C57BL/6小鼠EAE模型的建立及Foxp3、CD4~+CD25~+调节性T细胞检测

目的 以髓鞘少突胶质细胞糖蛋白细胞外免疫球蛋白样结构域(MOG~(Igd))为抗原免疫C57BL/6小鼠,建立实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型,并检测CD4~+CD25~+T细胞、Foxp3 mRNA等指标的表达.方法 采用分子克隆技术诱导表达MOG~(Igd)-TrxA融合蛋白,纯化后以此融合蛋白为抗原于侧腹壁皮下多点注射免疫C57BL/6小鼠作为实验组(MOG组);同时以硫氧还蛋白(TrxA)、豚鼠脊髓匀浆(GPSCH)、生理盐水免疫小鼠分别作为阴性、阳性及正常对照组.双盲法连续早晚观察30 d,通过评估动物的临床神经功能、组织病理(HE染色和Kluver-Barrera法髓鞘染色、免疫组化法)情况,评价模型的质量.流式细胞仪(FACS)检测小鼠脾脏中CD4~+CD25~+调节性T细胞;real-time PCR检测Foxp3 mRNA的相对表达水平,并分析两者相关性.结果 MOG组及GPSCH组小鼠均呈慢性非缓解型病程,两组在发病时间、达峰时间、临床神经功能评分等方面差异均无统计学意义(P>0.05).TrxA组及正常对照组无一动物发病.模型组(包括MOG组和GPSCH组)动物HE染色可见血管周围炎性细胞浸润,胶质结节形成,髓鞘染色可见斑片状髓鞘脱失,大脑、小脑、脑干和脊髓均有不同程度受累.免疫组化定性和半定量分析显示MOG组和GPSCH组病灶周围炎症浸润处AQP-4表达与TrxA组相比明显增高(P<0.05);MOG组CD4~+CD25~+T细胞占CD4~+T细胞比例为(4.71±1.61)%,GPSCH组为(1.44±0.65)%,均明显低于TrxA组和正常对照组(P<0.01),且MOG组和GPSCH组之间的差异亦具有统计学意义(P<0.01).MOG组标准化Foxp3 mRNA的表达量为2.26±1.97,GPSCH组为1.44±1.20,均低于TrxA组的8.58±3.34(P<0.01);但MOG组和GPSCH组间的差异无统计学意义(P>0.05).相关性分析显示,模型组小鼠CD4~+ CD25~+调节性T细胞与Foxp3 mRNA表达水平间存在相关性(r=0.849,P<0.05).结论 用MOG~(Igd)免疫C57BL/6小鼠诱导EAE模型稳定,发病率高,为今后进一步研究多发性硬化的免疫发病机制和采取有效治疗措施打下基础.     

尤瑞克林在急性脑梗死治疗中的应用

目的 评价尤瑞克林治疗急性脑梗死的临床疗效和安全性.方法 126例急性脑梗死患者随机分为治疗组(n=68)和对照组(n=58),在对症治疗的基础上,对照组给予脑复康,治疗组给予尤瑞克林,两组疗程均为14 d.评定患者治疗前后神经功能缺损程度(NIHSS)及残障水平(mRS),监测用药期间血压变化,并随访90 dmRS.结果 治疗后,两组患者NIHSS和mRS评分均降低(全部P<0.01),治疗组NIHSS、mRS以及总有效率均优于对照组(全部P<0.05);治疗组90 d mRS与治疗结束相比显著降低,与对照组90 d mRS相比也显著降低(全部P<0.01);血压无明显波动(P>0.05).结论 尤瑞克林能够安全有效地治疗急性脑梗死,改善患者的远期预后.     

急性卒中患者并发医院肺部真菌感染危险因素分析

目的:探讨急性卒中患者医院内肺部真菌感染病原学特点、危险因素.方法:回顾性分析2009至2012年期间62例卒中并发医院肺部真菌感染患者资料,包括年龄、性别、吸烟史、饮酒史、高血压、糖尿病史、意识障碍程度、基线NIHSS评分、住院日.从同期住院患者中随机抽取80例卒中后无感染患者设为对照组进行分析.结果:卒中并发医院肺部真菌感染占医院肺部感染的10.7％(62/578),菌种以白色念珠菌最多(70.9％,42/62),肺部真菌感染发生与卒中类型、饮酒、高血压无关(P＞0.05);但发现年龄、性别、糖尿病、平均住院日、意识障碍程度、基线NIHSS评分是其危险因素(P＜0.05);结论:加强对有高危因素的卒中患者识别,减少肺部真菌感染发生,从而改善预后.     

