胰腺癌的基因治疗

胰腺癌的基因治疗厉周黄宗海杨继震第一军医大学珠江医院普外科广东省广州市５１０２８２Ｓｕｂｊｅｃｔｈｅａｄｉｎｇｓｐａｎｃｒｅａｔｉｃｎｅｏｐｌａｓｍｓ／ｔｈｅｒａｐｙ；ｇｅｎｅｔｈｅｒａｐｙ；ｉｎｓｕｌｉｎｌｉｋｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ；ｉｎｔ...     

聚酰胺-胺型树枝状高聚合物介导survivin反义寡核苷酸抑制结直肠癌裸鼠皮下移植瘤生长的作用

目的 探讨聚酰胺-胺型树枝状高聚合物(PAMAM)介导survivin反义寡核苷酸(survivin-ASODN)对结直肠癌裸鼠移植瘤的抑制作用.方法 以人结直肠癌细胞SW620裸鼠皮下注射建立结直肠癌裸鼠皮下移植瘤模型.将PAMAM和阳离子脂质体分别与survivin-ASODN混合得到载反义基因转染复合物.透射电镜观察复合物的形态.激光散射粒径分析仪测定粒径,zeta电位分析仪测定复合物的zeta电位,离心法和紫外分光分度仪测定复合物的包封率和体外DNA释放速度.将两种反义基因复合物注射裸鼠移植瘤体内,观察两组移植瘤体积,Western bloting方法检测移植瘤组织中survivin基因的表达.结果 PAMAM-survivin-ASODN复合物的粒径小于脂质体-survivinASODN复合物的粒径(P〈0.01),而zeta电位高于PAMAM-survivin-ASODN复合物zeta电位(P<0.05),基因包封率两组无显著差异.PAMAM对DNA持续释放达14d.但脂质体复合物只持续5 d.PAMAM-survivin-ASODN复合物治疗组裸鼠移植瘤survivin蛋白表达低于脂质体-survivin-ASODN复合物组(P<0.05).PAMAM-survivin-ASODN复合物治疗组移植瘤体积低于脂质体-survivin-ASODN复合物组(P<0.05).结论 PAMAM能将survivin-ASODN高效递送到结直肠癌移植瘤细胞.降低survivin蛋白的表达,抑制移植瘤生长.     

高频焊接仪闭合动脉血管的安全性与可靠性研究

目的:探讨高频焊接仪(HFWD)闭合动脉血管的安全性与可靠性。方法:将6头西藏小型猪均随机分为HFWD组与超声刀组(HS组),全麻后分离裸化颈、股动脉,分别采用HFWD与HS闭合离断血管。比较两组血管闭合后的爆破压、闭合时间、闭合过程中的最高温度及闭合处病理热损伤。结果:不区分血管管径大小时,HFWD组平均爆破压高于HS组(489.64 mm Hg vs.439.88 mm Hg,P0.05),当血管直径≤3 mm时,HFWD组与HS组爆破压无明显差异(593.40 mm Hg vs.572.48 mm Hg,P0.05),对于直径3~5 mm、5~7 mm的血管,HFWD组爆破压均大于HS组(457.02 mm Hg vs.404.32 mm Hg;418.51 mm Hg vs.342.84 mm Hg,均P0.05);无论血管直径大小,HFWD组闭合血管所需时间均少于超声刀(均P0.05)。HFWD组闭合处的平均最高温度低于HS组(65.91℃vs.105.25℃,P0.05);HFWD组闭合处血管壁胶原变性及血管平滑肌损伤程度轻于HS组。结论:HFWD闭合动脉血管是安全可靠的。     

腺病毒介导的CDglyTK基因影响胃癌细胞形态学及生长特性的效应

目的：观察已转染双自杀基因的胃癌细胞和未转染双自杀基因的胃癌细胞在形态学及生长特性方面的差异性。 方法：实验于2005—03／2006—03在南方医科大学肿瘤研究所完成。质粒pAdEasy-KDR-CDglyTK为南方医科大学珠江医院普外科保存。用感染复数为100时，将启动子融合基因腺病毒（Ad-KDR—CDglyTK）体外感染SCG7901细胞株。通过倒置荧光相差显微镜、光镜、透射电镜等技术观察转染基因的胃癌细胞的形态学变化。通过流式细胞仪检测细胞周期的变化．同时用四甲基偶氮唑盐方法进行生长曲线的测定。 结果：①腺病毒介导的KDR启动子驱动的双自杀基因对胃癌细胞体外培养的形态无明显影响。②已转基因的SCG7901细胞和未转基因的SCG7901细胞处于G1期，比率分别为（49．00&;#177;0．58）％，（51．02&;#177;0．91）％（t=1．862，P=1．12），处于S期比率分别为（16．20&;#177;0．36）％，（14．00&;#177;0．99）％（t=2．07，P=0．84），处于G2期比率分别为（34．60&;#177;0．96）％，（34．31&;#177;0.86）％（t=0．223，P=0．831）。（3）已转基因SCG7901细胞和未转基因SCG7901细胞具有类似的生长状态（F=0．042,P=0．838〉0．05）。 结论：已转染KDR启动子融合基因的胃癌细胞和未转染的胃癌细胞在形态及生长特性方面无显著性差异。     

