超顺磁性氧化铁纳米粒子标记人脐血间充质干细胞的可行性

目的探讨超顺磁性氧化铁纳米粒子（superparamagnetic iron oxide,SPIO）标记人脐血间充质干细胞（UCB-MSCs）的安全性和有效性。方法采用密度梯度离心法结合直接贴壁法分离培养UCB-MSCs,并应用不同浓度的SPIO标记UCB-MSCs,分别通过普鲁士蓝染色测定标记率,台盼蓝染色检测标记后细胞活性,四甲基偶氮唑盐（MTT）比色试验评价SPIO对细胞生长能力的影响。结果普鲁士蓝染色证实SPIO标记UCB-MSCs浓度为14、28、56、84μg/ml时细胞标记率达100%的时间分别为72h、48h、36h、12h,细胞内铁颗粒的浓度随孵育时间、标记浓度的增加而增加,当SPIO浓度〉140μg/ml时对UCB-MSCs活性有一定程度的影响。台盼蓝排斥试验发现各低浓度组的活细胞率均在90%以上,组间比较差异无统计学意义（P〉0.05）;高浓度组的活细胞率下降,组间比较差异有统计学意义（P〈0.05）,与低浓度各组及未标记对照组比较差异亦有统计学意义（P〈0.05）。MTT比色试验结果显示,低浓度组间吸光度值（OD值）比较差异无统计学意义（P〉0.05）,而高浓度组OD值有下降趋势,与低浓度各组及未标记对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论适宜浓度的SPIO标记UCB-MSCs安全、有效。     

脐带源间充质干细胞与大鼠胰腺细胞共培养向胰岛样细胞分化及移植治疗1型糖尿病

背景：脐带Wharton’s Jelly中间充质干细胞可以向胰岛样细胞诱导分化。 目的：验证脐带源间充质干细胞与大鼠胰腺细胞共培养向胰岛样细胞诱导分化的可能性,并观察移植后对糖尿病大鼠血糖的影响。 方法：分离、诱导、传代脐带Wharton’s Jelly中间充质干细胞,再与大鼠胰腺细胞共培养,诱导成胰岛细胞团样组织。将大鼠分为3组,正常对照组不进行移植及造模;模型组仅制备糖尿病大鼠模型;实验组造模后将胰岛样细胞移植入糖尿病大鼠肾脏包膜。 结果与结论：脐带Wharton’s Jelly细胞培养中有细胞从组织块中爬出,第7天形态发生变化,贴壁细胞部分变成梭形。分离培养的细胞表达具有间充质干细胞表面特有标志CD44、CD29、CD105,不表达CD34、CD45、CD14。诱导第7,10天PDX-1及人胰岛素强染色;胰岛素及C-肽浓度较单纯培养组明显升高;PDX-1及人胰岛素mRNA诱导第7、10天较高表达。移植第1周大鼠尾尖血糖链脲佐菌素实验组明显低于模型组(P < 0.01),但明显高于正常照组(P < 0.01)。8周链脲佐菌素实验组肾脏被膜下发现胞核染棕色染色的Brdu阳性、胞浆棕色染色的胰岛素阳性细胞。结果表明,脐带Wharton’s Jelly中存在脐带源间充质干细胞,与大鼠胰腺细胞共培养可促进间充质干细胞向胰岛样细胞诱导分化,移植入糖尿病大鼠肾脏被膜下,可显著降低糖尿病大鼠血糖。     

体外诱导人脐带间充质干细胞分化为胰岛样细胞实验研究

目的 探索人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUC-MSCs)在胰岛细胞微环境中向胰岛样细胞的分化潜能及功能变化趋势.方法 将分离的第3代hUC-MSCs用低糖达尔伯克必需基本培养基(L-DMEM)重悬,接种单纯培养组及与大鼠胰岛细胞共培养组(共培养组).倒置显微镜观察hUC-MSCs的形态变化;流式细胞仪鉴定其细胞表面标志;免疫细胞化学鉴定胰十二指肠同源框-1基因(PDX-1)的表达;放免法检测hUC-MSCs胰岛素和C肽的分泌及对糖刺激的反应.结果 hUC-MSCs呈均一纺锤形平行排列或漩涡状排列生长,不表达CD34、CD45和CD14,高表达CD29、CD44和CD105;共培养组诱导后3 d及7 d经细胞逐渐变圆并聚集成团,PDX-1呈阳性表达,至10 d及14 d PDX-1阳性细胞罕见.单纯培养组细胞形态未发生变化,PDX-1表达阴性.共培养组培养上清中检测到较高水平的胰岛素及C肽,单纯培养组检测到少量的胰岛素,检测不到C肽,两组培养3、7、10和14 d的胰岛素分泌水平比较差异均有统计学意义(P<0.01).共培养组胰岛素及C肽水平以7 d最高,10 d次之,与3 d和14 d比较差异均有统计学意义(P<0.01),共培养组糖刺激指数为1.41.结论 hUC-MSCs在胰岛细胞微环境中具有向胰岛样细胞分化的潜能,其内分泌功能随体外诱导时间的延长呈现先递增后递减的趋势.     

