葡萄糖浓度与大鼠胰腺导管干细胞的诱导分化

背景:葡萄糖是胰腺导管干细胞分化的重要因素之一,与分化后胰岛素分泌细胞数量及分泌能力相关.目的:对比不同浓度葡萄糖诱导下,胰腺导管干细胞分化后细胞的胰岛素分泌能力.方法:使用胶原酶Ⅴ及Ficoll-400分离及纯化Wistar大鼠胰腺上皮细胞,获取胰腺导管干细胞,将干细胞分为10组,体外培养、增殖及分化形成胰岛素分泌细胞.各组在含有不同浓度葡萄糖的培养基中进行分化.采用免疫荧光染色法鉴定胰腺导管干细胞,光化学发光法检测分化出的胰岛素分泌细胞的胰岛素分泌量.结果与结论:葡萄糖浓度为20.6,25.6,30.6 mmol/L组细胞的刺激指数高于其他组(P < 0.05),但这3组两两比较差异无显著性意义(P > 0.05).葡萄糖浓度为15.6,20.6,25.6 mmol/L组细胞胰岛素分泌量高于其他组(P < 0.05),但这3组两两比较差异无显著性意义(P > 0.05).提示胰腺导管干细胞分化为胰岛素分泌细胞实验中,当分化时培养液所含葡萄糖浓度为20.6～25.6 mmol/L时,所得细胞胰岛素分泌能力最强.     

葡萄糖浓度与大鼠胰腺导管干细胞的诱导分化

背景：葡萄糖是胰腺导管干细胞分化的重要因素之一,与分化后胰岛素分泌细胞数量及分泌能力相关。目的：对比不同浓度葡萄糖诱导下,胰腺导管干细胞分化后细胞的胰岛素分泌能力。方法：使用胶原酶Ⅴ及Ficoll-400分离及纯化Wistar大鼠胰腺上皮细胞,获取胰腺导管干细胞,将干细胞分为10组,体外培养、增殖及分化形成胰岛素分泌细胞。各组在含有不同浓度葡萄糖的培养基中进行分化。采用免疫荧光染色法鉴定胰腺导管干细胞,光化学发光法检测分化出的胰岛素分泌细胞的胰岛素分泌量。结果与结论：葡萄糖浓度为20.6,25.6,30.6mmol/L组细胞的刺激指数高于其他组（P〈0.05）,但这3组两两比较差异无显著性意义（P〉0.05）。葡萄糖浓度为15.6,20.6,25.6mmol/L组细胞胰岛素分泌量高于其他组（P〈0.05）,但这3组两两比较差异无显著性意义（P〉0.05）。提示胰腺导管干细胞分化为胰岛素分泌细胞实验中,当分化时培养液所含葡萄糖浓度为20.6~25.6mmol/L时,所得细胞胰岛素分泌能力最强。     

葡萄糖浓度与大鼠胰腺导管干细胞的诱导分化

背景：葡萄糖是胰腺导管干细胞分化的重要因素之一,与分化后胰岛素分泌细胞数量及分泌能力相关。 目的：对比不同浓度葡萄糖诱导下,胰腺导管干细胞分化后细胞的胰岛素分泌能力。 方法：使用胶原酶Ⅴ及Ficoll-400分离及纯化Wistar大鼠胰腺上皮细胞,获取胰腺导管干细胞,将干细胞分为10组,体外培养、增殖及分化形成胰岛素分泌细胞。各组在含有不同浓度葡萄糖的培养基中进行分化。采用免疫荧光染色法鉴定胰腺导管干细胞,光化学发光法检测分化出的胰岛素分泌细胞的胰岛素分泌量。 结果与结论：葡萄糖浓度为20.6,25.6,  30.6 mmol/L组细胞的刺激指数高于其他组(P < 0.05),但这3组两两比较差异无显著性意义(P > 0.05)。葡萄糖浓度为15.6,20.6,25.6 mmol/L组细胞胰岛素分泌量高于其他组(P < 0.05),但这3组两两比较差异无显著性意义(P > 0.05)。提示胰腺导管干细胞分化为胰岛素分泌细胞实验中,当分化时培养液所含葡萄糖浓度为20.6~25.6 mmol/L时,所得细胞胰岛素分泌能力最强。     

Nectin-4在胰腺癌中的表达及其临床意义

目的 检测胰腺癌与正常胰腺组织中nectin-4蛋白的表达水平,探讨nectin-4蛋白的表达情况与胰腺癌临床病理特征之间的关系及临床意义.方法 采用免疫组织化学方法检测40例胰腺癌组织及12例正常胰腺组织中nectin-4蛋白的表达情况,并分析其与胰腺癌临床病理参数之间的关系.结果 (1)各组中nectin-4蛋白的表达水平:胰腺癌组,累积吸光度值2.43±0.75,阳性区域面积值9.73±1.86;正常胰腺组,累积吸光度值1.06±0.68,阳性区域面积值4.76±1.70.胰腺癌组织中nectin-4蛋白的阳性表达量高于后者,差异有统计学意义(P＜0.01);(2)nectin-4蛋白与胰腺癌临床病理参数的关系:在不同性别、不同年龄间比较,差异均无统计学意义(P＞0.05);与组织病理分化程度(P＜0.01)、有无淋巴结转移(P＜0.05)均明显相关.结论 胰腺癌组织中nectin-4蛋白呈高表达状态,其过量表达与胰腺癌的恶性程度密切相关.     

