人淀粉样前体蛋白基因与绿色荧光蛋白融合基因筛选系统的建立

目的 构建携带人淀粉样前体蛋白（APP）的增强型绿色荧光蛋白（EGFP）载体。以利于初步筛选对APP mRNA水平作用的药物。方法 将pEGFP质粒和携带野生型APP695亚型的pXCJL经Hind Ⅲ酶切，连接．PCR初筛，酶切鉴定。进一步经测序证实。携带野生型人类APP751亚型cDNA的pCDNA3．1质粒用XbaⅠ酶切．Klenow酶填平．再用HindⅢ酶切．回收APP751片段；质粒EGFP用SmaⅠ和Hind Ⅲ酶切。将目的基因APP751片段与EGFP载体片段连接生成重组质粒．酶切鉴定．测序证实。构建好的重组质粒转染COS-7细胞．观察EGFP的表达情况。结果 APP695和APP751重组质粒上的EGFP在COS-7细胞内得以表达。结论 构建的APP—EGFP融合基因重组质粒．有助于方便、快速地初筛出作用于APP mRNA水平的药物。     

小干扰RNA对人淀粉样前体蛋白基因的沉默作用

目的 观察小干扰RNA(siRNA)对人淀粉样前体蛋白(APP）基因的沉默作用，方法 该研究将设计好的一对寡核甘酸在细胞内源性地转录成小发夹RNA（shRNA)，同时构建了携带两个APP亚型的增强型绿色荧光蛋白（EGFP）的GFP-APP重组质粒。利用EGFP作为报告基因。在COS-7细胞内通过共转染siRNA表达质粒和GFP-APP的重组质粒来观察沉默效应。结果 针对APP的siRNA可有效地下调APP基因。结论 针对APP的siRNA将不仅在研究APP基因功能和深入研究阿尔茨海默病（AD）的病理分子机制上，而且在运用siRNA这种新型的反应核酸药物治疗AD方面扮演重要角色。     

2020－2021年度新型冠状病毒肺炎疫情发展趋势分析与应对

新型冠状病毒（新冠病毒）具有自然疫源性和流感病毒的流行特性,病毒复制快、细胞嗜性广、存活能力强,而且其无症状感染者普遍、传播隐蔽,病毒已经在人群适应,控制难度大。在新冠病毒疫苗发挥广泛保护效应之前,2020 — 2021年度全球疫情可能进一步恶化,我国仍然面临境外多渠道持续输入和局部暴发或疫情重现风险。 因此,应进一步开展我国疫情高发区人群携带新冠病毒状况和相应环境中新冠病毒的监测;建立国家超级可移动新冠病毒检测网络实验室,能够执行超大规模检测任务;实施差异化疫苗接种策略并密切跟踪监测疫苗接种的效果和效率;应继续强化戴口罩、勤洗手、保距离、常开窗、少聚会等行之有效的公共卫生措施。 新冠病毒疫情再一次警告大家,野生动物源性未知病原体所导致的新发传染病病原不断地出现已经成为“新常态”,必须前瞻性系统开展未知微生物发现和反向病原学研究,主动防卫和应对未来新发传染病疫情。     

2008-2012年武汉市儿童流行性感冒病毒及呼吸道合胞病毒流行特征

目的 了解2008-2012年武汉市14岁及以下流行性感冒(简称流感)样症状患儿流感病毒和呼吸道合胞病毒(RSV)的感染情况及病毒流行特征.方法 于2008年7月至2012年6月在武汉市某医院门诊和急诊患者中,选择14岁以下的流感样病例作为研究对象,共2854例.研究对象各采集1份咽拭子标本,共采集2854份.从流感样病例咽拭子标本中提取病毒核酸,应用实时荧光定量逆转录PCR (RT-PCR)对流感病毒和RSV进行核酸检测和亚型鉴定,分析两种病毒感染的时间和年龄特征.结果 2854例患儿检测流感病毒阳性758例,阳性率为26.6％.其中,甲型流感病毒阳性547例(19.2％)、乙型流感病毒阳性211例(7.4％).流感病毒每年流行呈双峰特征,即夏季峰和冬春季峰.6～ 14岁组患儿流感病毒检测阳性率为48.0％(275/573),明显高于3～5岁组[26.6％ (213/801)]和3岁以下组[18.3％ (270/1480)],差异有统计学意义(x2=187.432,P＜0.01).患儿中RSV检测阳性219例,阳性率为7.7％,其中,RSV-A阳性108例,RSV-B阳性112例,混合感染1例.RSV流行呈明显的季节性,发病主要集中在秋、冬、春季,占全部发病病例的96.8％(212/219),每年流行情况波动较大.RSV-A、RSV-B交替流行,交替周期为2年,2008年9月至2009年5月及2009年12月至2010年3月以RSV-B感染为主,分别占76.6％(36/47)和96.9％(62/64)；2010年11月至2011年3月及2011年9月至2012年4月以RSV-A感染为主,分别占92.5％(37/40)和100.0％(48/48).但随着年龄的增长,RSV-A和RSV-B阳性率不断下降(RSV-A:x2=36.223,P ＜0.01；RSV-B:x2=36.281,P＜0.01),其中,RSV-A在＜1、1、2、3、4、5 ～9、10～ 14岁年龄组阳性率分别为7.0％ (26/373) 、5.9％ (39/662) 、4.0％ (18/445) 、3.2％ (13/406)、1.3％(3/236)、1.4％(7/517)、0.9％ (2/215)；RSV-B在各年龄组的阳性率分别为6.4％(24/373) 、6.0％(40/662)、4.5％(20/445)、4.4％(18/406)、1.3％(3/236)、1.0％(5/517) 、0.9％(2/215).0～3岁组RSV阳性197例,占RSV阳性患者总数的90.0％(197/219).2009年11月甲型H1N1流感暴发流行时,RSV阳性率为3.0％ (3/100),低于2008、2010、2011年同月份RSV检测阳性率[分别为18.2％ (6/33)、10.8％ (10/93) 、10.0％ (4/40)],差异有统计学意义(x2=8.450,P＜0.05)；2011年1月甲型H1N1流感暴发流行时,RSV阳性率为5.7％(3/53),低于2009、2010、2012年同月份RSV检测阳性率[分别为21.7％(5/23) 、28.6％(22/77)、16.0％(8/50)],差异有统计学意义(x2=11.233,P＜0.05)；2011年9月,流感夏季峰缺失时,RSV检测阳性率为25.0％(10/40),高于2008、2009、2010年同月份RSV检测阳性率[分别为11.4％ (4/35) 、1.7％ (2/118)、0.0％ (0/109)],差异有统计学意义(x2=32.521,P ＜0.01).结论 流感病毒和RSV是武汉地区流感样患儿重要的病原,两种病毒流行的季节性、年龄分布等特征各不相同,流感病毒对RSV的流行存在着一定的抑制作用.