脐带源间充质干细胞与大鼠胰腺细胞共培养向胰岛样细胞分化及移植治疗1型糖尿病

背景:脐带Wharton's Jelly中间充质干细胞可以向胰岛样细胞诱导分化.目的:验证脐带源间充质干细胞与大鼠胰腺细胞共培养向胰岛样细胞诱导分化的可能性,并观察移植后对糖尿病大鼠血糖的影响.方法:分离、诱导、传代脐带Wharton's Jelly中间充质干细胞,再与大鼠胰腺细胞共培养,诱导成胰岛细胞团样组织.将大鼠分为3组,正常对照组不进行移植及造模;模型组仅制备糖尿病大鼠模型;实验组造模后将胰岛样细胞移植入糖尿病大鼠肾脏包膜.结果与结论:脐带Wharton's Jelly细胞培养中有细胞从组织块中爬出,第7天形态发生变化,贴壁细胞部分变成梭形.分离培养的细胞表达具有间充质干细胞表面特有标志CD44、CD29、CD105,不表达CD34、CD45、CD14.诱导第7,10天PDX-1及人胰岛素强染色;胰岛素及C-肽浓度较单纯培养组明显升高;PDX-1及人胰岛素mRNA诱导第7、10天较高表达.移植第1周大鼠尾尖血糖链脲佐菌素实验组明显低于模型组(P < 0.01),但明显高于正常照组(P < 0.01).8周链脲佐菌素实验组肾脏被膜下发现胞核染棕色染色的Brdu阳性、胞浆棕色染色的胰岛素阳性细胞.结果表明,脐带Wharton's Jelly中存在脐带源间充质干细胞,与大鼠胰腺细胞共培养可促进间充质干细胞向胰岛样细胞诱导分化,移植入糖尿病大鼠肾脏被膜下,可显著降低糖尿病大鼠血糖.     

脐带源间充质干细胞与大鼠胰腺细胞共培养向胰岛样细胞分化及移植治疗1型糖尿病（英文）

背景：脐带Wharton’s Jelly中间充质干细胞可以向胰岛样细胞诱导分化。目的：验证脐带源间充质干细胞与大鼠胰腺细胞共培养向胰岛样细胞诱导分化的可能性,并观察移植后对糖尿病大鼠血糖的影响。方法：分离、诱导、传代脐带Wharton’s Jelly中间充质干细胞,再与大鼠胰腺细胞共培养,诱导成胰岛细胞团样组织。将大鼠分为3组,正常对照组不进行移植及造模;模型组仅制备糖尿病大鼠模型;实验组造模后将胰岛样细胞移植入糖尿病大鼠肾脏包膜。结果与结论：脐带Wharton’s Jelly细胞培养中有细胞从组织块中爬出,第7天形态发生变化,贴壁细胞部分变成梭形。分离培养的细胞表达具有间充质干细胞表面特有标志CD44、CD29、CD105,不表达CD34、CD45、CD14。诱导第7,10天PDX-1及人胰岛素强染色;胰岛素及C-肽浓度较单纯培养组明显升高;PDX-1及人胰岛素mRNA诱导第7、10天较高表达。移植第1周大鼠尾尖血糖链脲佐菌素实验组明显低于模型组（P〈0.01）,但明显高于正常照组（P〈0.01）。8周链脲佐菌素实验组肾脏被膜下发现胞核染棕色染色的Brdu阳性、胞浆棕色染色的胰岛素阳性细胞。结果表明,脐带Wharton’s Jelly中存在脐带源间充质干细胞,与大鼠胰腺细胞共培养可促进间充质干细胞向胰岛样细胞诱导分化,移植入糖尿病大鼠肾脏被膜下,可显著降低糖尿病大鼠血糖。     

