尿毒症患者桡动脉钙化与骨密度及血清骨代谢指标的关系

目的 观察尿毒症患者桡动脉钙化情况并分析其与骨密度及血清骨代谢指标改变的关系.方法 以67例尿毒症患者为对象,取内瘘手术切除的桡动脉段,von Kossa染色及透射电镜检测血管钙化情况;检测Scr、血钙、磷、甲状旁腺素(iPTH);测定腰椎、股骨颈骨密度(BMD);放射免疫法测定血清25羟维生素D3 (25OHD)、1,25羟维生素D3[1,25(OH) 2D];ELISA法测定成纤维生长因子(FGF) 23、骨特异性碱性磷酸酶(BAP)、骨钙素(BGP)与Ⅰ型胶原吡啶交联物(ICTP).以23例健康体检者为对照,仅接受血清及骨密度检查.结果 von Kossa染色见24例(35.8％)尿毒症患者桡动脉中膜明显钙沉积;电镜发现中膜平滑肌细胞由 收缩型向分泌型转化,胞内有较多含钙囊泡,基质胶原明显增加伴钙磷结晶附着,程度与钙化评分一致.与对照组比较,尿毒症患者血磷、iPTH、FGF23、BGP、ICTP显著增加(均P＜0.05),血钙、25OHD、1,25(OH)2D显著降低(均P＜0.01),腰椎、股骨颈BMD也显著降低(均P＜0.01).相关分析显示,桡动脉钙化与糖尿病、股骨颈及腰椎骨密度Z值、ICTP、FGF23相关(r=0.62、-0.43、-0.25、0.34、0.86,P=0.000、0.012、0.001、0.018、0.000),与iPTH无相关(r=-0.08,P=0.306).按iPTH水平分层后,低iPTH(＜150 ng/L)组、高iPTH(＞300 ng/L)组患者iPTH与钙化相关(r=-0.41、0.31,P=0.044、0.023).多元回归分析显示,股骨颈骨密度Z值、ICTP、FGF23是桡动脉钙化的独立危险因素(β=-0.221、0.181、0.260,P=0.021、0.024、0.036).结论 尿毒症桡动脉钙化与平滑肌细胞合成和分泌较多的含钙基质有关,骨密度降低、骨转化率异常、骨吸收增加、血清FGF23水平增加是其危险因素.     

IgA肾病患者肾组织TNF-α表达与疾病活动性的关系

目的：观察IgA肾病(IgAN)患者肾组织TNF-α表达改变及其与疾病活动性的关系。方法　收集50例原发性IgAN的临床及病理资料,依据Hass评分方法,计算组织学活动指数（AI）与慢性指数（CI）;免疫组化法检测肾组织中TNF-α、疾病活动指标增殖细胞核抗原（PCNA）及疾病慢性化指标纤连蛋白（Fn）表达水平并进行半定量评分,观察肾组织TNF-α表达改变与AI、CI及Fn、PCNA表达的相关关系。结果：TNF-α在IgAN患者肾小球系膜细胞、近端肾小管上皮细胞均有表达。AI≥4的患者肾组织TNF-α表达明显高于AI<4的患者［(9.12±1.04) vs (2.72±0.31),P <0.01］,TNF-α表达与PCNA表达呈正相关(r=0.65, P <0.01),与Fn表达、CI无明显相关（p>0.05）;肾组织TNF-α表达与尿蛋白定量、尿红细胞数成正相关（r=0.49, P <0.01;r=0.60, P <0.01）。结论：IgAN患者肾组织TNF-α表达与疾病活动程度密切相关,提示针对TNF-α进行干预治疗,可能缓解IgAN进展。     

青少年肾活检临床病理分析

目的总结青少年患者肾活检病理类型特点及其临床意义。方法回顾性分析我院2000年1月～2011年1月收治的337例因肾脏疾病行经皮肾活检的青少年患者临床病理资料。结果原发性肾小球病占50.13%,最常见的是IgA肾病。继发性肾小球病占36.6%,最常见的是狼疮性肾炎。间质小管肾病占4.24%,遗传及先天性疾病占9.02%。本组资料中急性肾功能不全者39例,占11.57%;慢性肾功能不全患者58例,占17.21%。结论青少年肾活检病理类型多样,应及时行肾穿刺活检以明确诊断。     

