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1.
天花粉蛋白突变体的构建及其在原核系统中的表达 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:构建天花粉蛋白(TCS)突变体,并将其在原核系统内进行表达及纯化。方法:借助计算机预测TCS可能的抗原决定簇(YFF81-83)并设计出适当的突变引物。以栝楼基因组DNA为模板,利用重组PCR技术扩增TCS突变体全长基因,经BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切后与原核表达载体pRSET-A连接,转化感受态E.coli DH5α,提取质粒进行酶切鉴定及测序。将所获阳性重组质粒转化感受态E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导表达后,对表达产物进行Western blot鉴定。最后用Ni-NTA亲和层析柱对所获突变体蛋白进行纯化。结果:成功构建了TCS突变体(TCSYFF81-83ACS),并获得了突变体蛋白在大肠杆菌内的可溶性高效表达,经Ni-NTA亲和层析柱纯化后,产生出大量均一的TCS突变体蛋白。结论:TCS的定点突变及其在原核系统内的表达,为基因工程方法改造TCS提供了新的途径。 相似文献
2.
目的 研究γ射线照射对单采血小板保存过程中转化生长因子-β1(TGF-β1)含量的影响。方法应用COBE Spectra^TM细胞分离机单采血小板,以27 Gy 的γ射线照射,于标准条件下保存5d,同时设自身对照,间隔取样,采用ELISA方法检测TGF-β1含量。结果对照组单采血小板在保存1d后,TGF-β1含量与保存前比较升高有显著性(P〈0.05),照射组保存3d后,TGF-β1含量与保存前比较差异无显著性(P〉0.05)。保存5d后,TGF-β1与保存前比较升高有显著性(P〈0.05)。在保存中的各时间点,其含量均显著低于对照组(P〈0.05)。结论 27 Gy γ射线照射能抑制单采血小板保存过程中TGF-β1含量的升高,可以有效地预防单采血小板输注后引起的免疫抑制。 相似文献
3.
目的 了解SEN病毒D亚型和H亚型在不同肝炎患者和献血员中的感染情况.方法 采用巢式聚合酶链反应检测献血员及甲肝、乙肝、丙肝和非甲非戊型肝炎患者血清SENV-D、SENV-H亚型DNA.结果 无偿献血员SENV-D感染率为25.9%,SENV-H为24.4%;急性甲肝患者SENV-D感染率为14.5%,SENV-H为32.7%;慢性乙肝患者SENV-D感染率为46.0%,SENV-H为45.2%;丙肝患者SENV-D和SENV-H感染率均为65.0%;非甲非戊型肝炎患者SENV-D感染率为51.2%,SENV-H为43.9%.上述人员SENV-D/H感染率比较,差异均有显著性(P<0.01).结论 乙肝、丙肝和非甲非戊型肝炎患者中SENV-D/H的感染率高于无偿献血员和甲肝患者. 相似文献
4.
目的 探讨γ射线辐照对红细胞抗氧化能力的影响。方法 以剂量为 2 7Gy的γ射线对红细胞进行辐照并于 4℃条件下保存 ,于不同保存时间取样检测红细胞超氧化物歧化酶 (SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH PX)活力及血浆中丙二醛 (MDA)含量并设自身对照。结果 γ射线辐照 1、7、14、2 1d红细胞中SOD及GSH PX活力明显低于对照组 (P <0 .0 5 ) ,血浆中MDA含量随辐照后保存时间逐渐升高 ,与对照组差异显著 (P <0 .0 5 )。结论 红细胞经 2 7Gyγ射线辐照及随保存时间的延长 ,红细胞抗氧化能力下降 ,细胞膜结构和功能受损加大。 相似文献
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6.
目的:研究保存前白细胞过滤对单采血小板保存过程中趋化性细胞因子含量的影响.方法:应用细胞分离机单采血小板,然后经白细胞过滤,并于标准条件下保存5 d,同时设自身对照.间隔取样用ELISA法检测MCP-1,MCP-3,MIP-1α及RANTES含量.结果:对照组在保存1 d后,所有趋化性细胞因子含量明显升高,并与保存前比较有显著差异(P〈0.05),过滤组中趋化性细胞因子含量分别在不同保存时间与保存前比较有显著增高,但其含量要显著低于对照组(P〈0.05).结论:保存前白细胞过滤能有效减少单采血小板保存过程中趋化性细胞因子含量,因此能有效地预防单采血小板输注后的副反应. 相似文献
7.
