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目的建立一个检测培养MDCK细胞内MutT同源蛋白1(MTH1)基因表达的半定量RT-PCR体系。方法细胞培养后提取总RNA,经优化RT-PCR反应检测细胞内MTH1基因的表达量。条带经ScionImmage软件分析并与内参基因GAPDH相比,对体系的准确性、重复性和灵敏度进行分析,然后运用本体系检测流感病毒感染后MDCK细胞内MTH1的表达。结果扩增产物经测序分析证实与GenBank中该细胞的MTH1基因序列一致;灵敏度检测发现最低可从50ng总RNA中检出目的基因的表达;重复性测定发现,MDCK细胞MTH1与GAPDH灰度值比值的均值为(2.02±0.09,n=10),CV值为4.31%。结论本方法的准确性、重复性和灵敏度均较好,可用于半定量检测培养细胞尤其是MDCK细胞内MTH1 mRNA表达量。 相似文献
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氧化应激与老年性痴呆发病的相关性研究 总被引:3,自引:1,他引:2
氧化应激作为老年性痴呆的发病机制之一越来越受到学术界关注。活性氧可氧化DNA、RNA和蛋白质导致基因突变、转录错误、转录效率降低、翻译错误,以及影响蛋白质正常功能的发挥。该文就氧化应激对DNA、RNA和蛋白质的氧化损伤与老年性痴呆发病的相关性进行综述。 相似文献
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目的探讨呼吸衰竭患者血乳酸水平与急性肾损伤之间的关系,为肾损伤提供新的参考指标。方法收集在广州医学院第一附属医院住院治疗的呼吸衰竭病人动脉血,测定乳酸值。根据血肌酐变化,以AKI的RIFLE诊断标准分为3期,分析血乳酸与肾损伤之间的关系。结果肾损伤1期与2期或3期间血乳酸差异显著(P0.05),但2期与3期之间的差异无统计学意义(P=0.49);血乳酸水平与肾功能分期相关(r=0.347,P0.05),乳酸水平随肾损伤加重而上升,而氧张力PX水平在各期间差异无统计学意义。结论动脉血乳酸水平比PX更利于早期提示呼吸衰竭患者肾脏缺氧造成的急性功能损伤。 相似文献
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目的 探讨MEF2A第11号外显子CAG三联核苷酸重复序列的改变与其转录激活活性的相关性.方法 PCR法扩增富含组氨酸钙结合蛋白(histidine-rich calcium-binding protein,HRC)基因启动子/增强子序列,插入报告载体pGL3-Basic中,生成pGL3-HRC enhancer质粒,该质粒与全长野生型MEF2A cDNA表达质粒pCDNA-MEFcDNA,或含4~15个CAG的变异型MEF2A cDNA表达质粒pCDNA-MEFcDNA-CAGr,以及内参质粒pRL-TK,用脂质体转染法共转染于293T细胞,Westernblot检测MEF2A蛋白的表达,双荧光素酶检测系统测定报告分子的表达.结果 成功构建了MEF2A蛋白体外转录激活活性检测系统;所构建的含4~15个CAG序列的MEF2A变异蛋白,与含11个CAG序列的野生型MEF2A蛋白之间其转录激活活性没有显著性差异.结论 目前已发现的MEF2A第11号外显子CAG重复数目的 改变不会影响MEF2A蛋白的转录激活活性. 相似文献
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阿魏酸钠对β淀粉样蛋白25-35诱导的体外培养神经细胞损伤的保护作用 总被引:1,自引:1,他引:0
目的研究阿魏酸钠(SF)对β淀粉样蛋白25-35(A β25-35)诱导的原代培养神经细胞损伤的保护作用.方法以原代培养孕17~18d的SD大鼠胎鼠的大脑皮层神经细胞为观察对象.倒置显微镜下观察给药前后神经细胞的形态学变化,用MTT比色实验检测神经细胞活性,依据LDH漏出率检测神经细胞膜的损伤程度,以MDA生成量推测生物膜不饱和脂肪酸过氧化程度.结果与正常对照组相比,A β25-35(20μmol/L)处理24h,可使神经细胞活性显著下降(P<001),SF(10μmol/L,50μmol/L,100μmol/L,500μmol/L, 1ol/L)能剂量依赖地减轻A β25-35的细胞毒性.结论 SF能够对抗A β25-35诱导的培养皮层神经细胞的损伤. 相似文献
