人源抗-HBsAg-干扰素融合蛋白在CHO细胞中的表达

目的 尝试用抗体工程技术研制乙型肝炎导向干扰素。方法 利用PCR技术进行体外重组,将α－2b干扰素（IFN－α2b）基因分别与抗－HBsAg人源抗体的轻链及重链Fd基因融合,IFN－α2b基因位于融合基因的3′端,为避免干扰素结构域与抗体结构域在空间上互相影响,在二者之间引入一条15个氨基酸的柔性短肽。分别构建上述融合肽链的CHO表达质粒（轻链－IFN表达质粒pLIC以 DNA3.1( )为载体,重链Fd-IFN表达质粒pFID以pCdhfr1为载体）,表达质粒以下述三种组合转染CHO（dhfr-）细胞：Ⅰ,pLIC pHFD;Ⅱ,pLIC pFID;Ⅲ,pLFC pFID。其中pLFC为抗－HBsAg轻链全长表达质粒,pHFD为抗－HBsAg重链全长表达质粒。结果 Ⅰ组和Ⅱ组上清液具有干扰素活性,但仅Ⅰ组具有HBsAg结合活性。结论 用基因工程的手段成功地在CHO细胞中表达了具有HBsAg结合能力的融合干扰素分子。     

可溶性抗HAV抗体Fab片段的原核表达

0　引言　甲型肝炎病毒 (HAV)是危害人类健康的致病原之一 ,目前已有多种用于接触前预防的甲肝疫苗 ;但对于接触后预防或短期到 HAV高流行区的旅游者的预防 ,则多采用免疫球蛋白作被动免疫 .在接触后 (14d内 )和潜伏期早期 ,注射免疫球蛋白预防甲肝的有效率达 85 %左右 .血源性免疫球蛋白虽然效价高 ,应用效果好 ,但可能被血源病原体污染 .因此基因工程人源抗体有望成为接触后预防的首选制剂 .我们从人源噬菌体抗体组合文库中筛选到一株甲肝特异性抗体 [1 ] ,在此基础上构建了可溶性表达载体 ,并获得可溶性表达 ,为该抗体的进一步研究打…     

人源抗-HAV Fab真核表达载体的构建及表达

目的 构建人源抗－ＨＡＶＦａｂ真核表达载体并进行表达。方法 采用ＤＮＡ重组技术将抗体重轻链基因与信号肽基因连接,并分别插入真核表达载体ｐＣｄｈｆｒｌ、ｐＣＤＮＡ３．１;以脂质体介导法转染ＣＨＯ细胞,经Ｇ４１８筛选细胞,ＥＬＩＳａｂ基因的表达。结果 成功地构建了Ｆａｂ表达载体。转染细胞后,经ＥＬＩＳＡ检测,细胞增养上清中有抗原结合活性的Ｆａｂ片段。结论Ｆａｂ真核表达载体的构建及其在ＣＨＯ细胞中的表达     

浅谈“医用物理新技术”讲座在教学中的积极作用

浅谈“医用物理新技术”讲座在教学中的积极作用刘国奇（安徽滁州卫校安徽２３９０００）近年来，配合卫校物理教学，在机动学时中适当地给学生作一些“医用物理新技术”讲座。使学生在掌握知识主干的基础上把知识面变得更宽，了解了医用物理新技术的动态，弥补了教学中知...     

用讲座形式补充新内容

用讲座形式补充新内容安徽滁州卫校刘国奇近年来，在双休日中适当地给学生作一些“医用物理新技术”讲座，使学生的知识面增宽，了解医用新技术动态，弥补教学中知识的局限性，使其学生知道物理学在医学中的重要性。中等卫校物理教材与医学结合地不够，知识信息量较少。讲...     

人源抗-HAV全分子抗体在CHO细胞中的表达

目的 :构建人源抗_HAV全分子抗体的CHO细胞表达体系。方法 :将抗_HAV抗体轻链全分子 (信号肽与VL_CL)基因克隆至表达载体pCI_neo中 ;将重链信号肽、重链 (γ)VH_CH1 和Fc基因进行重组形成重链全分子基因 ,再将其克隆到真核表达载体pCdhfr1中。将轻、重链全分子表达载体共转染CHO dhfr_细胞 ,用G_4 18和甲氨蝶呤(MTX)筛选细胞克隆 ,ELISA法检测细胞培养上清中的抗_HAV活性 ,增加MTX浓度进行加压筛选。用蛋白L亲和层析柱从培养上清中纯化重组抗体。结果 :构建的真核表达载体可实现抗_HAV全分子抗体在CHO细胞中的分泌表达 ,纯化的重组抗体在还原SDS_PAGE中表现为相对分子质量约 2 5 0 0 0、5 0 0 0 0两条带 ;Western印迹表明 ,重组抗体全分子和重链分子均可和羊抗人Fc抗体发生特异性免疫反应。结论 :抗_HAV全分子抗体在CHO细胞中表达 ,为基因工程生产具有完整功能的全分子抗体奠定了基础     

《食品与机械》广告的经营管理

对《食品与机械》杂志的广告来源组成、时间分布、黑白版比例及版面位置对客户的影响作了详细分析,提出了加强广告经营管理的具体措施。     

携带共扩增基因的CHO细胞表达载体的构建

构建携带共扩增基因的ＣＨＯ细胞表达载体。方法以质粒载体ｐＣＩ－ｎｅｏ为骨架,应用小鼠二氢叶酸还原酶基因的ｃＤＮＡ,构建了哺乳动物细胞表达载体ｐＣｄｈｆｒ１。把绿色荧光蛋白基因亚克隆到ｐＣｄｈｆｒ１的多克隆位点,构建了表达质粒ｐＦＰ。     

DNA改组--定向进化的技术革命

ＤＮＡ改组（ＤＮＡ ｓｈｕｆｆｌｉｎｇ）是９０年代中期发展起来的一种新技术,该文概述了有关ＤＮＡ改组的基本原理和方法,并跟踪了当今该领域的最新研究成果和发展动态。     

一起废弃矿井积水污染山泉水的调查报告

一起废弃矿井积水污染山泉水的调查报告高南筠刘国奇１９９５年４月２６日，《赣江大众报》刊登了一则关于江西高安市太阳圩乡一古山泉水突然变浊变色的“奇异现象”待有关人士解释的报道。我站受江西省卫生防疫站委托，及时派员进行实地调查。现象发生地点为太阳圩乡留余...