应用半重叠TCR γ特异性引物的PCR方法检测淋巴细胞白血病

采用更加敏感的半重叠式TCRγ特异性引物的PCR方法，对28例ALL初治、CR及BMT患儿进行检测，并用消化煮沸及酚抽提法分别对所有骨髓标本进行DNA提取，将PCR结果进行比较。结果表明：消化煮沸法用于微量标本的DNA提取优于酚抽提法，28例ALL患儿中16例检出TCRγ特异性条带，MRD组18例，阳性检出12例，其中免疫分型标记为B细胞型的4例，占25％，免疫标记为T细胞型者全部出现TCRγ阳性条带。并对该引物的语系特异性及双克隆重排问题进行了理论探讨。     

PCR技术检测急性淋巴细胞性白血病微小残留病的应用

ＰＣＲ技术检测急性淋巴细胞性白血病微小残留病的应用张素娟，赵洪宁，赵彤，朱梅刚，赵菲（第一军医大学病理教研室广州５１０５１５济南军区医学高等专科学校）微小残留病（ｍｉｎｉｍａｌｒｅｓｉｄｕａｌｄｉｓｅａｓｅ，ＭＲＤ）是白血病完全缓解（ＣＲ）后体内残留...     

急性淋巴细胞性白血病患儿WT1基因与肿瘤耐药基因表达的关系

目的　探讨儿童急性淋巴细胞性白血病 (ALL)WT1基因与肿瘤多药耐药基因 (mdr1)表达的关系 ,为临床判断预后、指导个体化治疗提供依据。方法　采用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)对 33例ALL患儿的同一份标本进行WT1mRNA及mdr1mRNA检测 ,用GQS 96 0图像处理系统软件进行半定量分析。结果　 (1)初治组ALL的WT1及mdr1阳性率分别为 6 7%及 15 % ,完全缓解组分别为 2 2 %及 18% ,复发难治组分别为 92 %及 75 % ,初治组和复发难治组WT1阳性率及表达水平与完全缓解组相比 ,P均 <0 0 1,复发难治组中mdr1阳性率及表达水平与初治组和完全缓解组相比 ,P均 <0 0 1,差异均有极显著性 ;(2 )WT1与mdr1表达无明显相关关系 ,但复发难治组WT1与mdr1均阳性者多 ,占 6 7% ,均阴性的为 0 ;与初治组及完全缓解组比较差异有极显著性。结论　ALL患儿WT1基因表达的同时出现肿瘤多药耐药基因表达 ,是白血病难治及复发的重要因素 ,提示预后差。动态监测WT1及mdr1,可预测白血病难治及复发 ,指导个体化治疗 ,有利于清除微小残留白血病细胞     

280名正常人四肢振动觉阈值定量测定

本文应用振动觉定量测定仪对280名正常健康个体进行四肢振动觉阈值测定,并划定各年龄组的正常值范围。振动觉定量测定有助于神经系疾病的早期检出,病情判斯及疗效观察,是一项简便、可重复、非创伤性的检查方法。     

多聚酶链反应检测淋巴细胞白血病微小残留分析

根据ＩｇＨ、ＴＣＲ克隆性基因重排原理，用半重叠ＰＣＲ和单轮ＰＣＲ技术分别同一份ＡＬＬ患儿的骨髓标本进行检测，并对两法的检出率进行了比较。结果：半重叠ＰＣＲ阳性检出率为８０％，单轮ＰＣＲ阳性检出率５２％，前者较后者提高了２８％，尤其对ＡＬＬ－ＭＲＤ组的检测，半重叠ＰＣＲ的阳性检出率有显著提高。     

改良裂解法提取微量组织DNA的研究

为了探讨微量组织核酸的更快速、简便、有效的提取方法,采用改良裂解法提取２５ 例微量胃粘膜组织标本的核酸,同时与经典的饱和酚抽提法和简便的消化煮沸法进行比较（ 各２５ 例） ,用１ ％ 琼脂糖电泳观察结果,并用分光光度法检测提取核酸的量。结果显示该法的提取纯度接近酚抽提法,所获核酸的量较多,而所需的时间最短;由于该法的裂解液中含有 Ｒ Ｎ Ａ 酶抑制剂,所以除了可以提取 Ｄ Ｎ Ａ,还可以获得一定量的 Ｒ Ｎ Ａ,用于反转录 Ｐ Ｃ Ｒ,对微量组织的 Ｒ Ｎ Ａ 提取提供了一种有效而实用的方法。     

慢性乙肝病人血清HBV-DNA含量与病情的关系

用定量聚合酶链反应方法按病情分组检测了 72例HBeAg阴性慢性乙型病毒性肝炎病人血清BHV -DNA的含量。结果 ,轻、中、重三组血清HBV -DNA阳性率分别为 2 9.4 %、34 .4 %、34 .8% ,含量分别为 1 0 3.3± 0 .2 、1 0 3 .6± 0 .7、1 0 4 .1± 0 .4 (拷贝 /ml)。结果提示 ,HBeAg阴性慢性乙型肝炎病人病情的活动或重化与病人血清HBV -DNA含量无关     

WT1基因表达对儿童微量残留白血病检测的意义

ＷＴ1基因是最早发现与儿童肾母细胞瘤的发生、发展有关的基因。近年来有人发现ＷＴ1在其他恶性肿瘤中表达 ,尤其是在许多类型的白血病细胞中高表达[1 ] 。我们采用筑巢式逆转录 聚合酶链反应 (ＲＴ ＰＣＲ)方法 ,测定了儿童白血病患儿ＷＴ1基因的表达 ,以探讨ＷＴ1基因表达在微量残留白血病 (ＭＲＤ)检测中的意义。对象和方法1　对象　选择 1998年 6月以来收治的急性白血病 (ＡＬ)患儿 5 2例 ,其中男 36例 ,女 16例 ,年龄 1.5～ 14岁。急性淋巴细胞白血病 (ＡＬＬ) 32例 ,急性非淋巴细胞白血病 (ＡＮＬＬ) 2 0例 ,8名正常儿童外周血及 8例…     

应用半重叠TCRγ特异性引物的PCR方法检测淋巴细胞白血病

彩更加敏感的半重叠式ＴＣＲγ特异性引物的ＰＣＲ方法，对２８例ＡＬＬ初治、ＣＲ及ＢＭＴ患儿进行检测，并用消化煮沸及酚抽提法分别对所有骨髓标本进行ＤＮＡ提取，将ＰＣＲ结果进行比较。结果表明：消化煮沸法用于微量标本的ＤＮＡ提取优于酚抽提法，２８例ＡＬＬ患儿中１６例检出ＴＣＲγ特异性条带，ＭＲＤ组１８例，阳性检出１２例，其中免疫分型标记为Ｂ细胞型的４例，占２５％，免疫标记为Ｔ细胞型者全部出现ＴＣＲγ阳性条