STAT3与绒癌细胞侵袭转移关系的探讨

目的初步探讨信号转导与转录活化因子3（Stat3）与绒癌细胞侵袭转移能力的关系。方法体外培养人绒毛膜癌细胞系JAR（低侵袭）,JEG-3（高侵袭）及收集人正常早孕绒毛组织;运用Transwell体外侵袭实验检测并比较JAR和JEG-3细胞的侵袭转移潜能;采用Western—blot检测JAR、JEG-3细胞以及人正常早孕绒毛组织star3及其活性形式p-star3蛋白的表达情况;同时用免疫组织细胞化学检测JAR和JEG-3细胞star3及P—stat3蛋白的表达情况。结果在人绒毛膜癌细胞中检测到star3,P-stat3的高表达;JEG-3细胞侵袭至基质胶膜背面的数量较JAR细胞明显增多（P〈0．05）;stat3及p-stat3蛋白在绒癌细胞的表达强于正常绒毛组织（P〈0．01）,并且JEG-3细胞较JAR细胞显著增强（P〈0．05）。结论stat3及p-stat3在绒癌细胞中较正常绒毛组织高表达,且在JEG-3细胞的表达高于JAR细胞。     

人胃癌细胞MKN-28母亚两系转移相关基因的筛选

目的采用基因芯片技术比较筛选前后的人胃癌细胞母系MKN-28和亚系MKN-28S之间的基因表达谱,利用生物信息学方法筛选出与胃癌侵袭和转移相关的差异基因。方法用肿瘤转移基因芯片筛选出人胃癌细胞MKN-28母亚两系的转移相关基因,对部分有差异表达的基因用RT-PCR和Western blot进行分析鉴定。结果用肿瘤转移基因芯片筛选出两系的差异表达基因共20个,其中上调基因13个,下调基因7个。选择其中有代表意义的2个基因利用RT-PCR和Western blot进行验证,证实所选基因在筛选前后瘤细胞中均有差异表达,与基因芯片的表达情况一致,说明基因芯片结果可信度较高。结论基因芯片技术是筛选胃癌转移相关基因的有效方法;多基因参与了胃癌的侵袭和转移的过程,包括一些基因如Flt-4、SRC等基因和其它相关基因的改变。     

ADFMCHR激活PPAR γ抑制人肝癌SMMC-7721细胞生长

目的:研究5-烯丙基-7-二氟亚甲基白杨素(ADFMChR)激活过氧化物酶活化因子受体γ(PPARγ)抑制体外培养人肝癌SMMC-7721细胞增殖作用。方法:体外培养人肝癌SMMC-7721细胞。台盼蓝拒染法检测细胞生长;平皿克隆形成法检测细胞锚定依赖性生长;软琼脂克隆形成法检测细胞集落形成能力。结果:细胞计数结果显示,ADFMChR延长SMMC-7721细胞倍增时间,抑制SMMC-7721细胞生长,呈剂量依赖性。但是对预先用PPARγ阻断剂GW 9662孵育30分钟的SMMC-7721细胞,ADFMChR的生长抑制作用明显降低;平皿克隆、软琼脂克隆形成法结果显示,ADFMChR抑制SMMC-7721细胞的锚定依赖性生长能力和锚定非依赖性生长能力,而GW 9662可以降低ADFMChR对SMMC-7721细胞的增值抑制作用。结论:ADFMChR具有抑制人肝癌SMMC-7721细胞生长作用,其机制与激活PPARγ有关。     

人胃癌高低侵袭转移潜能细胞系对化疗药物敏感性的比较研究

目的探讨肿瘤细胞侵袭转移能力的改变对肿瘤细胞化疗敏感性的影响。方法Westem blotting法比较筛选出的人胃癌细胞MKN-28S（亚系）与MKN-28（母系）中E-Cadherin、MMP-2蛋白表达；transwell体外侵袭实验比较两系侵袭潜能。采用MTT法比较两系对阿霉素（ADM）、丝裂霉素（MMC）、5-氟尿嘧啶（5-Fu）、紫杉醇（PTX）4种化疗药物的敏感性。结果筛选出亚系的E-Cadherin蛋白表达与母系相比显著减弱、而MMP-2蛋白表达则显著增强；显微镜下细胞计数示亚系侵袭至基质胶膜背面的数量较母系明显增多（P〈0．05）；MTr示两系对5-Fu、ADM、MMC的敏感性差异有显著性（P〈0．05），而两系对PTX的敏感性差异无显著性（P〉0．05）。结论肿瘤细胞侵袭转移能力的改变可以影响肿瘤细胞对化疗药物的敏感性，同一遗传背景下的高侵袭转移亚系较母系耐药性更强。     

人类胃癌细胞高侵袭亚系的筛选及其生物学特性研究

目的采用Transwell小室筛选胃癌细胞高侵袭亚系并研究其生物学特性。方法利用Transwell小室筛选高侵袭力胃癌细胞亚系,通过HE染色、Western blotting、Transwell小室模型、免疫组织化学法及生长曲线研究亚系的生物学特性。结果利用Transwell小室反复筛选10次,从MKN-28细胞中筛选出高侵袭力胃癌细胞亚系MKN-28S10。母亚两系细胞形态上无明显差异,但亚系中E—cadherin和TIMP-1蛋白表达同母系相比显著降低（P〈0．05）,显微镜下细胞计数示亚系迁移至膜背面的数量（100．25±0．50／视野）较母系（61．75±2．06／视野）明显增多（P〈0．05）,细胞运动能力明显增强;免疫组织化学结果显示,亚系中NM23-H1的表达明显低于母系（P〈0．05）;亚系体外生长速度快于母系。结论MKN-28S10细胞较MKN-28细胞具有更高侵袭力和更强增生能力。     