己糖激酶对肿瘤作用的研究进展

肿瘤细胞的特征性代谢性方式是有氧性糖酵解,即Warburg效应。己糖激酶作为糖酵解的关键酶,在肿瘤细胞中广泛高表达,被认为与肿瘤代谢、凋亡和自噬紧密相关。本文通过对己糖激酶及其上下游的研究,可以找到潜在的能适用于多种肿瘤的基因靶向治疗方法。     

KDR启动子驱动双自杀基因诱导胃癌细胞凋亡的体内实验研究

目的 探讨KDR启动子驱动双自杀基因体系对胃癌细胞凋亡和增值的影响。方法建立小鼠SCG7901胃癌细胞膜型，随机分为4组。治疗结束后，称取瘤重并计算抑瘤率。用电镜和TUNEL法检测双自杀基因体系作用下SCG7901胃癌细胞的凋亡。结果实验组（B组）肿瘤体积逐渐缩小，而对照组（A、C和D组）肿瘤体积逐渐增大。透射电镜下可见实验组出现凋亡细胞，TUNEL法显示实验组肿瘤细胞凋亡率显著高于对照组，P〈0．01。结论 KDR启动子驱动双自杀基因体系对裸鼠皮下移植瘤有明显的生长抑制作用，其机制可能与双自杀基因体系诱导肿瘤细胞凋亡有关。     

含血管内皮生长因子启动子驱动CD自杀基因重组腺病毒的制备及其体外杀伤作用观察

目的 应用AdEasier-1系统高效制备含血管内皮生长因子(VEGF)启动子驱动CD自杀基因重组腺病毒并观察其体外肿瘤杀伤作用。方法 以JM109细菌基因组为模板,PCR扩增出含Hind Ⅲ/Bam HⅠ酶切位点的CD基因,亚克隆到pREP8,继而用Hind Ⅲ/XbaⅠ切出含pA加尾信号的CD基因,插入到预先构建的含VEGF启动子的转移质粒pAdtrack-VEGFP构建pAdtrack-VEGFP-CD。经PmeⅠ线性化后转化AdEasier-1细菌,用25 μg/ml卡那霉素筛选阳性克隆,先后进行琼脂糖电泳和PacⅠ酶切鉴定,筛选出正确重组腺病毒质粒pAdEasy-VEGFP-CD。经293细胞包装、扩增获得重组腺病毒Ad-VEGFP-CD,行PCR鉴定。通过测定细胞克隆形成率和细胞存活率观察重组腺病毒对体外培养的LoVo细胞的细胞毒作用。结果 构建重组腺病毒质粒的成功率为70%(7/10)。包装扩增后重组腺病毒的滴度为4.8×10¹² CFU/ml,PCR扩增结果与预期相符。在前药5-氟胞嘧啶存在下,重组腺病毒对LoVo具有明显杀伤作用,细胞克隆形成率和细胞存活率都明显下降。结论 应用AdEasier-1系统可以成功制备含VEGF启动子驱动CD自杀基因的重组腺病毒,该重组体具有明显的肿瘤杀伤作用。     

肝吸虫病合并胆管癌29例报告

目的 探讨肝吸虫病与胆管癌之间的病理机制及其临床诊治经验。方法 回顾性分析肝吸虫病合并胆管癌病人29例。结果男性21例，女性8例，平均年龄62．5岁，高分化腺癌13例(44．8％)，低分化腺癌16例(55．2％)。根治性肿瘤切除术21例(72．4％)，姑息性内引流术5例，剖腹探查活检术3例；生存10年者2例，5年者3例，3年者6例，1年者13例，6个月者4例，3个月者1例。结论 (1)肝吸虫感染、肝吸虫卵的沉积是诱发胆管上皮细胞增生、癌变的重要因素；(2)本病诊断有赖于病理，术中病理活检的广泛应用是提高其诊断符合率的有效措施；(3)治疗仍是以手术为主的综合治疗，能根治性切除则预后佳，不能根治者解决胆道梗阻也可延长生命。