2016年三地区藏族、蒙古族与壮族10～12岁儿童肠道菌群状况

目的 研究三个地区藏族、蒙古族和壮族儿童的肠道菌群组成结构。方法 于2016年9—10月,采用随机等距抽样方法从西藏巴宜县藏族、内蒙古扎旗蒙古族和广西省南宁上林县壮族3个民族中各选取10～12岁儿童100名,采集其粪便样本进行高通量测序和生物信息学分析,比较3个民族儿童肠道菌群的结构差异。结果 多样性分析结果表明,调查地区的三个民族儿童肠道菌群的多样性和丰富度在两两比较时存在差异。藏族儿童厚壁菌门(Firmicutes, 54.01%)和拟杆菌门(Bacteroidetes, 31.13%)细菌数量占优,在属水平上,普氏菌属(Prevotella,15.72%)和粪杆菌属(Faecalibacterium,15.46%)细菌数量占优;蒙古族儿童厚壁菌门(Firmicutes, 54.89%)、拟杆菌门(Bacteroidetes, 17.85%)和变形菌门(Proteobacteria, 15.99%)细菌数量占优,粪杆菌属(Faecalibacterium,20.84%)和埃希氏杆菌属(Escherichia,17.52%)细菌数量占优;壮族儿童厚壁菌门(Firmicutes, 50...     

转基因作物标记蛋白潮霉素磷酸转移酶活性的测定方法

潮霉素磷酸转移酶 (HPT)是转基因作物中重要的标记蛋白 ,其活性的测定对含有该标记基因的转基因作物的植株构建、基因沉默、标记基因去除及安全性分析等具有重要的作用。本文综述了潮霉素磷酸转移酶活性测定的几种方法 ,包括放射化学法、抑菌生长法及酶耦联法 ,其中放射化学法用于检测组织粗提蛋白中的HPT活性 ,而其他两种方法适用于纯化过的HPT蛋白活性的检测     

Xa21转基因大米对大鼠致畸作用的实验研究

目的　观察Xa2 1转基因大米对大鼠胚胎生长、发育的影响。方法　将初断乳Wistar大鼠按雌雄分别随机分为 4组 :转基因大米组、非转基因大米组、AIN93G对照组和敌枯双阳性对照组。单笼喂养 ,饲相应鼠料 ,喂满 90天 ,雌雄合笼。观察母鼠和胎鼠的生长发育情况。结果　转基因大米组孕鼠增重、活胎体重、身长、尾长均显著高于阳性对照组 ,而死胎数、吸收胎数、畸形率 (外观、内脏、骨骼 )均显著低于阳性对照组。转基因大米组与非转基因大米组、AIN93G对照组相比 ,所有观察指标均无统计学差异。结论　转Xa2 1基因大米与非转基因大米相比 ,对大鼠受孕率、胚胎生长发育无显著性差异。     

转基因大米的免疫毒理学评价

目的　评价转基因大米和非转基因大米对小鼠免疫功能的异同。方法　以转豇豆胰蛋白酶抑制剂 (cowpeatrypsininhibitor ,CpTI)基因大米和母系非转基因大米喂养BALB C小鼠 30天 (均配成AIN 93G的全价营养饲料 ,并且含有最大量的转基因大米或非转基因大米 ) ,比较各组小鼠的各项免疫毒理指标 :体重、脏器指数、血常规、淋巴细胞分类、血清抗体滴度、空斑试验 (PFC)、迟发型皮肤过敏反应 (DTH)、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验。结果　发现转基因大米和非转基因大米喂养的小鼠各项免疫毒理指标无差异。结论　转基因大米对小鼠的免疫功能的影响与非转基因大米基本相同 ,转基因大米与非转基因大米在免疫毒理学方面的评价具有“实质等同性”。     

转豇豆胰蛋白酶抑制剂大米的致畸作用研究

目的　用表达杀虫蛋白CpTI(豇豆胰蛋白酶抑制剂 )的大米喂养Wistar大鼠 ,研究其是否具有致畸作用。方法　将断乳的Wistar大鼠随机分为 4组 ,转基因大米组、非转基因大米组、阴性对照组和阳性对照组 ,敌枯双为阳性对照物。转基因大米组含 78 3%转基因大米 ,非转基因大米组含 74 7%与转基因大米同品系的非转基因大米 ,两个对照组的饲料为AIN93G ,三种饲料的宏量及微量营养素的含量相同。大鼠性成熟后 ,进行传统的致畸实验 ,观察母鼠及胎鼠的情况。结果　转基因大米组的孕鼠增重、胎鼠体重、身长和尾长显著高阳性对照组 ,畸形率 (包括外观畸形、骨骼畸形和内脏畸形 )显著低于阳性对照组 (P <0 0 1) ,转基因大米组、非转基因大米组及阴性对照组间的所有指标均无显著性差异 (P >0 0 5 )。结论　此种转CpTI基因的大米对大鼠无母体毒性、胚胎毒性和致畸作用。     