高侵袭力人胃癌细胞亚系MKN-28s的建立

目的以穿透人工基底膜的能力大小为依据筛选具有体外高侵袭能力的胃癌细胞亚系。方法用体外培养法收集扩增能侵袭穿透人工基底膜的胃癌细胞亚系;比较母亚两系的侵袭能力;流式细胞术检测母亚两系细胞周期;免疫组织化学SP法观察母亚两系细胞Flt-4蛋白表达情况。结果从母系MKN-28中成功筛选出高侵袭力胃癌细胞亚系MKN-28S;显微镜下细胞计数示亚系侵袭至膜背面的数量较母系明显增多（P〈0.05）,细胞侵袭力增强;亚系中Flt-4蛋白表达同母系相比显著增高;亚系增殖指数（PI）高于母系。结论MKN-28S细胞较MKN-28细胞具有更强体外侵袭力和增殖能力。     

乳腺癌组织学分级与ER、PR、CerbB-2、Ki-67表达的关系

目的探讨乳腺癌组织学分级与雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）、人表皮生长因子受体-2（CerbB-2）、Ki-67表达的相关性。方法用免疫组织化学法测定169例乳腺癌组织中ER、PR、CerbB-2、Ki-67的表达;Bloom-Richardson系统Nottingham改良方案测定组织学分级。结果169例患者ER、PR、CerbB-2和Ki-67表达的阳性率分别为56.21%、63.91%、54.44%和75.15%;Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级乳腺癌组织中ER、PR的阳性表达率间差异无显著性意义（P〉0.05）;随着组织学分级的递增CerbB-2、Ki-67的阳性表达率随之增加（P〈0.05）;ER的表达与CerbB-2、Ki-67的表达间有相关关系（P〈0.05）。结论乳腺癌组织中ER、PR的表达不随组织学分级的增加而增加;CerbB-2、Ki-67的表达随组织学分级的增加而增加;ER的表达与CerbB-2呈负相关,而与Ki-67呈正相关。     

探讨乳腺自动全容积成像在BI-RADS 3~5类肿物诊断中的价值

目的:探讨乳腺自动容积成像在乳腺影像报告和数据系统(BI-RADS分类)中3~5类肿物诊断中的价值。方法:将112例BI-RADS分类3~5类的乳腺肿物患者,根据检查者自愿原则分为对照组与研究组,每组56例。对照组使用西门子OXANA2型常规超声诊断,研究组使用常规超声联合乳腺自动全容积扫查系统(ABVS)检查,再结合BI-RADS分类标准进行分析,比较两组间诊断的准确率。结果:研究组诊断准确率为86.43%、误诊率5.88%、漏诊率7.69%、敏感性92.31%、特异性94.12%;其中,研究组误诊率、漏诊率低于对照组,研究组敏感性、特异性及准确性均高于对照组。经两组间比较,研究组诊断率明显高于对照组。结论:常规超声联合ABVS对BI-RADS分类中3~5类肿物诊断的准确率显著提高,具有良好的临床应用价值。     

ABVS观察乳腺癌新辅助化疗肿瘤体积变化与HER2表达的相关性

目的通过乳腺自动全容积扫查系统(ABVS)在乳腺癌新辅助化疗(NACT)期间观察肿瘤体积变化,探讨其与乳腺癌原癌基因人类表皮生长因子受体2基因(HER2)表达的相关性。方法使用ABVS分析109例乳腺癌患者NACT期间各个化疗周期后肿瘤体积的变化,追踪病理及免疫组化结果,采用t检验进行单因素分析,再进行Logistic回归分析筛选独立的预测指标,并建立回归方程;使用受试者工作特征(ROC)曲线评价回归方程预测HER2表达情况的价值。结果与HER2表达有显著相关性的参数包含:NACT第二周期后肿瘤体积(V2)、NACT第三周期后肿瘤体积(V3)及术前肿瘤体积(V4)(P均0.05),但进入Logistic回归方程的变量为V2及V4;由回归方程产生的预测概率PnewROC曲线下面积为0.875,预测价值良好。结论 ABVS观察肿瘤体积变化对评估乳腺癌患者HER2表达有良好的预测价值。     

乳腺癌组织学分级与ER、PR、CerbB-2、Ki-67表达的关系

目的 探讨乳腺癌组织学分级与雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、人表皮生长因子受体-2(CerbB-2)、Ki-67表达的相关性.方法 用免疫组织化学法测定169例乳腺癌组织中ER、PR、CerbB-2、Ki-67的表达;Bloom-Richardson系统Nottingham改良方案测定组织学分级.结果 169例患者ER、PR、CerbB-2和Ki-67表达的阳性率分别为56.21%、63.91%、54.44%和75.15%;Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级乳腺癌组织中ER、PR的阳性表达率间差异无显著性意义(P>0.05);随着组织学分级的递增CerbB-2、Ki-67的阳性表达率随之增加(P<0.05);ER的表达与CerbB.2、Ki-67的表达间有相关关系(P<0.05).结论 乳腺癌组织中ER、PR的表达不随组织学分级的增加而增加;CerbB-2、Ki-67的表达随组织学分级的增加而增加;ER的表达与CerbB-2呈负相关.而与Ki-67呈正相关.