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CpG寡核苷酸对人外周血B淋巴细胞免疫刺激作用 总被引:2,自引:0,他引:2
目的观察CpG-ODN 2006和CpG-ODN 2216对健康人外周血单个核细胞中B淋巴细胞抗原递呈相关分子MHC-I、MHC-Ⅱ及共刺激分子CD 80、CD 86表达的影响,探讨CpG-ODN对B淋巴细胞抗原递呈功能的作用。方法CpG-ODN 2006、CpG-ODN 2216与健康人PBM C共培养48 h,用流式细胞技术以CD 19-P reCP“设门”其中B淋巴细胞,检测其表面CD 69、MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ、CD 80及CD 86的表达状况,并与未加CpG-ODN组进行比较。B淋巴细胞MHC-I、MHC-Ⅱ的表达量以几何平均荧光强度表示(M F I);CD 80、CD 86的表达量以阳性细胞百分率表示。结果CpD-ODN 2006和CpG-ODN 2216均显著提高B淋巴细胞CD 69、MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ、CD 80及CD 86的表达,与未加CpG-ODN组比较有显著性差异(P<0.05)。CpG-ODN 2216使B淋巴细胞表面抗原递呈相关分子的增加量更为明显。结论CpG-ODN能够提高B淋巴细胞表面抗原递呈相关分子和共刺激分子的表达,能增强B淋巴细胞递呈抗原的能力。 相似文献
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系统性红斑狼疮患者CD4+T淋巴细胞CD45RO/CD45RA的表达 总被引:6,自引:1,他引:6
目的:检测系统性红斑狼疮患者CD4^ T辅助淋巴细胞CD45RO和CD45RA亚群的变化及临床意义。方法:用流式细胞术检测了8例活动期SLE患者CD4^ T辅助细胞CD45RO、CD45RA的表达率,并与对照组进行了比较。结果:SLE患者CD4^ T辅助淋巴细胞CD45RO的表达率与对照组无显著性差异(59.30%vs.59.74%),CD45RA下降(21.40%vs.31.64%),CD45RD、CD45RA双阳性T辅助淋巴细胞显著增高(18.57%vs.7.92%)。结论:SLE患者体内CD45RA^ T辅助淋巴细胞被激活,向CD45RO^ 细胞转化。CD45RA^ T辅助细胞的减少是导致机体免疫功能失去平衡的重要原因。 相似文献
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体外诱导小鼠骨髓干细胞转化为肝细胞的实验研究 总被引:6,自引:2,他引:6
目的模拟体内肝脏发生发育的环境和条件,建立以细胞因子为主的体外诱导培养体系,探讨骨髓干细胞体外转化肝细胞的可行性。方法获取小鼠骨髓干细胞,建立以细胞因子为细胞诱导的培养体系。在细胞培养过程中,观察细胞形态和数量,逆转录-聚合酶链反应(RT—PCR)检测肝细胞特异性基因的表达。Western blot和流式细胞仪检测ALB和CK18在蛋白水平的表达情况。糖元染色法行细胞糖原染色、尿素合成试验检测细胞的合成和代谢功能。结果在诱导培养12d,可以观察到多极性的肝细胞样细胞。且细胞逐渐增多、集落不断增大。诱导细胞在培养7d开始表达AFP mRNA并维持到第21天。此后表达逐渐减弱;培养7天开始表达ALB mRNA和CK18 mRNA。随着培养时间的延长表达不断增强;培养14d开始表达TTR mRNA,随着培养时间的延长表达不断增强。通过Western blot检测,诱导21d的细胞表达ALB和CK18蛋白,流式细胞术分析ALB阳性细胞的比例为60.45%,CK18阳性细胞的比例为67%。诱导培养21d,细胞胞浆内可见红染的糖原颗粒;诱导培养6d,细胞开始合成尿素,尿素合成功能随诱导时间的延长而增强,于第15天达到高峰。结论我们建立的以细胞因子FGF、HGF、OSM、EGF为主的细胞诱导培养体系能促使骨髓干细胞定向转化为肝细胞。 相似文献