目的探索无偿献血者血液筛检策略。寻找最小试剂成本的最佳筛检方案。方法采用临床经济学最小成本分析方法。从11个筛检试验不同的排列组合所形成的3991.68万个不同的筛检方案,选出15个方案进行分析.结果采血前用HBBAg金标法筛检的方案,试剂成本最高。分别为83318.00元/1000人和82304.98元/1000人。以抗-HIV两种筛检试验均纳入逐项淘汰的方案,试剂成本最低。分别为58674.15元/1000人和58494。70元/1000人.结论应用最小成本分析法组成的筛检方案。可为最小试剂成本的最佳筛检策略提供依据。 相似文献
8.
目的探讨低剂量γ射线照射外周血对抗氧化功能的影响。方法对10份人全血采用γ射线照射,照射剂量1Gy,分别于照射前及照射后1、2h检测血清还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)和总抗氧化能力(T-AOC)及过氧化氢酶(CAT)活性。结果γ射线照射后1h与照射前比较,血清GSH含量升高(P〈0.01)、MDA含量降低(P〈0.01),而SOD、GSH-Px、T-AOC及CAT活性升高(P〈0.01)。照射后2h与照射后1h比较,GSH含量进一步升高(P〈0.01),MDA含量进一步降低(P〈0.01);除SOD外,GSH-Px、T-AOC及CAT活性进一步升高(P〈0.01)。结论低剂量γ射线辐射可明显提高抗氧化能力,即对抗氧化系统有兴奋作用。 相似文献
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无偿献血者梅毒抗体筛检方法与试剂的价值评价 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:评价无偿献血者梅毒抗体筛检方法与试剂的筛检价值。方法:以卫生部临床检验中心梅毒抗体临床科研血清盘标本40份及随机抽取西安市无偿献血者梅毒抗体阴性血清100份为评价标本。用梅毒甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)法,厦门新创梅毒抗体ELISA1诊断试剂盒(ELISA1)及北京金豪梅毒抗体ELISA诊断试剂盒(ELISA2)对评价标本作盲法筛检,以卫生部临床检验中心梅毒抗体已知阳性和阴性作为金标准。用四格表法评价真实性与可靠性指标,并对二种ELISA试剂盒的Cut-off值的合理性进行评价。结果:TRUST法、ELISA1及ELISA2试剂盒的灵敏度分别为68.2%,95.5%,100.0%,特异度分别为77.8%,94.4%,94.4%,约登指数分别为0.46,0.900.94,重复试验符合率分别为90.0%,100.0%,100.0%,二种ELISA试剂盒的Cut-off值较合理。结论:ELISA试剂盒的灵敏度、特异度及重复试验符合率要远高于TRUST法。尽管TRUST法的灵敏度与特异度较低,在无偿献血者的粗筛快检中可降低血液报废率,因而在无偿献血中的仍有很高价值,如果将ELISA试剂盒的灵敏度与特异度加以提高,将会具有更大的临床应用价值。 相似文献
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三种抗-HCV检测试剂盒对无偿献血者筛检价值评价 总被引:4,自引:0,他引:4
目的:评价3种抗.HCV筛检试剂对无偿献血者的筛检价值。方法:以卫生部临床检验中心抗-HCV临床科研血清盘标本50份为评价标本,分别用快速试剂法,国产ELISA试剂及进口ELISA试剂对评价标本作盲法检测,以卫生部临床检验中心血清盘标本所提供的阴性和阳性结果为金标准,用四格表法计算出评价真实性及可靠性指标,并对ELISA法的cut-off值的合理性进行评价.结果:快速试剂法,国产英科新创ELISA试剂盒与进口傲拓ELISA试剂盒的灵敏度分别为48%,88%,76%,特异度均为100%,准确度分别为74%,94%,88%.约登指数分别为0.48,0.88,0.76.3种试剂盒的重复符合率均为100%.国产英科新创ELISA试剂盒规定的cut-off值是合理的,而进口傲拓ELISA试剂盒规定的cut-off值太高.结论:3种试剂盒的灵敏度与准确度以国产ELISA试剂盒为最好,3种试剂盒的重复性均好,因此使用2种优选的国产ELISA试剂盒对血液进行联合筛检,既可以保证输血的安全性,又可以减低筛检成本. 相似文献