胰腺干细胞诱导分化后同种移植治疗糖尿病的实验研究

目的 探讨胰腺干细胞体外定向分化潜能,评价诱导分化后细胞同种移植对糖尿病的治疗效果.方法 体外分离、纯化成体Wistar大鼠胰腺干细胞,运用荧光免疫染色法对胰腺干细胞表面进行鉴定,然后在肝细胞生长因子、尼克酰胺等共刺激下诱导细胞定向分化.双硫腙(DTZ)染色对诱导后细胞进行胰岛细胞鉴定,ELISA染色光电酶标记法检测其胰岛素分泌功能.采用链脲佐菌素(STZ)腹腔注射建立Wistar大鼠糖尿病模型,将40只造模成功的大鼠随机分为胰岛细胞移植组(移植组)和安慰剂注射组(对照组),分别于移植前1 d及移植后1、2、3、4周经尾静脉采血检测血清胰岛素和血糖水平.结果 本实验成功获取成体大鼠胰腺干细胞,细胞表面CK19、Pdx-1和Nestin表达均为阳性.诱导分化后的细胞DTZ染色呈棕红色,在高糖刺激下表达、分泌胰岛素.移植后4周内移植组血清胰岛素水平平均为(11.41±1.52)mU/L,血糖水平平均为(8.22±2.7)mmol/L,对照组分别为(9.30±1.56)mU/L和(12.23±3.8)mmol/L,两组相差显著(P＜0.05).结论 体外分离成体胰腺干细胞可被定向诱导分化为具有胰岛素分泌功能的胰岛样细胞,同种移植后对糖尿病具有治疗作用.     

葡萄糖浓度与大鼠胰腺导管干细胞的诱导分化

背景：葡萄糖是胰腺导管干细胞分化的重要因素之一,与分化后胰岛素分泌细胞数量及分泌能力相关。 目的：对比不同浓度葡萄糖诱导下,胰腺导管干细胞分化后细胞的胰岛素分泌能力。 方法：使用胶原酶Ⅴ及Ficoll-400分离及纯化Wistar大鼠胰腺上皮细胞,获取胰腺导管干细胞,将干细胞分为10组,体外培养、增殖及分化形成胰岛素分泌细胞。各组在含有不同浓度葡萄糖的培养基中进行分化。采用免疫荧光染色法鉴定胰腺导管干细胞,光化学发光法检测分化出的胰岛素分泌细胞的胰岛素分泌量。 结果与结论：葡萄糖浓度为20.6,25.6, 30.6 mmol/L组细胞的刺激指数高于其他组(P < 0.05),但这3组两两比较差异无显著性意义(P > 0.05)。葡萄糖浓度为15.6,20.6,25.6 mmol/L组细胞胰岛素分泌量高于其他组(P < 0.05),但这3组两两比较差异无显著性意义(P > 0.05)。提示胰腺导管干细胞分化为胰岛素分泌细胞实验中,当分化时培养液所含葡萄糖浓度为20.6~25.6 mmol/L时,所得细胞胰岛素分泌能力最强。     

联合间充质干细胞培养对大鼠胰岛的保护作用

目的 探讨间充质干细胞与胰岛联合培养在延长胰岛体外存活时间、保护胰岛功能方面的作用.方法 以4周龄Wistar大鼠作为供体,分离纯化骨髓间充质干细胞并培养鉴定;Histopaque-1077一步法分离纯化Wistar大鼠胰岛;将胰岛培养分为单纯胰岛基础培养、单纯胰岛高糖培养、胰岛与间充质干细胞联合基础培养、胰岛与间充质于细胞联合高精培养4组,每组又分3个时间段(3、7、14 d)观察胰岛形态变化及胰岛存活率,酶联免疫吸附法检测胰岛素分泌量及刺激指数.结果 骨髓间充质干细胞传代培养3代后,流式细胞术检测CD45及CD90,二者荧光强度差异有统计学意义(P＜0.05);联合培养组3、7、14 d的胰岛存活率均高于单纯培养组(P＜0.01);高糖刺激下联合培养组7 d的胰岛素分泌量及刺激指数均高于单纯培养组(P＜0.01).结论 间充质干细胞与胰岛联合培养可以明显延长胰岛体外存活时间并保持其活性,对胰岛具有良好的保护作用.

Abstract：

Objective To observe the effect of mesenchymal stem cells (MSCs) on enhancing rat islets viability and function in vitro by a pretransplant co-culture. Methods 4-week-old Wistar rats were used as donors, bone mesenchymal stem cells were isolated and subcultured. Islets of Wistar rats were isolated and purified by one-step single-layer Histopaque-1077. Then islets were divided into four groups randomly, 2 groups co-cultured with mesenchymal stem cells (MSCs) (one using low-glucose medium; the other using high-glucose medium ); 2 groups were cultured alone (low-glucose medium; high-glucose medium), each group was further stratified into 3 subgroups(3, 7, 14 d); the survival and functionality of these islets were observed and evaluated. The amount of glucose stimulated secreted insulin were measured wth a rat/mouse insulin enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) kit and stimulation index was also calculated. Results Compared with those not co-cultured, islets co-cultured with MSCs demonstrated significantly higher survival rates and viability both in 3th, 7th and 14th day ( P ＜ 0. 01 ); furthermore, cocultured islets revealed higher levels of glucose stimulated insulin secretion and secretion indexes in 7th day (P＜0.01). Conclusion Rat islet cells co-cultured with MSCs have longer in vitro survival and better functions.     

骨髓间充质干细胞覆膜聚乳酸-羟基乙酸/Ⅰ型胶原蛋白支架补片在腹股沟疝模型中的作用

本研究旨在探讨骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)覆膜聚乳酸-羟基乙酸/Ⅰ型胶原蛋白支架[poly(lactic-co-glycolic acid)-collegenⅠ,PLGA-collagenⅠ]补片 [1]对大鼠腹股沟疝模型血清基质金属蛋白...