尿毒症患者桡动脉组织学改变及其与动脉血管僵硬度的关系

Objective To examine the changes of histological parameters of radial artery in uremia,and to explore their effects on arterial stiffness.Methods Sixty uremic patients underwent arteriovenous fistula surgery for hemodialysis and 20 healthy subjects received healthy examination were collected as uremia group and control group, respectively.Segments of radial arteries were obtained from all of uremic subjects and were evaluated by HE, Masson, van Kossa staining and electron microscopy.The expressions of osteopontin (OPN), α-SMA and elastin in arterial wall were detected by immunostaining, and apoptotic cells were determined by TUNEL assay.All of the subjects in the two groups received brachial ankle pulse wave velocity (baPWV) examination and the results were compared.The associations among histological parameters and baPWV were analyzed.Results More than one half (34/60) of artery samples presented uniformly thickening intima, in which most of cells expressed α-SMA and a few cells underwent apoptosis.The subendothelial matrix was abundant in collagen fibers, and no calcium deposition was found.The media thickened obviously, with increased collagen fibers, reduced elastin, unchanged α-SMA expression, and a few apoptotic smooth muscle cells.Two thirds uremic arteries expressed OPN, of which only one half had significant calcium deposition.The adventitia thickened and no calcium deposition was found.The baPWV level in uremic subjects was ( 18.5 ± 3.2 ) m/s, far greater than that in control subjects ( P ＜ 0.001 ).Statistical analysis showed that baPWV value was correlated with media thickness, calcification degree, and collagen content positively, and with elastin expression negatively.For diabetic uremic subjects, the OR values of vascular calcium deposition and remarkably-elevated baPWV value were 3.1, 2.3, respectively.Conclusions Radial arterial intima often presents hyperplasia which is not related with baPWV increment in uremia.Arterial media calcification and collagen content incremental are the most two protuberant characteristics in uremia, especially in ones accompanied with diabetes.Medical calcification, collagen accumulation, and e]astin reduction may contribute to the increased arterial stiffness in uremia.     

螺内酯对1型糖尿病大鼠足细胞黏附功能的保护作用

目的 观察螺内酯对1型糖尿病大鼠足细胞黏附作用的影响.方法 选取SPF级健康雄性Wistar大鼠16只(6～7周龄,体质量180～220 g),尾静脉注射链脲佐菌素建立1型糖尿病大鼠模型.成模大鼠(n=13)以简单随机化方法分为模型对照组(n=7)和螺内酯治疗组(n=6),另设正常对照组(n=6).螺内酯治疗组以40 mg·kg~(-1)·d~(-1)螺内酯灌胃,正常对照组和模型对照组以剂量相当的蒸馏水灌胃.12周后观察大鼠空腹血糖、收缩压、24 h尿白蛋白定量等指标;采用免疫组织化学法、Western blot技术观察肾小球整合素α3表达情况.组间均数比较采用方差分析,其中两两比较采用q检验.结果 干预前,模型对照组大鼠空腹血糖水平明显高于正常对照组[分别为(23.96±3.86)和(4.85±0.50)mmol/L,q=12.00,P＜0.01],模型对照组和螺内酯治疗组间空腹血糖水平差异无统计学意义[分别为(23.96±3.86)和(22.76±3.85)mmol/L,q=0.95,P＞0.05].正常对照组、模型对照组、螺内酯治疗组间收缩压差异无统计学意义(F=0.51,P＞0.05).12周后,模型对照组大鼠空腹血糖水平明显高于正常对照组[分别为(28.54±2.24)和(5.20±0.19)mmol/L,q=54.39,P＜0.01];三组间收缩压差异无统计学意义(F=0.18,P＞0.05);模型对照组大鼠24 h尿白蛋白较正常对照组明显增加[分别为(6.54±1.14)和(1.01±0.08)mg/d,q=19.50,P＜0.01],整合素α3蛋白表达明显减少(分别为0.28±0.62和0.89±0.07,q=24.33,P＜0.05);螺内酯治疗组和模型对照组空腹血糖水平差异无统计学意义(q=2.73,P＞0.05),螺内酯治疗组较模型对照组24 h尿白蛋白排泄明显减少[分别为(5.32±0.31)和(6.54±1.14)mg/d,q=4.30,P＜0.05],整合素α3蛋白表达明显增加(分别为0.48±0.62和0.28±0.62,q=8.11,P＜0.01).结论 螺内酯可在不影响空腹血糖和血压水平的情况下减少1型糖尿病大鼠尿液中白蛋白和足细胞的排泄,上调肾小球整合素α3的表达,起到保护足细胞黏附功能的作用,这可     