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目的探讨血清胱抑素C(CysC)测定在监测万古霉素致早期肾损害中的意义。方法既往无肾脏疾病、在广州医学院第一附属医院接受万古霉素治疗的患者60例,检测患者万古霉素血药浓度的同时检测CysC、血尿素氮(BUN)、血肌酐(Cre),分析其与血药浓度的相关性。结果 60例患者中CysC、BUN、Cre升高率分别为63.3%、47.5%和0;CysC与BUN或Cre对万古霉素所致肾损伤检测的阳性率差异有统计学意义(P<0.05);万古霉素浓度与CysC、BUN、Cre分别呈中度、低度相关以及不相关;万古霉素血药浓度<15mg/L与>15mg/L的患者,其CysC水平差异有统计学意义。结论 CysC是一项优于BUN和Cre的用于监测万古霉素所致早期肾损害的良好指标。 相似文献
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淀粉样前体蛋白在快速老化痴呆小鼠P8海马中表达的免疫组化学研究 总被引:4,自引:0,他引:4
目的:观察淀粉样前体蛋白(APP)在快速老化痴呆小鼠P8(SAMP8)海马中的表达,探讨其与SAMP8小鼠增龄性变化的关系。方法:选用1、4、8、12月龄的SAMP8,用同龄正常老化小鼠R1(SAMR1)作为对照组,每组各8只,用免疫组化方法检测海马区APP的表达。结果:APP主要在SAM鼠海马神经元胞浆内表达,海马不同区域均有表达。定量结果显示对照组SAMR1小鼠海马各区域APP的表达随月龄增加无显著性改变(P>0.05);而SAMP8小鼠APP的表达则随月龄增加而增加,8月龄和12月龄SAMP8小鼠CA1区的表达量显著高于1月龄组(P<0.05),也分别显著高于同月龄对照组(P<0.05),CA3区APP的改变稍晚于CA1区,与同品系1月龄小鼠及同龄对照组比较,12月龄时显示有显著性增加(P<0.05)。结论:SAMP8小鼠海马APP的表达随月龄增加而增加,提示APP表达量的增加与SAMP8小鼠的快速老化相关。 相似文献
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目的 观察H1N1型流感病毒诱导的MDCK细胞抗氧化相关修复基因MTH1表达量的变化.方法 MDCK细胞培养后,H1N1型流感病毒感染0、1、3、6、12、24、48 h,在各时间点经RT-PCR反应检测细胞内MTH1基因的相对表达量.结果 甲型H1N1流感病毒感染后0、6、12 h,MTH1基因的表达量与正常对照组差异无统计学意义;感染后1、3 h MTH1基因的表达量显著高于正常对照组;感染后24、48 h表达量显著低于正常对照组.结论 H1N1流感病毒感染细胞的MTH1基因表达的增加,可能增加细胞对DNA氧化损伤的修复能力,在流感发生和防御机制中起到作用. 相似文献
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血清Cys C与常规肾功能评价指标在肾脏功能评估中的对比研究 总被引:1,自引:1,他引:1
目的 通过对比血清胱抑素C(cystatin C,Cys C)与尿素氮(BUN)、血肌酐(Cre)在肾功能检测方面的差异.探讨在广州地区患者用Cys C评估肾小球滤过率(GRF)的可行性.方法 检测患者Cre、BUN、CysC,根据MDRD方程计算GFR;分析Cys C、BUN、Cre的检测灵敏度;观察Cys C和BUN分别与GFR的相关性;各指标在肾功能损害不同程度时含量的差异.结果 Cys C、BUN和Cre的灵敏度分别为85.7%、54.8%、38.1%.CysC和BUN与GFR的相关系数分别为-0.692、-0.580.Cys C在肾功能损害不同程度时含量差异显著.结论 CysC是反映肾功能损害的早期指标.并且可用以对肾功能进行初步分期. 相似文献