线粒体通透性转换孔在缺血预处理脑保护中的作用及机制

目的观察线粒体通透性转换孔(mitochondrial permeability transition pore,MPTP)在缺血再灌注及缺血预处理脑保护中的作用。方法将体外培养8 d的海马神经元分为五组,正常对照组(A组),缺血再灌注组(B组),缺血预处理+缺血再灌注组(C组),苍术苷+缺血再灌注组(D组),缺血预处理+苍术苷+缺血再灌注组(E组)。使用流式细胞术检测各组细胞凋亡率,罗丹明123染色流式细胞术检测线粒体膜电位,Western-blot检测Bcl-2,Bax的表达水平。结果与A组比较,其余四组线粒体膜电位均降低,神经元凋亡率升高(P<0.05);与B组比较,C组线粒体膜电位升高,神经元凋亡率升高,Bcl-2表达上调,Bax表达下调(P<0.05);与C组比较,E组粒体膜电位降低,神经元凋亡率升高,Bcl-2表达下调,Bax表达上调(P<0.05)。结论缺血预处理能有效减轻海马神经元缺血再灌注损伤,抑制缺血再灌注后神经细胞凋亡,其机制可能与抑制MPTP的开放有关。     

口腔正畸偶然发现也矫正屈光不正1例报告

<正> 我们在门诊正畸病人中在正畸过程中发现也矫正屈光不正,现报告如下: 患者刘×,男、22岁,泉州商校学生。1984年4月8日,因上颌前牙间隙较宽影响学习外语,要求正牙,经我们检查建议作橡皮圈牵引矫正间隙被患者采纳。检查:上颌前牙中度超(牙合),1|1之间距离1mm,21之间距离1mm。处理:1|1、2|2、之间用橡皮圈牵引。1984年4月15日复诊:自述原戴150D(度)近视镜看小字不清楚、经正畸治疗后约7天,视物变得清晰,小字也能看清楚了,同时感到矫治期间橡皮圈作     

UV—IR光谱指纹定量法鉴定六味地黄丸质量

目的建立六味地黄丸（LWDHW）浓缩丸UV-IR光谱指纹图谱,应用UV-IR光谱等权融合模型原理和系统指纹定量法评价其质量。方法将UV和IR光谱各数据点按平均值法分别生成对照指纹图谱,以光谱点为单位计算两类光谱的宏观定性和宏定量信息并以等权融合,计算各批样品的Sm和Pm值。结果以光谱指纹定量法鉴定10批六味地黄丸浓缩丸质量,鉴定出7批质量均为良好以上,2批质量一般,1批质量为次。结论所建立的UV-IR光谱指纹图谱用系统指纹定量法可全面有效地鉴别和控制LWDHW质量。     

HPLC等吸收双波长法同时测定桂附地黄丸中5种成分的含量

目的建立同时测定桂附地黄丸中没食子酸、5-羟甲基糠醛、马钱苷、芍药苷和丹皮酚5种成分的反相高效液相色谱分析方法。方法色谱柱为Scienhome Kromasil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相A为体积分数为0.1%的磷酸溶液、B为体积分数为0.1%的磷酸甲醇溶液,梯度洗脱,柱温(30.00±0.15)℃,检测波长为190～400 nm DAD检测。结果没食子酸、5-羟甲基糠醛、马钱苷、芍药苷和丹皮酚分别在0.06～1.60、0.06～1.60、0.05～0.60、0.05～0.60和0.12～3.20 g.L-1内峰面积与质量浓度呈良好的线性关系。5种成分的平均回收率分别为98.7%、101.2%、99.0%、98.5%和99.6%。结论该方法可用于桂附地黄丸的质量控制。     

用双标定量指纹法定桂附地黄丸平行五波长高效液相色谱对照指纹图谱标准

目的 用双标定量指纹法研究桂附地黄丸(Guifu Dihuang Wan,GFDHW)对照指纹图谱(RFP)来实现指纹图谱标准的复原.方法 采用HPLC等吸收双波长法测定了桂附地黄丸中没食子酸、5-羟甲基糠醛、芍药苷、马钱苷和丹皮酚含量.在210、230、246、265和280 nm5个特征检测波长处建立GFDHW平行五波长指纹谱;以没食子酸和丹皮酚为双参照物峰,采用双标定量指纹法恢复GFDHW-RFP.结果 以GFDHW中5组分含量测定结果和平行五波长指纹谱鉴定结果分别聚类分析比较不同厂家产品质量差异,结果以后者更为准确可靠.建立了GFDHW双标定量指纹法技术标准.结论 基于多指标定量分析和平行五波长高效液相指纹谱的双标定量指纹法能够确定RFP的标准制剂和实现实时随行定量检测GFDHW指纹图谱,这是GFDHW现代化的有效新方法.     