长期接受不同饮食磷水平的慢性肾衰竭大骨组织形态学特征改变

目的探讨调节饮食磷水平对肾性骨病大鼠骨代谢的影响。方法选择24只SD大鼠,分为模型组（CRF组）、高磷饮食组（CRF-HP组）、低磷饮食组（CRF-LP组）、假手术组（Sham组）,每组各6只。5/6肾切除法制备慢性肾衰竭模型。前3组成模3周后,分别接受正常磷（磷0.9%,钙1.2%）、高磷（磷1.2%,钙1.6%）、低磷低钙（磷0.2%,钙0.5%）饮食。Sham组接受正常磷饮食。27周取血测肌酐后,处死各组大鼠,取股骨,固定包埋,Giemsa、VonKossa染色计算骨小梁体积（TBV）、成骨细胞指数（OBI）、破骨细胞指数（OCI）、类骨质体积（OV/TV）,并观察皮质骨形态改变;四环素双标记法检测骨形成率（MAR）。结果 CRF-HP组、CRF-LP组、CRF-模型组、Sham组大鼠分别存活6只、3只、5只、6只。CRF模型组大鼠TBV、OBI、OCI、OV/TV较Sham组大鼠明显增加（14.4±5.2vs.20.2±6.3,P〈0.05;141.0±53.3vs.80.0±24.1,P〈0.05;9.4±3.0vs.4.5±1.3,P〈0.01;1.14±0.02vs.0.21±0.03,P〈0.01）,MAR较Sham组大鼠也有增加（0.8±0.2vs.2.1±0.4,P〈0.01）。CRF-HP组以上改变较模型组更为明显（均P〈0.05）,但皮质骨吸收孔增加。CRF-LP组大鼠TBV、OBI、OCI、MAR较模型组减少,但OV/TV有所增加。结论长期接受高磷饮食的慢性肾衰竭大鼠骨转化率明显增加,松质骨量增加,但皮质骨量减少;长期接受低磷低钙饮食虽然能纠正慢性肾衰竭大鼠骨转化率的升高,但松质骨量减少,类骨质增加。     

青少年肾活检临床病理分析

目的总结青少年患者肾活检病理类型特点及其临床意义。方法回顾性分析我院2000年1月～2011年1月收治的337例因肾脏疾病行经皮肾活检的青少年患者临床病理资料。结果原发性肾小球病占50.13%,最常见的是IgA肾病。继发性肾小球病占36.6%,最常见的是狼疮性肾炎。间质小管肾病占4.24%,遗传及先天性疾病占9.02%。本组资料中急性肾功能不全者39例,占11.57%;慢性肾功能不全患者58例,占17.21%。结论青少年肾活检病理类型多样,应及时行肾穿刺活检以明确诊断。     