体外受精-胚胎移植并发颅内静脉窦血栓1例报道并文献复习

目的：提高体外受精-胚胎移植（In-vitro fertilization and embryo transfer,IVF-ET）并发颅内血栓形成的诊治水平。方法：报告1例IVF-ET并发颅内静脉窦血栓并获得成功治疗病例的临床资料,结合文献复习讨论IVF-ET并发颅内血栓形成的临床特点、预防和处理。结果：1例继发不孕患者行黄体期长方案IVF,hCG日E2为7083pmol/L,获卵18个,移植3个胚胎。取卵后第14天出现腹水,妊娠试验阳性,第15天出现头痛和颈痛,第17天突发神志不清和左侧偏瘫。MR和MRV证实左侧额叶及右侧额顶叶和颞叶皮层多发梗死灶,上矢状窦、右侧横窦和乙状窦血栓形成。予以降颅压、终止妊娠和低分子肝素处理。8周后患者除左手背精细感觉异常外余完全恢复。结论：IVF-ET并发颅内血栓是一个少见的可能致死或致残的并发症。预防卵巢过度刺激综合征（OHSS）的发生应是避免颅内血栓发生的主要措施。IVF-ET治疗中出现头部和颈部疼痛及任何神经症状,都要详细检查确定是否出现颅内血栓。低分子肝素抗凝可作为其主要的治疗手段。     

凯力康治疗急性脑梗死的疗效与安全性

目前各种治疗脑梗死药物疗效欠佳,凯力康(尤瑞克林)是国家一类新药,已完成的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期临床试验证实其对轻-中度急性脑梗塞有效[1].为进一步观察凯力康的临床疗效及安全性,笔者进行本研究.     

卵巢过度刺激综合征合并颅内静脉窦血栓形成一例

患者女,34岁,2008年6月在温州医学院附属第一医院行试管婴儿术成功,术后第10天(2008年7月11日)晚上出现头痛,较剧烈,伴恶心呕吐.3 d后症状加重,伴四肢乏力,需扶持行走,就诊于当地医院,考虑"妊娠反应",治疗后症状无缓解.     

重症肌无力患者的外周血CD8~+CD28~-T细胞的变化及意义

目的探讨CD8+CD28-T细胞在重症肌无力(MG)发病中的作用。方法采用流式细胞术对51例MG患者和35例健康对照者外周血中CD8+CD28-T细胞的构成比进行测定。结果 MG患者外周血中CD8+CD28-T细胞明显低于正常对照组,差异有统计学意义(P0.01);病情未能控制的MG患者外周血中CD8+CD28-T淋巴细胞构成比显著低于正常对照组(P0.01);胸腺切除的MG患者CD4/CD8比值均低于胸腺未切除组(P0.05)。胸腺瘤B2型MG患者外周血CD8+CD28-T细胞构成比明显高于胸腺增生的MG患者以及胸腺正常MG患者,其差异有统计学意义(P0.01)。胸腺瘤B2型的MG患者外周血CD4/CD8比值低于胸腺正常的MG患者的(P0.05)。结论提示MG患者外周血中存在异常比例的CD8+CD28-T细胞,可能参与疾病的发生与发展。     

重症肌无力患者外周血中CD4＋CD25high调节性T细胞的变化及意义

目的 研究CD4＋CD25high调节性T细胞（CD4＋CD25high regulatory T cells,CD4＋CD25highTr）在重症肌无力（myasthenia gravis,MG）发病过程中的作用.方法 采用流式细胞仪对51例MG患者外周血中CD4＋CD25highTr的表达量进行测定,分组比较病情不同的MG患者外周血中CD4＋CD25highTr的表达量,并选择35例健康体检者作为正常对照.结果 MG组患者外周血中CD4＋CD25highTr的表达量低于正常对照组的健康体检者,差异具有统计学意义（P〈0.05）;病情控制不佳的MG患者外周血中CD4＋CD25highTr的表达量低于病情稳定的MG患者及健康体检者（均P〈0.05）;胸腺切除的MG患者外周血中CD4＋CD25highTr的表达量明显高于非胸腺切除患者（P〈0.05）.结论 MG患者外周血中CD4＋CD25highTr的表达量异常,其可能参与MG的发生与发展,与MG的稳定程度密切相关.