豇豆胰蛋白酶抑制剂的大量纯化和急性毒性研究

目的用大肠杆菌大量表达豇豆胰蛋白酶抑制剂蛋白(CpTI)并检测其急性毒性。方法将重组表达载体pET41-CpTI转化大肠杆菌,用IPTG诱导目的蛋白表达,通过疏水层析和阴离子交换层析等色谱技术纯化大肠杆菌表达的CpTI蛋白。取60只ICR小鼠,随机分成6组,每组10只,雌雄各半,经口灌胃法分别一次性给予10.0、4.64、2.15和1.00g/kg BW的重组CpTI蛋白,并设5.00g/kg的BSA对照蛋白组和水空白对照组,连续观察14d。结果所有的小鼠在观察期间体重、脏器比重、进食量等均未出现显著变化,在15d大体解剖也未发现明显的病理变化。小鼠对CpTI蛋白的最大耐受剂量(MTD)应大于10.0g/kg BW。结论在该试验条件下,经口灌胃法给予ICR小鼠CpTI蛋白,未发现其毒性。     

基于超高效液相色谱-飞行时间质谱技术对婴幼儿缺铁性贫血的血清代谢组学研究

目的 探讨婴幼儿缺铁性贫血与非缺铁性贫血血清的差异代谢物,探索潜在的生物标志物。方法 基于Acquity UPLC BEH C₁₈色谱柱(100 mm×2.1 mm, 1.8μm),采用超高效液相色谱-飞行时间质谱技术对30例缺铁性贫血6～11月龄新生儿和30例非缺铁性贫血6～11月龄新生儿的血清进行非靶向代谢组学分析,运用主成分分析和正交偏最小二乘判别法分析两组血清的代谢物差异,根据正交偏最小二乘判别法变量重要度值(variable importance projection, VIP)>1筛选差异代谢物,使用KEGG数据库对差异物进行相关代谢通路分析。结果 缺铁性贫血组与非缺铁性贫血组血清代谢谱具有差异,44个潜在生物标志物主要为脂质,结合通路分析,差异代谢物相关的代谢途径包括甘油磷脂代谢与鞘脂代谢。结论 婴幼儿非缺铁性贫血与缺铁性贫血组在脂质代谢物存在差异,提示缺铁性贫血的发生和进展与脂质的代谢有关。     

转Cry1Ab和epsps基因抗虫耐除草剂玉米对三代繁殖大鼠子代的神经行为与认知能力的影响

目的观察转Cry1Ab和epsps基因抗虫耐除草剂玉米饲喂大鼠3代后,对F3代大鼠神经行为和认知能力的影响。方法 180只SPF级断乳SD大鼠随机分为3组:AIN饲料对照组、亲本玉米对照组、转基因玉米组,经三代繁殖后产生F3代,在每组中随机选择20窝检查早期神经发育指标,断乳后每窝随机选1只,共20只,雌雄各半,用于成年期神经行为和认知能力评价以及脑部病理检测。结果三组F3仔鼠早期神经发育指标、Morris水迷宫试验及脑重、脑体比结果均未发现显著性差异,脑大体解剖及组织病理学检查也未发现异常。但在Morris水迷宫空间探索试验中,亲本玉米对照组雌鼠在目标象限的游泳时间和距离及相应百分比显著少于转基因玉米组和AIN饲料对照组(P0.05)。结论在该试验条件下,转Cry1Ab和epsps基因抗虫耐除草剂玉米饲喂大鼠3代后未对F3子代的神经行为和认知能力造成不良影响。     

转sck基因水稻中CpTI蛋白的细胞内定位

目的转sck基因水稻中CpTI蛋白细胞内定位。方法运用免疫组织化学方法,应用免疫电镜技术,观察在转sck基因水稻根部细胞、叶片细胞中CpTI蛋白的定位情况。结果在转sck基因水稻根尖部细胞的内质网中和内质网附近有胶体金颗粒大量存在,细胞的质体、叶绿体、细胞质、细胞核中也散在一些胶体金颗粒,在对照水稻的根部内质网和其他部位未发现胶体金颗粒存在。水稻叶片细胞由于有叶泡的存在,内质网不明显,但是细胞核、细胞质和质体内也发现胶体金颗粒,在非转基因水稻的叶片中未发现胶体金颗粒。结论转sck基因水稻中的CpTI蛋白在内质网中大量存在,在细胞的质体、叶绿体、细胞质、细胞核中也存在少量CpTI蛋白。     

转基因作物的安全性评价策略、现状及发展

基因重组技术赋予农业生产以巨大的活力 ,但转基因作物的安全性问题却不容忽视。有关国际组织及政府已达成共识 :在“实质等同性”原则的基础上 ,应对转基因作物进行详尽周密的安全性评价工作。有关策略包括实质等同性分析、毒性实验、致敏性研究、营养学评价等 ,随着新技术的发展 ,基因组学、蛋白质组学、代谢组学等新技术也将用于对非目标效应的监测 ,欧盟已在酝酿上市后监测的一些措施。总之 ,转基因作物的安全性评价策略是十分严格的 ,且还在逐步完善。