尿毒症患者桡动脉盐皮质激素受体表达与血管钙化的关系

目的 探讨尿毒症患者动脉血管壁醛固酮-盐皮质激素受体（Ald-MR）表达情况与血管钙化的关系。 方法 以初次行动静脉内瘘术的60例尿毒症患者为对象。术中取桡动脉远心端0.5 cm,van Kossa染色检测血管钙化程度及评分后,将尿毒症患者分为无钙化、轻中度钙化、重度钙化3组（A、B、C组）。免疫组化法检测桡动脉壁MR、11β-羟基类固醇脱氢酶2（11β-HSD2）、核心结合因子α1（Cbfα1）、骨桥蛋白（OPN）、胶原Ⅰ（ColⅠ）表达,计算其吸光度（A）值。原位杂交法检测血管壁醛固酮合成酶2（CYP11B2）mRNA表达。对照组为同期行脾切除术的8例患者,取脾动脉,检测指标同尿毒症组。测定各组患者血清钙、磷、肌酐、甲状旁腺激素（PTH）等指标,对MR表达与钙化积分、骨相关蛋白表达进行Pearson相关分析。 结果 尿毒症患者动脉血管钙化发生率为31.67%（19/60）。A、B、C组分别为41例、11例、8例。对照组患者无血管钙化。免疫组化结果显示,MR、11β-HSD2在对照组均无明显表达;MR表达在A、B、C组中逐步增加,A值分别为728±84、806±133、1288±223,C组显著高于A组（P < 0.01）;11β-HSD2表达在A、B、C组分别为2098±215、3110±373、1607±300,B组最高,C组显著下降,与B组差异有统计学意义（P < 0.01）。骨相关蛋白OPN、Cbfα1、ColⅠ在对照组动脉壁无明显表达;在A、B、C组表达逐步增加,C组显著高于A组（9405±1701比4563±480,1125±592比553±102,754±1871比1821±241,均P < 0.01）,且3种骨相关蛋白分布位置均与van Kossa染色中钙化物质沉积部位一致。原位杂交结果显示各组患者和对照组动脉血管壁均无CYP11B2 mRNA表达。相关分析结果表明,桡动脉MR表达与血管钙化积分、OPN、Cbfα1、ColⅠ表达呈正相关,相关系数分别为0.469、0.312、0.413、0.379,P值分别< 0.01、<0.05、<0.01、<0.01。 结论 尿毒症患者动脉MR表达上调,并与钙化程度、骨相关蛋白表达上调呈正相关,提示尿毒症患者动脉Ald-MR系统活性增强可能是动脉钙化的重要机制。     

糖尿病肾病患者肾小管上皮细胞NF-κB及炎性介质表达的临床病理意义

目的 观察糖尿病肾病（DN）患者肾小管上皮细胞NF-κB及炎性介质表达的临床病理意义。 方法 选择经肾活检确诊的23例糖尿病肾病患者肾组织为DN组,以免疫组化法检测肾组织NF-κB p50、p65、单核细胞趋化蛋白（MCP）1、骨调素（OPN）等炎性介质及纤连蛋白（FN）、?琢平滑肌肌动蛋白（?琢-SMA）表达;原位杂交法检测NF-κB p65 mRNA表达,并进行半定量评分;选择10例肾癌切除术患者为对照组,取离癌组织大于5 cm处肾皮质,检测指标同DN组。采用Spearman等级相关法分析炎性介质表达与小管间质病理改变、尿N-乙酰-β-氨基葡萄糖苷酶（NAG）、尿蛋白量（24 h）、肾小球滤过率（eGFR）之间的相关性。 结果 组织学检查显示,各期DN组患者多存在明显的肾小管上皮细胞变性、灶状萎缩、间质炎性细胞浸润及纤维化。免疫组化与原位杂交结果显示,对照组患者NF-κB、OPN和MCP-1在肾组织无明显表达,FN主要表达于肾小球,?琢-SMA主要表达于肾血管;DN组患者随着尿白蛋白水平的增加,NF-κB、OPN和MCP-1在肾小管表达显著增加,主要表达于结构相对正常的小管上皮细胞,在炎性细胞大量聚集及明显纤维化处表达较少;同时,肾间质?琢-SMA、FN表达也有明显增加,但主要表达于炎性介质阳性表达的小管周围及炎性细胞浸润与纤维化较明显的肾间质,二者均不表达于肾小管上皮细胞。相关分析显示,DN组患者肾小管NF-κB p65蛋白的表达与NF-κB p50蛋白、p65 mRNA表达呈正相关,r分别为0.792和0.763,均P < 0.01;与肾小管MCP-1、OPN表达呈正相关,r分别为0.825和0.869,均P < 0.01;与间质?琢-SMA、FN表达呈正相关,r分别为0.327和0.432,均P < 0.01;与尿蛋白量（24 h）、eGFR、尿NAG水平均相关,r分别为 0.710、-0.728、0.930,均P < 0.01。 结论 DN患者肾小管NF-κB及多种炎性介质表达明显上调,多分布于结构相对正常的肾小管上皮细胞。NF-κB及炎性介质的表达与蛋白尿、肾功能下降及肾间质纤维化等临床及病理表现密切相关,提示它们可能参与了人类DN的发生和发展。