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目的探讨联合化疗加细胞因子动员自体外周血CD34+细胞的采集及临床级磁性分选仪(CliniMACS)分选的最佳方法,评价分选后CD34+细胞在造血干细胞移植中的应用效果.方法2001-03/2002-01在南京市鼓楼医院血液科病房收治自身免疫性疾病患者9例.符合纳入标准患者9例,男3例,女6例.采用环磷酰胺[2~4 g/(m2·d)]+粒细胞集落刺激因子(G-CSF)[5~10 μg/(kg·d)]作为动员剂,CS-3000Plus血细胞分离机采集外周血单个核样细胞,CliniMACS作CD34+细胞分选,观察分选前后的细胞计数、纯度、细胞活力,流式细胞术进行细胞表型检测及粒巨细胞集落形成单位(CFU-GM)培养.计算CD34+细胞的采集得率和分选回收率.观察CD34+细胞移植后造血功能恢复的情况.结果经环磷酰胺加G-CSF动员后,采集时机多以一次采集能够获得足够数量的CD34+细胞(CliniMACS分选和冷冻保存的耗损计算在内)为原则,外周血白细胞总数>6×109 L-1或CD34+细胞>0.4%时开始采集,其中8例采集1次,1例采集2次.每例患者可获单个核样细胞(MNC)总数(0.924~5.360)×1010,MNC(2.6~19.5)×108/kg,CD34+细胞(2.4~37.2)×106/kg,经CliniMACS系统分选后,CD34+细胞回收率为51%~93%,平均回收率为87%,CFU-GM回收率为35%~62%.CD34+细胞纯度为94.3%~98.4%,平均96.71%.CD3+,CD19+,CD56+,CD14+细胞去除2~4个对数级.经冰冻保存后的CD34+细胞的回收率为78%~99%,CFU-GM回收率为82%~99%,实际回输CD34+细胞为(2.0~8.3)×106/kg,移植后均获造血重建.结论掌握最佳动员、采集及分选方法,CD34+细胞可获较高产率,移植后造血功能恢复较快. 相似文献
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组织因子(tissue factor,TF.factor Ⅲ,tissue thromboplastin,)是膜结合脂依赖糖蛋白,能与凝血因子Ⅶ形成复合物,显著提高因子Ⅶ和Ⅶ_a 对因子Ⅹ和Ⅸ的活化能力.Bach 和pitlick 纯化了牛脑TF.我们参照他们的方法提取了兔脑TF.方法是先用Triton X-100使膜结合的TF 溶解,再以ConA-Sepharose 亲和层析,得到比较纯的组织因子脱辅基蛋白(tissue factor apoprotein),将它与磷脂再脂化(relipidation)后,即为具有高促凝血活性的组织凝血活素。我们用经此提取的组织凝血活素与兔脑粉浸液、人脑粉浸液及Simplastin 进行了比较,证明组织凝血活素对凝血酶原时间(PT)异常标本检出的敏感性优于兔脑粉及人脑粉,与Simplastin 相似。 相似文献
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用网织红细胞成熟指数监测造血干细胞移植效果的价值 总被引:3,自引:1,他引:2
网织红细胞(Ret)被定义为未成熟无核红细胞,是反映骨髓造血功能的重要指标。其内部含有由RNA和原卟啉组成的嗜碱细胞器的小型网状构造,显示出极强的光散射特征。成熟指数(maturityindex,MI)用来表达高光散射区域中有较强嗜色性和散射光的Ret在所有Ret中所占的比例,其反映骨 相似文献
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目的分析骨形态发生蛋白-7 (BMP-7)在胃癌中的表达,初步探讨BMP-7对胃癌诊断的意义。方法以27例胃癌及相应的癌旁组织为研究对象,采用实时荧光定量PCR和Western blotting方法,分别检测组织中BMP-7 mRNA及其蛋白的表达情况。结果27例配对的胃癌及其癌旁组织中,63.0%(17/27)的癌组织BMP-7 mRNA的表达高于癌旁组织,差异有统计学意义(t=2.94,P<0.01,配对t检验);Western blotting结果显示,77.8%(7/9)的癌组织BMP-7蛋白水平的表达高于癌旁组织,差异有统计学意义(t=2.57,P<0.05,配对t检验)。结论胃癌组织中BMP-7的表达高于癌旁组织,可能与胃癌的发生、发展相关,对临床胃癌的辅助诊断可能具有潜在价值。 相似文献