消糖组方治疗初诊2型糖尿病胰岛素抵抗脾虚湿瘀证临床观察

目的观察消糖组方对初诊2型糖尿病胰岛素抵抗脾虚湿瘀证患者的临床疗效。方法将120例初诊2型糖尿病胰岛素抵抗脾虚湿瘀证患者按随机数字表法分为2组。对照组60例予单纯胰岛素强化治疗;治疗组60例在对照组基础上加用消糖组方治疗。2组均治疗2周后统计疗效,比较2组治疗前后中医症状(四肢倦怠、脘腹胀、大便不爽、头身困重、自汗及舌苔)评分、血糖[空腹血糖(FPG)及餐后2 h血糖(2 hPG)]、空腹胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、血脂[甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)]、超敏C反应蛋白(hs-CRP)及脂联素(ADP)水平变化情况。结果 2组治疗后中医症状四肢倦怠、脘腹胀、大便不爽、头身困重、自汗及舌苔评分与本组治疗前比较均明显降低(P0.05),且治疗组治疗后各中医症状评分均低于对照组(P0.05)。与本组治疗前比较,2组治疗后FPG、2 hPG、FINS、TG、TC、LDL-C、hs-CRP及HOMA-IR水平均明显降低(P0.05),ADP水平均明显升高(P0.05),且治疗组治疗后TG、HOMA-IR及ADP水平改善优于对照组(P0.05)。结论消糖组方治疗初诊2型糖尿病胰岛素抵抗脾虚湿瘀证疗效确切,可明显改善患者中医症状,降低血糖及血脂水平,减轻炎症反应,增加胰岛素的敏感性,改善胰岛素抵抗情况。     

脐带源间充质干细胞与大鼠胰腺细胞共培养向胰岛样细胞分化及移植治疗1型糖尿病★

背景：脐带Wharton’s Jelly中间充质干细胞可以向胰岛样细胞诱导分化。 目的：验证脐带源间充质干细胞与大鼠胰腺细胞共培养向胰岛样细胞诱导分化的可能性，并观察移植后对糖尿病大鼠血糖的影响。 方法：分离、诱导、传代脐带Wharton’s Jelly中间充质干细胞，再与大鼠胰腺细胞共培养，诱导成胰岛细胞团样组织。将大鼠分为3组，正常对照组不进行移植及造模；模型组仅制备糖尿病大鼠模型；实验组造模后将胰岛样细胞移植入糖尿病大鼠肾脏包膜。 结果与结论：脐带Wharton’s Jelly细胞培养中有细胞从组织块中爬出，第7天形态发生变化，贴壁细胞部分变成梭形。分离培养的细胞表达具有间充质干细胞表面特有标志CD44、CD29、CD105，不表达CD34、CD45、CD14。诱导第7，10天PDX-1及人胰岛素强染色；胰岛素及C-肽浓度较单纯培养组明显升高；PDX-1及人胰岛素mRNA诱导第7、10天较高表达。移植第1周大鼠尾尖血糖链脲佐菌素实验组明显低于模型组(P < 0.01)，但明显高于正常照组(P < 0.01)。8周链脲佐菌素实验组肾脏被膜下发现胞核染棕色染色的Brdu阳性、胞浆棕色染色的胰岛素阳性细胞。结果表明，脐带Wharton’s Jelly中存在脐带源间充质干细胞，与大鼠胰腺细胞共培养可促进间充质干细胞向胰岛样细胞诱导分化，移植入糖尿病大鼠肾脏被膜下，可显著降低糖尿病大鼠血糖。     

温阳化瘀方治疗糖尿病痛性神经病变疗效及机制研究

目的：探讨温阳化瘀方治疗糖尿病痛性神经病变（PDPN）疗效及对核因子κB(NF-κB)/诱导型一氧化氮合酶（i NOS） mRNA/一氧化氮（NO）信号通路的影响。方法：选择2021年5月至2022年5月秦皇岛市中医医院收治的PDPN患者90例，按照随机数字表法分为观察组和对照组各45例。对照组接受糖尿病常规治疗，并口服甲钴胺片、依帕司他片；观察组在此基础上予以中药温阳化瘀方口服，两组疗程均为4周。比较两组治疗前后中医证候评分、疼痛视觉模拟（VAS）评分和正中神经、胫后神经的运动神经传导速度（MNCV）和感觉神经传导速度（SNCV）；并比较两组外周血NF-κB、i NOS mRNA、NO含量。比较两组治疗总有效率。结果：治疗后观察组肢端刺痛、手足麻木、气短乏力、腰膝酸软评分均低于对照组（P<0.01），疼痛VAS评分低于对照组（P<0.01）；正中神经MNCV、SNCV和胫后神经MNCV、SNCV优于对照组（P<0.01），外周血NF-κB、NO、iNOS mRNA含量均低于对照组（P<0.01）；治疗总有效率高于对照组（P<0.05）。结论：温阳化瘀方可...