一种评价多波长中药色谱指纹图谱新方法-均谱法

目的建立一种评价多波长中药色谱指纹图谱的新方法-均谱法(MFM),以桂附地黄丸(Guifu Dihuang Wan,GFDHW)平行五波长(PFW)高效液相色谱(HPLC)指纹图谱的均谱为基础,依据系统指纹定量法(SQFM)鉴定桂附地黄丸整体质量。方法采用反相RP-HPLC法,以丹皮酚(POL)为参照物峰,于210、230、246、265、280 nm紫外波长下检测,分别确定了54、58、47、47和44个共有指纹峰,用S1~S3和S5~S9等8批样品的HPLC指纹图谱生成对照指纹图谱,建立GFDHW的PFW-HPLC指纹图谱,并评价12批样品的质量。将同一样品的5个波长下HPLC指纹图谱的信号加和后求平均值作为该样品的均谱,用S1~S3和S5~S9等8批样品HPLC均谱按平均值法生成对照指纹均谱来综合评价12批样品均谱。结果 12批样品用MFM鉴定的结果与用PFW结合SQFM所鉴定的结果一致。结论 MFM能最大限度保留指纹峰,实现化学指纹信息最大化,同时能有效改善指纹信号质量,是HPLC-DAD三维指纹图谱的简化代表,因此可作为综合定量鉴定中药质量的有效、可靠和简便方法。     

线粒体分裂抑制剂在大鼠脑缺血再灌注损伤中的保护作用及其机制

目的 探讨线粒体分裂抑制剂(Mdivi-1)在大鼠脑缺血再灌注损伤线粒体凋亡过程中的保护作用及其机制. 方法 按随机数字表法将成年健康雄性Wistar大鼠60只分为假手术组、模型组和Mdivi-1预处理组,每组各20只,其中模型组和Mdivi-1预处理组大鼠采用线栓法经左侧颈外-颈内动脉插线建立脑缺血再灌注损伤模型,并于脑缺血前15 min预先尾静脉给予等容量二甲基亚砜和Mdivi-1(1.2 mg/kg).再灌注24 h后应用TUNEL法观察各组大鼠脑组织神经细胞凋亡情况,SABC免疫组化染色检测细胞色素C(CytC)阳性细胞表达,Western blotting检测CytC蛋白表达,RT-PCR检测CytC mRNA表达. 结果 与假手术组比较,模型组神经细胞凋亡率、Cyt C阳性细胞率、Cyt C蛋白及mRNA表达水平(4.16％±0.25％vs 45.49％±0.77％；4.22％±0.20％vs55.12％±1.47％;0.395±0.002 vs 0.932±0.001;0.467±0.003 vs 0.789±0.009)显著升高,差异有统计学意义(P＜0.05).应用Mdivi-1预处理后神经细胞凋亡率、CytC阳性细胞率、CytC蛋白及mRNA表达水平(30.76％±0.51％; 35.07％± 1.42％; 0.594±0.002；0.523±0.004)较模型组明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 Mdivi-1通过阻断线粒体-Cyt C途径从而抑制细胞凋亡,减轻脑缺血再灌注损伤.     

桂附地黄丸的毛细管电泳指纹图谱研究

目的建立了桂附地黄丸(Guifu Dihuang Wan,GFDHW)毛细管区带电泳指纹图谱(capillary electropeore-sis fingerprint,CEFP),为其质量控制提供依据。方法以50 mmol.L-1硼砂为背景电解质(BGE)溶液,采用未涂层石英毛细管(75 cm×75μm,有效长度75 cm),以色谱指纹图谱分离量指数RF为目标函数优化试验条件,紫外检测波长230 nm,运行电压12 kV。结果以没食子酸(GA)峰为参照物峰,确定18个共有指纹峰,建立了GFDHW-CEFP。通过对12批样品聚类分析确定用其中10批生成对照CEFP(RCEFP),以此RCEFP为标准用系统指纹定量法鉴别12批桂附地黄丸质量。鉴定出7批质量合格,2批含量明显偏低,3批含量明显偏高,且分布比例不合格。结论所建立的毛细管电泳指纹图谱具有较好的精密度和重现性,为全面控制和评价桂附地黄丸的质量提供了一种新的方法。