改良式保留灌肠在治疗高龄便秘患者中的应用

<正>老年便秘患者采用传统灌肠方法治疗时,常因肛管的材质较硬患者难以耐受,出现腹胀、便意、灌肠液外溢,不能将灌肠液保留一定的时间,达不到充分软化大便的效果,最终导致灌肠效果不佳[1]。针对灌肠法存在的缺点,我们进行了一定的改进,采用双腔橡胶导尿管代替了肛管,模仿膀胱冲洗的模式缓     

糖尿病足25例的护理

目的探讨糖尿病足部溃疡的护理方法。方法收集糖尿病足患者25例的护理资料,分析临床观察方法,足部护理方法,饮食方法,创面护理方法。结果 11例低危未破溃者无一例破溃;13例中危破溃者,11例愈合,2例好转,1例坏疽者治疗无效截肢。结论有效治疗,严格护理措施,出院宣教,是糖尿病足部溃疡患者康复的有效方法。     

刚地弓形虫ROP10-ROP18真核表达载体的构建与鉴定

目的构建刚地弓形虫棒状体蛋白10(ROP10)、棒状体蛋白18(ROP18)复合基因真核表达载体pVAXDROP10-ROP18,并在HeLa细胞内表达目的蛋白。方法设计ROP10、ROP18基因特异引物,采用RT-PCR扩增ROP10、ROP18基因并测序,将ROP10和ROP18基因分别定向插入双启动子真核表达载体pVAXD的多克隆位点中,构建单价质粒pVAXD-ROP10和pVAXD-ROP18,然后将ROP18基因插入pVAXD-ROP10中构建双启动子真核表达载体pVAXD-ROP10-ROP18。经PCR和双酶切验证后将pVAXD-ROP10-ROP18转染至HeLa细胞内,提取细胞总RNA并逆转录为cDNA,以此为模板分别进行ROP10基因和ROP18基因的RT-PCR鉴定;采用间接免疫荧光试验(IFA)检验ROP10和ROP18蛋白表达情况。结果成功克隆ROP10、ROP18基因片段并构建了重组质粒pVAXDROP10-ROP18,测序、双酶切和PCR验证重组质粒构建正确。分别将3种重组质粒转染至HeLa细胞后经RT-PCR鉴定,pVAXD-ROP10-ROP18组可同时扩增出1 761bp(ROP10基因)和1 665bp(ROP18基因)2个片段,而pVAXDROP10组和pVAXD-ROP18组分别扩增出1 761bp和1 665bp的目的片段;IFA显示pVAXD-ROP10组和pVAXDROP18组均有绿色荧光,即分别表达ROP10和ROP18蛋白。结论成功构建重组质粒pVAXD-ROP10-ROP18、pVAXD-ROP10和pVAXD-ROP18质粒可在真核细胞中分别表达ROP10和ROP18两种蛋白。     

超高效液相色谱-质谱/质谱联用法快速测定苦碟子注射液中两种倍半萜内酯类成分的含量

目的：建立快速测定苦碟子注射液中两种倍半萜内酯类成分Ixerin Z、11,13α-dihydroixerin Z含量的超高效液相色谱-质谱/质谱联用方法（UPLC-ESI-MS/MS）。方法：采用Waters ACQUITY BEH C₁₈ 色谱柱（2.1 mm×50 mm,1.7 μm）,流动相为乙腈-水系统梯度洗脱,流速为0.4 mL?min^-1,柱温为40℃;在ESI负离子模式下,采用多反应离子监测（MRM）扫描方式进行检测。结果：苦碟子注射液中两种倍半萜内酯类成分在2 min内完全分离,Ixerin Z的线性范围在5.70-182.50 ng?mL^-1,11,13α–dihydroixerin Z的线性范围在4.60-131.25 ng?mL^-1,相关系数r 均大于0.999 0,加样回收率（n=6）分别为98.18%、97.52%,RSD 值均小于1.5%。应用所建立的方法对市售苦碟子注射液中两种倍半萜内酯类成分Ixerin Z、11,13α-dihydroixerin Z进行含量测定,两个厂家6个批次苦碟子注射液中Ixerin Z、11,13α-dihydroixerin Z的含量有一定的差异。结论：所建立的方法快速、准确、灵敏,可用于苦碟子注射液中两种倍半萜内酯类成分的含量测定。     

刚地弓形虫ROP10-ROP18真核表达载体的构建与鉴定北大核心CSCD

目的构建刚地弓形虫棒状体蛋白10(ROP10)、棒状体蛋白18(ROP18)复合基因真核表达载体pVAXDROP10-ROP18,并在HeLa细胞内表达目的蛋白。方法设计ROP10、ROP18基因特异引物,采用RT-PCR扩增ROP10、ROP18基因并测序,将ROP10和ROP18基因分别定向插入双启动子真核表达载体pVAXD的多克隆位点中,构建单价质粒pVAXD-ROP10和pVAXD-ROP18,然后将ROP18基因插入pVAXD-ROP10中构建双启动子真核表达载体pVAXD-ROP10-ROP18。经PCR和双酶切验证后将pVAXD-ROP10-ROP18转染至HeLa细胞内,提取细胞总RNA并逆转录为cDNA,以此为模板分别进行ROP10基因和ROP18基因的RT-PCR鉴定;采用间接免疫荧光试验(IFA)检验ROP10和ROP18蛋白表达情况。结果成功克隆ROP10、ROP18基因片段并构建了重组质粒pVAXDROP10-ROP18,测序、双酶切和PCR验证重组质粒构建正确。分别将3种重组质粒转染至HeLa细胞后经RT-PCR鉴定,pVAXD-ROP10-ROP18组可同时扩增出1 761bp(ROP10基因)和1 665bp(ROP18基因)2个片段,而pVAXDROP10组和pVAXD-ROP18组分别扩增出1 761bp和1 665bp的目的片段;IFA显示pVAXD-ROP10组和pVAXDROP18组均有绿色荧光,即分别表达ROP10和ROP18蛋白。结论成功构建重组质粒pVAXD-ROP10-ROP18、pVAXD-ROP10和pVAXD-ROP18质粒可在真核细胞中分别表达ROP10和ROP18两种蛋白。     

FⅦ活化蛋白酶基因的Marburg Ⅰ型多态性与脑梗死发病的相关性

目的：探讨FⅦ活化蛋白酶（Factor Ⅶ-activating protease,FSAP）基因的Marburg Ⅰ型多态性与脑梗死发病之间的相关性,并分析FSAP的Marburg I型多态性是否为脑梗死的危险因子之一。方法：应用单链构象多态性PCR技术（SSCP-PCR）,对159例临床确诊的脑梗死患者及179例年龄、性别相匹配的无血栓性疾病病史志愿者的FSAP基因进行多态性分析。结果：FSAP基因表型在病例组及对照组中均为野生型纯合子,未检测到Marburg Ⅰ型突变型。发现1例FSAP基因点突变（C1815T）。结论：FSAP基因的Marburg Ⅰ型多态性与脑梗死发病可能无相关性。