BAPTA-AM对HepG-2细胞MT的保护作用及其机制

目的观察BAPTA-AM抗H2O2诱导的HepG-2细胞MT损伤作用并探讨其机制。方法采用四甲基偶氮唑盐比色(MTT)、Rhodamine 123(Rh 123))荧光染色、细胞色素C酶联免疫分析、Caspase-9活性检测试剂盒、活性氧ROS检测法分别测定HepG-2细胞活性、线粒体(MT)膜电位、MT细胞色素C(CytC)的释放、Caspase-9的激活、活性氧(ROS)的产生量。结果 BAPTA-AM能抑制H2O2损伤HepG-2细胞所致MT跨膜电位的降低,减少CytC的释放,抑制Caspase-9激活和ROS的生成,提高受攻击H2O2的细胞活力。结论 BAPTA-AM通过减轻钙超载,保护MT,抑制凋亡通路的激活,产生抗细胞损伤、挽救细胞生命之效。     

BAPTA-AM指质体通过恢复胞质钙稳态抑制D-GalN致HepG-2细胞凋亡

目的探讨1,2-二（2-氨基苯氧基）乙烷-N,N,N＇,N＇-四乙酸四乙酰氧甲基酯（BAPTA-AM）恢复胞质钙离子稳态后对D-GalN诱导HepG-2细胞凋亡的影响。方法建立D-GalN诱导HepG-2细胞凋亡模型,采用MTT比色法、台盼蓝染色及AnnexinⅤ-EGFP、Hoechst-33258荧光染色等考察HepG-2细胞活性及细胞凋亡情况;通过Fura-2/AM钙离子荧光探针法测定不同处理组细胞内游离钙浓度,初步评价钙离子稳态与细胞凋亡的关系。结果 BAPTA-AM脂质体能显著抑制D-GalN致胞质钙离子浓度的升高,恢复胞质钙稳态,维持细胞形态,减少D-GalN诱导细胞凋亡。在一定范围内,细胞内钙离子浓度的增加与细胞活性的提高呈负相关,且钙离子载体A23187能够拮抗BAPTA-AM脂质体对HepG-2细胞的保护作用。结论BAPTA-AM脂质体通过减轻钙超载,抑制D-GalN诱导HepG-2细胞凋亡。     

新型姜黄素纳米粒在小鼠体内组织分布的研究

目的 制备新型姜黄素油酸复合物肝靶向纳米粒[Cur（OA）₂-NPs],并对其小鼠体内组织分布进行研究。方法 基于前期工作按最佳工艺,应用改良的溶剂挥发法制备Cur（OA）₂-NPs并进行表征;以25 mg·kg^-1小鼠尾静脉注射Cur（OA）₂-NPs,分别于给药后0.05,0.25,0.75,2,4,6,8,12 h,经眼球取血200 μL,小鼠解剖后取肝脏、心脏、脾脏、肺脏、肾脏和脑,经过液-液萃取法提取药物,HPLC测定姜黄素油酸[Cur（OA）₂]和姜黄素（Cur）的含量,分析Cur（OA）₂-NPs体内组织分布和药物释放特性;将Cur（OA）₂和DiR荧光染料包裹到mPEG₅₀₀₀-PLGA中制得纳米粒,按Cur剂量25 mg·kg^-1通过静脉注射给予正常小鼠和H22荷瘤小鼠,于不同时间点麻醉小鼠,将其置于785 nm激发波和820 nm发射波形成的活体红外成像系统中扫描成像,研究正常小鼠和H22荷瘤小鼠体内纳米粒的肿瘤靶向性特征。结果 纳米粒呈圆形,大小均匀,平均粒径为（93.39±1.71）nm,载药量为（19.35±0.12）%,包封率为（92.32±3.13）%。血浆中除脑组织外其余组织均可检测到Cur（OA）₂分布,分布迅速,Cur（OA）₂浓度4 h内从310.33 μg·mL^-1减少到28.94 μg·mL^-1,近90%从血管中被清除,肝脏中含量最高可达368.93 μg·g^-1;肝脏、脾脏和肾脏可检测到Cur,分别为125.72,33.60,16.81 μg·g^-1,而血浆、肺脏和脑中则无。纳米粒静脉注射后2 h左右出现峰值,其中肝脏Cur（OA）₂和Cur的浓度最高;活体成像结果也表明,小鼠体内纳米粒主要分布于肝脏和肿瘤部位,肝脏2 h左右达到峰值随后慢慢下降,而肿瘤组织8 h左右可见强烈荧光,并于12 h左右达到峰值,随后缓慢下降,且其荧光强度显著强于肝脏部位。结论 本研究完善了Cur（OA）₂-NPs的评价,为进一步研究其体内抗肿瘤作用奠定了良好的基础,也为难溶的、口服生物利用度低的药物开发提供了解决思路。     

环磷酰胺激活小鼠肝微粒体谷胱甘肽S-转移酶Ⅰ的机制研究

目的 探讨环磷酰胺(CP)在体内对小鼠肝微粒体谷胱甘肽S-转移酶Ⅰ(mGST-Ⅰ)活性的影响及其可能的机制.方法 用苯巴比妥75 mg·kg-1诱导小鼠CYP2B后,ip CP,测定 9 h内mGST-Ⅰ酶活性,观察二巯基丁二醇(DTT)对酶激活的逆转作用和巯基烷化剂N-乙基马来酰亚胺(NEM)对酶再激活效应,用SDS-PAGE和负染凝胶法评价CP对mGST-Ⅰ蛋白表达的影响.结果 CP 引起小鼠微粒体中mGST-Ⅰ活性增加;NEM在mGST-Ⅰ半胱氨酸-49-巯基(cys-49-SH)上的活化效应减弱,而CP引起的mGST-Ⅰ激活效应不被二硫键还原剂DTT逆转.激活的mGST-Ⅰ电泳图谱未见蛋白分子量变迁及蛋白表达增加.结论大剂量CP致mGST-Ⅰ激活效应机制主要是酶分子cys-49-SH上单个巯基的修饰作用.     

临床药师参与1例复发转移乳腺癌患者的药学监护

目的：探讨临床药师参与复发转移乳腺癌患者临床药物治疗的方法和切入点。方法：临床药师通过对化疗方案的评估,分析化疗过：程中可能出现的不良反应,将紫杉醇致骨髓抑制和神经毒性等预防、卡培他滨致手足综合征预防、紫杉醇及卡培他滨致呕吐和腹泻等不良反应预防、曲妥珠单抗过敏及心脏毒性预防、戈舍瑞林致皮肤潮红及关节痛等预防、唑来膦酸致发热等不良反应预防、糖皮质激素等辅助药物对患者血糖血压的影响、药物相互作用等作为药学监护点,协助临床医师完善治疗方案。结果：临床药师利用相关药学知识,使患者避免了可能产生的药源性损害,保障了肿瘤患者的用药安全。结论：临床药师参与复发转移乳腺癌化疗方案的制订与调整,可协助医师更好地为患者提供针对性强、可耐受的个体化用药方案。