜观察结果表明,空白对照组只能观察到单个供、受体菌接合,5mmol/L和50mmol/L纳米Al2O3组能观察到多个细菌同时发生接合的情况;50mmol/LAl2O3组一些细菌观察不到完整的细胞膜结构,该损伤可能是引起50mmol/L纳米Al2O3组接合率低于5mmol/L纳米Al2O3组的原因。激光扫描共聚焦显微镜观察结果提示纳米Al2O3能损伤细菌的细胞膜,细胞膜的损伤程度与进入细菌的纳米Al2O3的浓度呈正相关。结论纳米Al2O3能够促进接合子的产生,其影响机制可能是因为纳米Al2O3能够改变细胞膜通透性,间接影响接合过程,或者直接促进接合基因的表达所致。