NR2 C2 基因在泌乳素瘤的表达及其意义

目的探讨核受体亚家族2c成员2(nuclear receptor subfamily 2 group C member 2,NR2C2)在泌乳素瘤的表达水平及其与临床特征的关系。方法采用免疫组化染色和蛋白印迹实验检测46例泌乳素瘤患者的肿瘤组织NR2C2表达水平。用RNA干扰技术敲低MMQ细胞NR2C2表达水平,行细胞增殖实验检测细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果按照Knosp分级将患者分为侵袭组和非侵袭组。侵袭组NR2C2表达的免疫组化评分为148. 2±42. 7,非侵袭组为45. 2±28. 72; NR2C2表达水平与肿瘤大小成正相关(r=0. 327,P=0. 039);疏松颗粒型患者的表达水平更高(P=0. 003)。蛋白印迹实验检测NR2C2蛋白水平,筛选出Sh-B(23. 4%)和Sh-C(34%)片段;干扰24 h、48 h和72 h后,与对照组相比Sh-B组的细胞活力分别下降24. 8%、39. 2%和48. 3%,Sh-C组分别下降19. 1%、26. 4%和32. 5%(均P 0. 05)。干扰24 h后,Sh-B组Annexin V阳性细胞为(10. 3±3. 1)%,PI阳性细胞为(7. 3±2. 1)%; Sh-C组分别为(8. 5±2. 3)%和(5. 6±1. 8)%;均明显高于对照组(均P 0. 05)。结论 NR2C2能促进肿瘤生长,与催乳素腺瘤的发生发展密切相关。     

猫中脑髓外压迫性损伤模型的建立

目的探讨建立中脑压迫性损伤实验动物模型的方法和意义。方法采用84只普通家猫,体重2.5~4.0 kg,全麻下开颅在中脑背侧置入微型硅胶水囊,造成中脑髓外压迫性损伤,根据不同压迫容量(0.25 ml、0.50 ml、1.00 ml、1.50 ml和2.00 ml)和不同压迫时间(2 h、12 h、24 h和48 h)分组,观察损伤后动物意识、呼吸、运动功能、瞳孔及神经反射情况,同时记录脑干听觉诱发电位(BAEP)变化,评估动物神经系统功能损伤程度,评价模型的稳定性。结果硅胶水囊置入猫中脑背侧后,可以造成可控的中脑损伤,并引起相应的病理生理改变,包括意识水平下降、运动障碍和神经反射异常等,压迫容量和持续时间与中脑损伤程度呈正相关。同时,损伤动物BAEP波潜伏期明显延长,与脑干BAEP的异常程度明显相关。结论应用硅胶水囊置入猫中脑背侧,建立中脑损伤的实验动物模型稳定、可控,可以应用于中脑损伤的实验研究。     

Delta样蛋白1同源物与生长激素腺瘤临床表型的关系及其对生长激素的影响研究

目的 分析Delta样蛋白1同源物（DLK1）在生长激素（GH）腺瘤中的表达情况及其临床意义。方法本实验时间为2020年10月至2022年6月。肿瘤标本来自2016—2020年于首都医科大学附属北京天坛医院神经外科行手术切除的34例GH腺瘤患者。采用免疫组织化学染色检测肿瘤标本中DLK1、GH表达情况。取对数生长期的大鼠GH3细胞，将其随机分为A组、B组、C组、D组[B组、C组、D组分别加入1、5、20μg/ml抗DLK1抗体，A组加入等体积的二甲基亚砜（DMSO）]，分别于培养0、24、48、72 h后采用细胞增殖实验检测各组细胞活力。取对数生长期的大鼠GH3细胞，将其随机分为E组、F组（F组加入5μg/ml抗DLK1抗体，E组加入等体积的DMSO），分别于培养0、24、48、72 h后采用ELISA检测各组GH3细胞培养上清液中GH水平。取对数生长期的大鼠GH3细胞，将其随机分为G组、H组、I组、J组（H组、I组、J组分别加入1、5、20μg/ml抗DLK1抗体，G组加入等体积的DMSO），采用Western blot法检测各组GH3细胞中磷酸化p70核糖体蛋白S6激酶（p-p70...     

Delta样蛋白1在垂体腺瘤细胞株中的表达及生物学功能研究

目的探讨Delta样蛋白1(DLK1)在垂体腺瘤细胞株中的表达水平及生物学功能。方法体外培养垂体腺瘤GH3、MMQ和ATT20细胞, 分为实验组和对照组, 实验组细胞分别给予抗DLK1抗体1 μg/ml和5 μg/ml, 对照组细胞给予等体积的二甲基亚砜, 共培养24、48及72 h。采用蛋白质免疫印迹实验检测各个细胞株DLK1的水平和谱系来源, 细胞增殖实验检测细胞的活力, 酶联免疫吸附(ELISA)法检测细胞的分泌能力[GH3细胞:GH和胰岛素样生长因子(IGF-1), MMQ细胞:催乳素(PRL), ATT2细胞:促肾上腺皮质激素(ACTH)], 细胞免疫荧光实验和蛋白质免疫印迹实验检测抗DLK1抗体对GH3细胞表达PIT1蛋白水平的影响。结果蛋白质免疫印迹实验结果证实, GH3和MMQ细胞为POU结构域转录因子1(POU1F1)谱系细胞, DLK1表达水平高;ATT20细胞为T盒转录因子19(TBX19)谱系细胞, DLK1表达水平低。与抗DLK1抗体共培养48 h, 仅GH3细胞5 μg/ml实验组的细胞活力高于对照组(P=0.017);共培养72 h, GH3细胞1 μg/...